王娟
- 作品数：16 被引量：28H指数：3
- 供职机构：陕西师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学理学更多>>
- 过表达热休克蛋白70提高CHO细胞表达抗体的能力被引量：3
- 2011年
- 通过在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中过表达热休克蛋白70以提高其表达抗体的能力。首先从中国仓鼠基因组DNA中扩取HSP70基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1-HSP70,再将重组质粒稳定转染到CHO/dhfr-细胞中,筛选获得稳定的细胞系,运用RT-qPCR检测和Western blot分析HSP70基因的过表达。在过表达HSP70的CHO细胞组和对照细胞组(转染空载体pcDNA3.1的CHO细胞组)中分别转染表达抗-HBs的质粒,应用ELISA检测两组细胞表达抗-HBs的能力。RT-qPCR结果显示实验组CHO细胞中HSP70基因的表达量明显高于对照组细胞;ELISA检测结果表明过表达HSP70的CHO细胞组抗-HBs表达量高于对照组细胞(P<0.05)。研究揭示HSP70能有效促进细胞内分泌性蛋白的表达。
- 黄芬安小平李存何彰华张宝中米志强王娟童贻刚
- 关键词：CHO细胞HSP70抗体
- 同性婚姻立法机理:同性情感发展的自然性和社会性分析
- 2017年
- 同性情感的发育起源和遗传机制,以及发展的自然性和社会性,是美国联邦政府公布法案对同性情感实施法律保护的重要证据,同性婚姻合法化成为人类婚姻认知理念的历史性进步。本文探讨同性情感的社会学和生物科学史的自然性,阐述生物学进展在该历史进程中起到的重要作用:第一,同性情感社会认同的发展过程是一个漫长的社会历史过程,探讨该历程的特性对认清历史的过程和现实的合理性具有重要意义;第二,在动物界同性趋向与环境密切相关,对人类同性情感行为学中性别趋向是否有类似机理存在,可能有一定借鉴价值;第三,2016年发现性别起源的古菌嵌入学说也为性别的产生提供了崭新的研究途径,为认识同性情感的起源和社会现实提供了更加令人信服的自然性证据;第四,染色体性别决定学说相关的Xq28同性恋基因可能是生物性别决定的重要因子,经典生物学与现代生物学的有机结合使我们对同性情感的生物学基础有了更进一步的认识。
- 王荣荣崔婧薛雅卓蔡振陆王泽帆史梦婷王娟任珂星王李阳周鑫MengMeng XuJianjie MaWilliam Isaacs徐学红
- 关键词：性染色体性别决定基因
- 碱性磷酸酶定位方向对DPPC液晶单层膜热力学特性的影响
- 2017年
- 采用3种不同方法将碱性磷酸酶(AP)添加在DPPC单层膜系统中,从热力学角度研究了AP对DPPC单层膜的影响,旨在从分子水平探讨AP分子与磷脂生物膜的作用机理。结果表明,用共同铺展法和亚相溶解法添加AP后,DPPC单层膜的相变不受影响。在低表面压力下,AP在膜上的定位从长轴与界面平行变为垂直方向,这改变了膜体系中分子间的相互作用力,减小了膜体系的混乱程度,增大了膜体系的能量。而用亚相注入法添加蛋白AP后,DPPC单层膜的相转移变得不明显,在低表面压力下AP分子的定位方向不变。在高表面压力下,AP分子可能被DPPC胶束包裹,并释放到单层膜外,这不仅改变了体系分子间的相互作用力,而且增大了体系的混乱程度,并减小了体系能量。碱性磷酸酶分子的定位方向对其与磷脂膜的相互作用起到至关重要的作用。
- 王娟王娟孙润广郝长春苗宗成李拓马亚红
- 关键词：水溶性蛋白相转移
- 界面单层膜和囊泡双层膜中胆固醇对饱和磷脂膜的影响被引量：1
- 2016年
