袁颖
- 作品数：13 被引量：36H指数：4
- 供职机构：江苏省神经再生研究重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 牛膝多肽对小鼠坐骨神经损伤修复促进作用的研究
- 研究从传统中药牛膝水提液中提取的牛膝多肽对小鼠坐骨神经损伤修复的促进作用。ICR小鼠50只,雌雄各半,行左侧坐骨神经夹伤术。术后随机分为5组:牛膝多肽低、中、高剂量组(剂量分别为1、4、16mg/kg),弥可保组(阳性对...
- 袁颖沈妹妹姚健胡楠丁斐顾晓松
- 银杏叶提取物对缺氧复氧诱导的大鼠皮层神经元凋亡和Bcl-2蛋白表达的影响被引量：1
- 2006年
- 目的观察银杏叶提取物(EGb)及其活性成份银杏总内酯(Gin)对缺氧复氧诱导的大鼠皮层神经元凋亡的保护作用。方法选用胎龄14～16d的SD胎鼠的大脑皮层细胞进行原代培养,建立缺氧复氧(H/R)神经元损伤模型。实验分为正常组、缺氧复氧(H/R)组、药物实验(EGb、Gin)组、阳性对照(MK801)组。应用MTT、TUNEL及Westernblot方法。结果EGb和Gin均能提高皮层神经元缺氧复氧后的存活率,EGb和Gin组神经元的凋亡率低于H/R组且Bcl2蛋白表达量较H/R组升高。结论EGb和Gin可部分拮抗缺氧复氧条件下体外培养的皮层神经元的凋亡,该保护作用与其诱导Bcl2蛋白表达有关。
- 袁颖沈卫星张沛云金淑仪朱俐
- 关键词：皮层神经元缺氧复氧银杏叶提取物
- 缺氧复氧诱导的大鼠海马神经元凋亡和一氧化氮合酶表达变化及银杏叶提取物的作用被引量：4
- 2005年
- 目的:观察银杏叶提取物(EGb)及其活性成份银杏总内酯(Gin)对缺氧再复氧诱导的大鼠海马神经元凋亡及一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)表达影响。方法:选用胎龄15d的SD胎鼠的大脑海马细胞进行原代培养,建立缺氧再复氧海马神经元损伤模型。实验分以下几组:正常组、缺氧复氧组、EGb组、Gin组、阳性对照组(MK801组)。应用TUNEL原位末端标记法定量分析细胞凋亡以及NADPHd组织化学染色法观察细胞NOS的表达。结果:(1)TUNEL免疫细胞化学染色结果显示,预先加入EGb和Gin的药物组神经元的凋亡率明显低于缺氧复氧组;(2)NADPHd组织化学染色结果显示,预先加入EGb和Gin的药物组抑制神经元NOS表达,NADPH阳性细胞减少。结论:EGb及其活性成份Gin对缺氧再复氧损伤的海马神经元具有保护作用,可部分拮抗缺氧再复氧条件下体外培养的海马神经元的凋亡,抑制NOS的表达。
- 袁颖沈卫星张沛云金淑仪朱俐
- 关键词：海马神经元缺氧复氧银杏叶提取物
- 坐骨神经损伤与再生过程中背根节神经元基因表达模式分析
- 2013年
- 目的:探讨坐骨神经损伤与再生过程中,背根节神经元轴突再生的分子调控模式和机理。方法:采用表达谱芯片分析坐骨神经离断后,L4-6背根节神经元基因表达的变化,并分析差异基因所反映的核心生物学过程的变化。结果:(1)坐骨神经离断后,近端坐骨神经差异基因的数量表现为先上升再下降的趋势,但背根节神经元呈现为波浪形的增加。(2)核心生物学过程的差异基因数量变化:刺激检测、G-蛋白偶联受体信号通路、细胞表面受体连接信号转导均呈波浪形变化。防御反应、炎症反应、免疫反应、轴突生成表现为持续性增加。(3)与轴突生成相关的差异基因表达变化结果显示:Lhx4、Nkx2-9、Efnb3、Titf1、Apoa4表现为波浪形增加。Mapk8ip3、Zfp312、Gap43在长时间点表达增加。Tnn、Efnb1一开始降低,Notch1、Nefl、Bmpr1b等基因表现为长时间点表达降低。结论:坐骨神经离断后,背根节神经元差异基因和核心生物学过程的变化趋势,反映了周围神经损伤与再生过程中轴突再生的分子调控模式。
- 李石营袁颖王勇军丁斐顾晓松
- 关键词：基因表达谱芯片背根节神经元坐骨神经系统生物学
- 牛膝多肽可能通过ERK1/2途径诱导PC12细胞向神经元分化被引量：1
