邓新燕
- 作品数：30 被引量：117H指数：5
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- SD大鼠胚胎上胚层干细胞的分离与培养
- 2011年
- 目的从SD大鼠胚胎中获取附植后胚胎上胚层干细胞(post-implantation epiblast stem cells,Episc),并探讨组织来源、胎龄、细胞因子、传代方法等条件对SD大鼠Episc(SD Episc)分离与培养的影响。方法分别取5.5d和7.75d胎龄囊胚上胚层(epiblast),以昆明小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层,于添加白血病抑制因子(leucocyte inbibitory factor,LIF)或活化素(activin)的基础培养基中,进行原代培养。分别采用机械法和胰酶消化法对克隆集落进行传代。最后通过碱性磷酸酶染色对克隆集落进行鉴定分析,并对其体外分化能力进行检测。结果培养于LIF培养基和activin培养基中的囊胚均发生严重分化。培养于LIF的培养基中的epiblast也发生了严重的自发分化。而在activin培养基中,epiblast形成SD Episc原代集落。经机械法传代获得AKP染色阴性、能形成拟胚体的SD Episc。结论利用细胞因子activin,结合机械传代法可从7.75d胎龄SD大鼠胚胎中获得SD Episc。
- 卢安尚张薇邓新燕赵勇郭思政郭中敏
- 绿色荧光蛋白嵌合体小鼠的建立和鉴定被引量：13
- 2004年
- 为研究嵌合体动物中供体胚胎干细胞 (ES)在宿主胚胎发育中的走向和定位 ,同时探讨绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因在转基因动物制作中的应用价值 ,本研究将pEGFP N1基因导入小鼠ES D3 细胞系 ,得到稳定表达GFP的胚胎干细胞亚系ES D3 GFP ,通过对昆明小鼠的囊胚腔注射 ,获得了 4只表达绿色荧光蛋白的嵌合体小鼠。其中 1只存活至成年 ,3只出生时死亡。荧光显像及组织PCR检测显示了绿色荧光蛋白在小鼠体内的嵌合情况。以绿色荧光为指标可实现活体水平的动态观察 ,本实验首次观察到以GFP为指标所示的机体嵌合情况与根据毛色嵌合推测的机体嵌合情况存在很大差异 ,以GFP为嵌合指标更加全面而准确 ;但不排除GFP对小鼠发育存在一定毒性的可能 ;另外 ,有结果显示供体ES细胞在宿主体内除了大片补丁状嵌合外 ,还存在细胞散在嵌合的情况 ,后者提示了在组织中利用GFP对ES细胞实施单细胞追踪和实时观察的可行性 。
- 招霞马芸陈系古葛坚黄冰邓新燕喻瓴赖英荣黄春浓
- 关键词：嵌合体ES细胞绿色荧光蛋白体胚
- 小鼠胚胎切割及半胚体外培养被引量：4
- 1999年
- 目的 为基因型完全相同的同卵双胞胎人类动物模型的建立积累基础资料。方法 Ｃ５７ ＢＬ６Ｊ雌性小鼠与ＫＭ 雄性小鼠交配，见栓３－５ｄ 采集小鼠晚期桑椹胚和早期囊胚，应用显微手术刀直接分割法进行胚胎二等份分割，所得半胚体外培养，观察其发育情况。结果 晚期桑椹胚分割成功率是９１－３ ％ ，半胚发育率为５７－１ ％ ，早期囊胚分割成功率约为８９－２ ％ ，半胚发育率为７１－２ ％ 。结论 Ｃ５７ ＢＬ６Ｊ 小鼠与ＫＭ 小鼠的Ｆ１ 代胚胎经切割后能在体外良好发育，该资料可用于同卵双胞胎分化发育的研究及人类双胞胎动物模型的制作。
- 邱国光黄冰黄文革陈颖青邓新燕钟女奇何爱菊陈系古
- 关键词：体外培养晚期胚胎桑椹胚囊胚
- 小鼠卵母细胞体外成熟、体外受精的效果观察被引量：8
- 1999年
- 目的 研究不同培养条件对小鼠卵母细胞体外成熟及体外受精率的影响。方法 小鼠卵母细胞分别在含有FSH、BSA和胰岛素的培养液中体外成熟,在Whitten 氏液中体外受精,比较体外成熟率、体外受精率。结果 1- 裸卵(DO) 的体外成熟率、体外受精率(81-4% ,31-0 % ) 均高于卵丘卵母细胞复合体(COC)(48-6 % ,27-1% ) 。2- 在培养液中添加FSH、胰岛素和BSA,卵母细胞的体外成熟率为77-9 % ,82-3% 、60-7% ;体外受精率为77-2 % 、72-6 % 、26-7% ;2 - 细胞率为49-2 % 、34-2 % 、10-0% 。胰岛素组的卵母细胞IVM 率最高,但IVF率、2 - 细胞率低于FSH 组。3- 添加BSA的两组的体外受精率只有26-7 % 、25-8 % ,显著低于其他组,其体外成熟率也较添加FSH 和胰岛素的组成。4- 排出第一极体(PbI) 的卵母细胞的体外受精率和2 - 细胞率(85-9 % ,22-4% ) 均高于GV期卵母细胞(71-1 % ,12-9 % ) 。结论 1- 卵丘卵母细胞(COC) 较裸卵(DO) 的体外成熟率、体外受精率都低,差异显著(P成熟< 0-01;P受精< 0-05) 。2-FSH 和胰岛素均能提高小鼠卵母细胞的体外成熟率、体外受精率。3-BSA可以降低小鼠卵母细胞体外受精率,差异极显著。4-GV 期卵母细胞的体外受精率显著低于体外培养的排出第一极体的卵母细胞(P2 - cell < 0-05,P受精<0-05)