- 利用界面Langmuir单层膜和大单层囊泡的双层膜研究了不同含量胆固醇对饱和磷脂DPPC膜的影响,以及胆固醇与DPPC的相互作用。在双层膜模型中,使用DPH荧光探针标记膜,通过测量荧光稳态各向异性和荧光寿命,来探讨胆固醇对饱和DPPC双层膜流动性及微粘度的影响。在界面单层模型中,通过压力-面积曲线分析胆固醇对单层膜相变的影响,并计算吉布斯自由能实验值,与维里物态方程拟合得到理论参数相结合,讨论胆固醇与DPPC在膜上的相互作用。结果发现:加入少量胆固醇后,两种模型膜流动性降低,微粘度增大;胆固醇较高时,膜流动性转为增大,微粘度降低。当胆固醇摩尔比大于等于0.5时,流动性达到稳定。流动性的改变与胆固醇影响膜的相变过程有关,胆固醇分子和DPPC分子相互作用力的引力在胆固醇摩尔比为0.5时达到最大。
- 王娟孙润广
- 关键词：囊泡膜流动性胆固醇
- 医学分子生物学CRISPR基因编辑与疾病医疗的社会变革
- 2019年
- 利用CRISPR(规律成簇间隔短回文重复序列)技术体系进行基因精密编辑,从基因分子医学层面对疾病进行高效治疗已成为现代医学研究的重要方向,并在临床应用上将有重要的突破。本文论述其近期临床医学研究对社会的相关影响,对CRISPR基因精密编辑的知识产权归属问题进行了分析。以哈佛大学“精准基因修饰干细胞计划”为题探讨了该技术体系在人类遗传性疾病治疗中的应用,在器官移植上的成功将对社会产生重要的影响。CRISPR技术上的正负向高通量筛选,成功地捕获到黑素瘤的药物维罗非尼耐受敏感的关键基因,为解决这一问题打下了重要的基础。CRISPR基因精密编辑的应用已成为生物医学发展的趋势,分析其对人类健康的影响,有助于掌控这一历史性变革技术,为人类社会发展做出重要贡献。
- 李忠光孙渝婷史梦婷史梦婷杨蓉王丹梁瑜王泽帆王娟王娟王李阳王李阳MengMeng Xu周鑫Jianjie Ma徐学红
- 关键词：干细胞
- 利用移码突变和终止密码子提高下游目的基因的表达水平被引量：3
- 2011年
- 目的:在基因结构复杂的慢病毒载体插入报告基因并提高目的基因表达量。方法:慢病毒载体上有复杂的基因排列,为了不影响慢病毒载体的活性,必须尽量保留原有的基因,替换不必要的基因。首先将报告基因萤光素酶插入慢病毒载体替换基因Env后,结果检测不到报告基因的表达。为了提高报告基因的表达水平,将报告基因的读码框向后移动一个碱基,同时在其上游增加一个终止密码子,然后检测报告基因的表达水平。结果:通过移动报告基因的读码框同时在上游增加终止密码子,使报告基因的表达水平大大提高。结论:在构建基因表达载体时,通过改变目的基因与上游起始密码子ATG之间的相对位置以及增加终止密码子,可以大幅提高目的基因的表达水平。
- 陈斌李建彬米志强安小平李存刘大斌姜焕焕王娟黄芬张宝中范华昊何后军童贻刚
- 关键词：慢病毒载体报告基因基因表达定点突变
- 抗禽流感病毒H5N1分泌型IgA在中国仓鼠卵巢细胞中的表达被引量：1
- 2011年
- 分泌型IgA(SIgA)在机体的粘膜免疫中具有重要作用,在外分泌道中比单体IgA和IgG抗体具有更好的抗感染活性。为了表达抗禽流感病毒H5N1人-鼠嵌合分泌型IgA抗体,首先以本室先前构建的稳定表达IgA的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系为基础,共转染分泌片和J链表达质粒,然后用抗生素Zeocin选择阳性克隆细胞,利用倍比稀释的方法筛选分泌SIgA的单克隆细胞,通过Western blotting分析培养上清中SIgA的表达情况。结果表明,在CHO细胞中成功表达了SIgA抗体,上述研究为研制分泌型IgA抗体制剂奠定了良好的基础。
- 李存张宝中安小平米志强刘大斌姜焕焕潘博王盛陈斌黄芬王娟王晓娜童贻刚
- 关键词：WESTERNBLOTTING
- 锁阳多糖对运动训练大鼠血清酶活性与尿蛋白含量的影响被引量：9
- 2012年