- 2013年
- 目的:研究牛膝多肽(ABPP)诱导PC12细胞向神经元分化的作用,初步探讨ABPP作用于PC12细胞的信号转导途径。方法:以体外培养的PC12细胞为研究模型,观察在低血清的情况下不同浓度ABPP(0.25、0.50、1.00μg/ml)诱导PC12细胞发生的形态学改变。采用免疫荧光细胞化学法,观察神经丝蛋白(NF-H)在ABPP诱导分化的PC12细胞中的表达;采用Western blot法观察ABPP(1.0μg/ml)加药后不同时间段(0、6、12h和1、2、3、7d)和不同浓度ABPP(0.25、0.50、1.00μg/ml)加药2 d后对PC12细胞ERK1/2活性的影响,同时应用ERK1/2特异性拮抗剂PD98059与ABPP共培养PC12细胞,分析ABPP对PC12细胞的作用与ERK1/2通路的关系。结果:ABPP处理3 d后,部分PC12细胞开始出现神经元样的形态。随着加药时间延长具有神经元样的细胞逐渐增多,到7 d时,可以见到神经生长因子(NGF)和ABPP处理组PC12细胞的突起都显著增多,能形成网络;14 d时,这种现象愈发显著。加药后7 d和14 d,ABPP各浓度组的细胞分化率以及细胞突起长度均明显提高,且存在明显的剂量反应关系。加药第7天和第14天,ABPP高剂量组与NGF组的PC12细胞均出现NF-H标记阳性的分化细胞。ABPP对ERK1/2的激活作用存在明显的量效关系,以1.0μg/ml作用2 d为最大。当用PD98059抑制ERK1/2的活化时,ABPP对ERK1/2的激活作用被部分阻断。结论:ABPP具有诱导PC12细胞神经元性分化的作用,此作用可能是通过ERK1/2信号转导途径实现的。
- 袁颖于舒沈卫星赵华龙吴泓枢顾晓松丁斐
- 关键词：PC12细胞ERK1
- 银杏内酯对缺氧诱导的大鼠皮层神经元早期凋亡的影响被引量：11
- 2003年
- 目的 :观察银杏内酯 (ginkgolide ,Gin)对缺氧诱导的大鼠皮层神经元凋亡的保护作用。方法 :选用胎龄 14～ 16d的SD胎鼠的大脑皮层细胞进行原代培养 ,建立缺氧神经元损伤模型。实验分为药物实验组 (Gin组 )、空白对照组、阳性对照组 (MK 80 1) ,每组均进行有糖和无糖培养两种处理。应用MTT法分析细胞存活率、AnnexinV PE双标流式细胞仪法定量分析细胞早期凋亡。结果 :MTT结果显示 ,Gin使皮层神经元存活率明显增加 ,且有糖的缺氧组皮层神经元存活率优于无糖组 ;流式细胞仪测定结果显示 ,预先加入Gin(终浓度 37 5 μg/ml)的一组神经元的凋亡峰明显低于空白组 ,而无糖处理组凋亡峰均高于有糖处理组。结论 :银杏内酯 (37 5 μg/ml)对缺氧损伤的皮层神经元具有保护作用 ,可拮抗缺氧条件下体外培养的皮层神经元的早期凋亡。
- 袁颖张沛云金淑仪陈宏山王晓冬陈罡
- 关键词：皮层神经元缺氧复氧银杏内酯
- 牛膝多肽促大鼠海马神经元突起的生长被引量：4
- 2009年
- 目的研究牛膝多肽(ABPP)对体外培养的大鼠海马神经元突起生长的促进作用及其对生长相关蛋-白43(GAP-43)和神经丝蛋白(NF-H)mRNA和蛋白表达的影响。方法以体外原代培养的胎鼠海马神经元为研究模型,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)检测ABPP对海马神经元细胞活性的影响,通过免疫荧光细胞化学法,采用Image-Pro Express软件测量不同浓度ABPP(0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L)加药24h,对海马神经元神经突起生长的影响;通过实时荧光定量PCR法定量分析不同浓度ABPP(0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L)加药6h,对海马神经元GAP-43和NF-H基因表达的影响;采用免疫印迹法观察不同浓度ABPP(0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L)加药24h后,对海马神经元GAP-43和NF-H蛋白表达的影响。