- 乌日琴邓新燕陈颖青都同功陈系古
- 关键词：体外受精FSH体外成熟GVBSA
- 不同条件下培养小鼠胚胎干细胞被引量：16
- 2001年
- 都同功黄冰钟女奇邓新燕陈颖青陈系古
- 关键词：胚胎干细胞小鼠
- BALB/c小鼠胚胎干细胞系的建立及其嵌合体小鼠的获得被引量：33
- 2001年
- 目的:建立BALB/c小鼠胚胎干细胞系,并用于制作嵌合体小鼠。方法:从BALB/c小鼠囊胚内分离培养内细胞团块。建系后,进行C_(57)BL/6小鼠受体囊胚腔注射,制作嵌合体小鼠。结果:建立了我国第一株BALB/c小鼠胚胎干细胞系。该细胞系具有典型的ES细胞形态,碱性磷酸酶强阳性,核型正常以及具有分化为三种胚层组织的能力,并已产生5只嵌合体小鼠。结论:建立的BALB/c小鼠胚胎干细胞系具有胚胎干细胞的各种特点,可用于体内外诱导分化研究。在进一步观察生殖系嵌合情况后,决定是否可应用于基因打靶等转基因动物的制作。
- 黄冰陈系古邓新燕林以理陈颖青黄春浓梁英杰
- 关键词：胚胎干细胞系嵌合体建系
- 肝脏特异性可调控丙型肝炎病毒核心蛋白表达的转基因小鼠模型的建立被引量：2
- 2007年
- 【目的】制备TRE-HCV-C转基因小鼠,为四环素调控系统的体内研究提供了反应部分的转基因小鼠,以便与本实验室同时建立的调控部分的小鼠共同作用,为进一步建立双转基因小鼠模型奠定基础,更为丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)的发病机制的研究提供一个实用方便的模型。【方法】重组构建含有目的基因HCV-C、TRE序列和SV40 polyA的转基因载体pTRE-HCV-C,以显微注射的方法将1.153kb的转基因片段注入BALB/C母鼠的受精卵,出生动物及其后代经PCR初步筛选出阳性,再经Southern杂交对阳性鼠基因组DNA标本行进一步鉴定。用转基因阳性小鼠和整合有肝脏特异性启动子ApoE和rtTA基因的另一品系转基因小鼠杂交,得到子代F1小鼠,通过免疫组织化学来初步检测HCV-C在肝脏中特异性的可调控性的表达。【结果】产生了5只整合有TRE-HCV-C基因的首建鼠,以及它的子代也带有此基因。与基因组上整合有肝脏特异性启动子ApoE和rtTA基因的转基因小鼠杂交后,得到子代F1小鼠,特定时间与DOX作用后,小鼠肝脏的免疫组织化学结果表明,TRE-HCV-C小鼠为丙型肝炎病毒核心蛋白的发病机制研究提供了一个良好的动物模型工具。【结论】成功制备了HCV-C转基因小鼠,可利用四环素调控系统来研究HCV中的C基因对小鼠的作用,为进一步建立四环素调控系统调控下表达HCV-C基因双转基因小鼠模型奠定基础,也是HCV-C基因功能研究及与肝细胞癌的关系的机制研究的一个有用工具。
- 杨国柱傅思莹黄冰单于肖东马芸邓新燕陈系古
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白转基因小鼠模型组织特异性表达
- 中国体外替代方法研究进展
- 实验动物的福利和动物保护运动呈现全球化趋势，世界各国普遍开展了以替代、减少和优化为核心的“3R”运动，采用各种手段代替传统的动物实验。一些研究机构和实验室相继开始研究动物实验的替代方法，其对比于动物实验具有高效、低耗等优...
- 包慧敏宋莹邓新燕杨力衡郭中敏
- 关键词：动物实验
- 不同月龄SPF级Wistar大鼠血液学及生化学指标正常值范围探讨
- 目的探讨年龄、性别因素对SPF级Wistar大鼠血液生理、生化指标的影响,建立Wistar大鼠各年龄段的血液生理、生化正常参考值范围。方法通过收集本实验室近一年来的1～8月龄SPF级Wistar大鼠血液学和血生化指标检测...
- 钱江张薇黎福荣唐彬付新录赵勇邓新燕蔡卫斌
- 关键词：WISTAR大鼠血液学血生化
- 文献传递
- 严密型四环素调控系统转基因首建鼠的建立
- 2008年
- 目的制备ApoE-rtTA-tTS转基因小鼠1,为严密型四环素调控系统的体内研究提供调控部分的转基因小鼠,以便与反应部分小鼠交配得到双转基因小鼠。方法重组构建含目的基因的质粒pApoE-rtTA-tTS,应用显微注射法将其注入母鼠的受精卵,再植入代母输卵管,出生小鼠经PCR初步筛选出阳性,再经Southern杂交对阳性小鼠基因组DNA标本进一步鉴定。结果产生了2只整合ApoE-rtTA-tTS基因的首建鼠。结论成功制备了ApoE-rtTA-tTS转基因小鼠,为下一步建立严密型四环素调控系统的双转基因小鼠模型奠定了基础。
- 帅丽芳张若霜邓新燕赵勇孙金海唐博恒陈系古
- 关键词：显微注射