- 探讨锁阳多糖(Cynomrium songaricum Rupr polysaccharide,CSRP)对运动训练大鼠骨骼肌、心、肝、肾等组织细胞及线粒体的保护作用,为CSRP在运动医学中的应用提供实验依据.采用分光光度法测定安静对照组、运动训练组和运动+CSRP组大鼠血清琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase,SDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性和尿液总蛋白(total protein,TP)、尿液白蛋白(albumin,Alb)和尿液β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MC)含量等相关生物化学指标;跑台法测定运动训练组和运动+CSRP组大鼠运动至力竭的时间.结果表明:运动+CSRP组血清SDH、CK、LDH活性显著低于运动对照组(P<0.05),ALT、AST活性显著低于运动对照组(P<0.05),TP、Alb和β2-MC含量显著低于运动对照组(P<0.05);运动+锁阳多糖组大鼠运动至力竭的时间与运动对照组比较明显延长(P<0.05).表明CSRP可以降低血清SDH、CK、LDH、ALT、AST活性和TP、Alb和β2-MC含量,保护运动训练大鼠骨骼肌、心、肝、肾等不同组织细胞和线粒体的结构,维持其正常功能,可延长大鼠跑台运动至力竭时间,具有抗疲劳作用.
- 熊正英刘海波池爱平王棣强永浩王娟刘厚宇
- 关键词：血清酶尿蛋白
- 基孔肯雅病毒囊膜蛋白假病毒模型的构建
- 2011年
- 目的:以HIV为骨架构建单次复制性的含基孔肯雅病毒囊膜蛋白的假病毒模型,观察其对哺乳动物细胞的侵染性。方法:PCR合成基孔肯雅病毒囊膜蛋白基因,克隆到真核表达载体上,与HIV慢病毒包装系统质粒共转染293FT细胞,48 h后收培养上清,在8μg/mL Polybrene存在下感染293FT细胞,感染48 h后在荧光显微镜下观察结果。结果:PCR合成了基孔肯雅病毒囊膜蛋白基因并克隆到真核表达载体上,测序结果正确;共转染293FT细胞后,检测到基孔肯雅病毒囊膜蛋白的表达并包装成假病毒,感染新鲜293FT细胞后能够检测到绿色荧光蛋白。结论:合成的基孔肯雅病毒囊膜蛋白基因能正确表达并包装成假病毒,含基孔肯雅病毒囊膜蛋白的假病毒能感染293FT细胞并表达绿色荧光蛋白,可用该假病毒模型进一步研究基孔肯雅病毒的感染性,筛选评价抗基孔肯雅病毒药物。
- 王晓娜安小平范华昊王娟李建彬刘大斌姜焕焕米志强童贻刚
- 关键词：感染性
- 胆固醇与磷脂酰乙醇胺/磷脂酰胆碱混合膜的热力学特性及其单层膜形态的AFM观察被引量：3
- 2012年
- 研究了不同比例下胆固醇(Chol)对磷脂酰乙醇胺/磷脂酰胆碱(PE/PC,1∶1物质的量比)混合膜的影响,并在表面压力-平均分子面积(π-A曲线)等温线基础上,通过对过量平均分子面积(ΔAex)和过量吉布斯自由能(ΔGex)的计算分析,研究了不同比例Chol与PE/PC(1∶1物质的量比)三元混合膜的热力学特性.实验结果表明:Chol在一定程度上加速了混合膜的相变,增强了膜的凝聚性;当XChol=0.2,0.6,0.8时,过量平均分子面积和过量吉布斯自由能在所研究的表面压力下都为负值,分子之间相互作用力表现为引力,促使混合膜的凝聚,而在XChol=0.4时,过量平均分子面积和过量吉布斯自由能在15,20,25,30 mN/m下为正值,分子之间相互作用力表现为斥力,促使熵的增加,并且在20 mN/m压力下出现极值.实验中利用LB膜技术制备了不同比例Chol与PE/PC(1∶1物质的量比)混合膜,并在原子力显微镜下对其结构形态进行了观测.
- 王娟常怡光孙润广
- 关键词：生物膜等温线原子力显微镜