同时应用胞外信号调节激酶(ERK)特异性拮抗剂PD98059与ABPP共培养海马神经元,分析ABPP对海马神经元的作用与ERK通路的关系。结果ABPP可有效地促进海马神经元突起的生长,加药后24h浓度为1.0mg/L,作用最强;实时荧光定量RT-PCR、免疫荧光细胞化学法和免疫印迹检测的结果表明,ABPP能增加体外培养的海马神经元GAP-43和NF-H的mRNA和蛋白表达,PD98059可抑制该过程。结论ABPP能促进体外培养的海马神经元神经突起的生长,其作用与上调GAP-43和NF-H基因的表达相关,并可能与ERK通路有关。
- 袁颖周松林顾晓松丁斐
- 关键词：海马神经元生长相关蛋白-43免疫荧光组织化学
- 大鼠骨髓基质干细胞的分离培养及鉴定的初步研究被引量：1
- 2003年
- 目的 :建立从成年SD大鼠股骨分离、培养并鉴定骨髓基质干细胞的方法。方法 :分离成年SD大鼠的股骨 ,用含 2 0 %胎牛血清的IMDM培养基冲洗出骨髓 ,利用骨髓基质干细胞附能力强的特点 ,分离、培养骨髓基质干细胞。采用三标 (CD11b ,CD45 ,CD90 )免疫荧光直接染色方法对骨髓基质干细胞进行鉴定。结果 :分离培养的细胞具有骨髓基质干细胞的基本特性。结论 :初步建立了大鼠骨髓基质干细胞分离、培养。
- 林巍巍陈罡袁颖王晓冬
- 关键词：骨髓基质干细胞细胞分离细胞培养
- 大鼠皮质脊髓束神经电信号的记录与分析方法研究被引量：3
- 2011年
- 目的：探索皮质脊髓束（CST）电生理信号的采集记录方法,分析描述电信号的特征,从而为通过植入式微电极阵列进行信号采集的记录方法建立一定的实验基础,为将来进一步研究脊髓损伤修复与功能重建提供有价值的神经电生理基础资料。方法：使用神经信号采集处理系统（Cerebus System）,在SD大鼠的脊髓T8节段处的皮质脊髓束内通过插入微电极,记录大鼠皮质脊髓束神经电信号。利用神经信号分析软件Offline Sorter、Neuroexplorer对已存储的信号文件进行波形特点的描述,包括波长、波幅、放电频率、同一电极上记录到的不同放电单元之间的同步性、两根电极上记录到的不同放电单元之间的同步性、放电信号的峰间期（ISI）分析等。结果：长时间稳定记录到连续的皮质脊髓束自发放电信号,一般在同一电极上记录到3~4个来自不同放电单位（细胞）的放电信号。皮质脊髓束自发放电信号的波形呈双向型,波宽为0.6~1.3 ms,波幅为百μV级。在多次实验状态下均能达到很高的信噪比,信号采集效果理想。经快蓝（LFB）染色确认记录电极尖端位于皮质脊髓束内。结论：本实验采用Cere-bus神经信号采集处理系统,利用记录电极可在大鼠的皮质脊髓束内较长时间稳定地记录到较为稳定的微伏级神经电信号,并可进行有意义的神经电信号特征分析,为进一步研究脊髓损伤修复与功能重建提供了有价值的神经电生理基础资料。
- 沈卫星袁颖姜正林吕广明姚健
- 关键词：皮质脊髓束信号分析
- 人工组织神经移植物对大鼠陈旧性坐骨神经缺损(60天)的修复作用被引量：3
- 2007年
- 目的观察人工组织神经移植物对陈旧性大鼠坐骨神经缺损的修复作用。方法切除成年SD大鼠部分左侧坐骨神经,饲养60d形成陈旧性坐骨神经缺损后,以人工组织神经移植物修复缺损,同时设自体神经修复和不修复两对照组。修复术后3个月做神经-肌复合电位、腓肠肌湿重及再生神经形态学检测。结果人工组织神经移植物修复组实验侧的运动神经传导速度、腓肠肌湿重、移植物远侧再生神经有髓神经纤维髓鞘厚度等结果与自体神经修复组相似。不修复对照组则未记录到神经-肌复合电位,未观察到再生神经纤维结构,腓肠肌湿重明显小于人工组织神经移植组和自体神经移植组。结论人工组织神经移植物在一定程度上能修复缺损60d的大鼠坐骨神经。
- 姚健施伟袁颖林巍巍陈雪李奕王晓冬
- 关键词：人工组织神经移植物神经再生神经桥接
