- CD_4^+ CD_(25)^+T淋巴细胞对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响及作用机制被引量：17
- 2006年
- 目的探讨CD+4CD+25T淋巴细胞(Treg细胞)对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道炎症的影响及作用机制。方法60只小鼠按随机数字表法分为3组,每组20只。哮喘组(A组):小鼠于第1、13天以鸡卵白蛋白(OVA)0.1ml腹腔注射致敏,第21～29天雾化吸入2%OVA生理盐水溶液10ml激发30min后建立小鼠哮喘模型。生理盐水对照组(B组):以生理盐水10ml替代OVA处理。去除T淋巴细胞哮喘组(C组):去除小鼠体内CD+25T淋巴细胞后再按A组方法复制小鼠哮喘模型(用药剂量和方法同A组)。分离A、B、C3组小鼠脾脏淋巴细胞,用流式细胞仪(FACS)检测Treg细胞数量,计算其占CD+4T淋巴细胞的百分比;分离CD+4T淋巴细胞,用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法检测白细胞介素10(IL10)、转化生长因子β1(TGFβ1)和细胞毒性T淋巴细胞抗原4mRNA(CTLA4mRNA)的表达;同时对肺组织行苏木精伊红(HE)染色,观察小鼠肺组织的炎症改变。结果经过OVA反复激发,A组小鼠脾脏Treg细胞占CD+4T淋巴细胞的百分比为(3.10±0.03)%,B组为(9.60±0.04)%,A、B两组间及C组分别与A、B组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);IL10、TGFβ1和CTLA4mRNA的表达A组分别为0.250±0.040、0.29±0.03、0.28±0.06,B组分别为0.480±0.080、0.47±0.05、0.50±0.03、C组分别为0.080±0.020、0.11±0.04、0.12±0.05,A、B两组及C组分别与A、B组比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。与B组比较,A组肺部以嗜酸粒细胞浸润为主要表现的炎症改变明显增强,C组则较A、B组显著增强。结论Treg细胞的数量减少和(或)功能障碍可能是哮喘气道炎症发生发展的重要机制。
- 孙鲲林科雄吴奎王长征
- 关键词：CD4^+CD25^+T细胞白细胞介素10转化生长因子Β1
- 腹部提压法对心搏骤停猪血流动力学影响的实验研究
- 目的 比较标准胸外按压心肺复苏(STDCPR)与腹部提压法心肺复苏对心搏骤停猪复苏中血流动力学指标的影响,初步评价腹部提压法的复苏效果.方法 健康巴马小型猪16只,通过右心室电极致室颤法制作心搏骤停模型.随机分为两组,每...
- 王立祥李会清刘亚华孙鲲马立芝郭晓东李秀满
- 关键词：心肺复苏平均动脉压冠脉灌注压自主循环恢复率
- 单用丙酸氟替卡松和并用沙美特罗对哮喘气道炎症的作用比较被引量：1
- 2010年
- 目的比较单用吸入激素(ICS)和并用长效β2激动剂(LABA)对哮喘患者气道炎症的作用;观察哮喘控制水平是否与患者气道炎症控制水平一致。方法研究设计为随机、双盲的对照研究,共入组27例哮喘患者,其中单用丙酸氟替卡松(FP)治疗(FP组)14例,并用沙美特罗治疗(联合治疗组)13例,并在治疗前、治疗12周和治疗24周通过瑞氏染色和ELISA法分别对诱导痰炎性细胞计数、IL-4和IL-5进行检测。结果 (1)同基线相比,第一阶段治疗后,两组患者诱导痰中炎性细胞计数、IL-4和IL-5表达无明显变化(P>0.05);第二阶段治疗后,两组患者诱导痰中嗜酸性细胞数(EOS)、IL-4和IL-5表达显著降低(P<0.05),两组间比较无显著差别(P>0.05);(2)第二阶段治疗结束后,获得良好控制和完全控制患者诱导痰中IL-5、IL-4水平较基线均得到显著降低(P<0.05),而未获得哮喘控制患者上述细胞因子水平较基线无显著变化(P>0.05)。结论联合应用ICS和LABA能提高哮喘的控制水平,这种控制水平的提高得益于LABA的支气管扩张作用而不是增强的抗炎活性。
- 林科雄王长征钱桂生孙鲲程晓明王金平赵志强
- 关键词：哮喘吸入激素长效Β2激动剂气道炎症
- 超表达Serratel树突细胞对支气管哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋细胞分化的作用
- 2009年
- 目的观察超表达Serratel树突细胞（DC）对支气管哮喘（以下简称哮喘）小鼠CD4^＋CD25^＋T细胞极化及抑制性细胞因子分泌的影响。方法将超表达Serratel DC和正常DC在体外用10μg/ml卵蛋白共同培养2h后，从哮喘小鼠尾静脉注射1×10^4DC，再用1％卵蛋白雾化激发，流式细胞仪检测Serratel组和对照组小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞百分率，RT—PCR法检测脾脏CD4^＋T细胞IL-10、转化生长因子β1（TGFβ1）、细胞毒T细胞相关抗原4（CTLA-4）mRNA表达，并观察2组小鼠肺组织的病理学改变。结果与对照组相比，Serratel组可使哮喘小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞数量明显增多，占CD4^＋T细胞的百分数亦明显增高；Serratel组CD4^＋T细胞IL-10、CTLA-4、TGFβ1 mRNA表达明显增强，且气道炎症明显减轻。结论超表达Serratel DC能抑制哮喘小鼠CD4^＋T细胞分化和促进CD4^＋T细胞分泌抑制性细胞因子，有效改善哮喘小鼠气道炎症，表明DC可通过Notch1／Serratel信号通路影响调节性T细胞分化、逆转哮喘免疫耐受缺陷。
- 孙鲲林科雄王长征吴奎
- 关键词：树突细胞调节性
- 哮喘控制水平的评估被引量：1
- 2008年
- 目的评价不同临床疗效指标在哮喘控制水平评估中的作用。方法分析两项哮喘临床试验患者的资料(68例患者,分别使用丙酸氟替卡松气雾剂和丙酸氟替卡松/沙美特罗干粉吸入剂)。结果各临床指标改善率从高到低依次为日间或夜间喘乐宁用量、日间或夜间症状评分、第1秒用力呼气容积(FEV1)、晨间或晚间呼气峰流量(PEF)和PEF日内变异率。喘乐宁用量改善率与症状评分改善率显著相关(r为0.457～0.731),PEF改善率与喘乐宁用量、症状评分改善率均具有轻度相关性(r为0.228～0.483),其他指标间无显著相关性(P>0.05)。哮喘生命质量问卷(AQLQ)各领域评分和综合评分的改善率与上述各指标改善率之间均无显著相关性(P>0.05)。结论在目前哮喘的治疗评价中,任何单一指标均不能完全反映患者的哮喘控制水平,需要进行综合评价;每日测定PEF是反映患者临床哮喘控制水平的良好指标;AQLQ是反映哮喘患者健康相关生命质量(HRQL)的特异性工具,还不能被目前的临床疗效指标替代。
- 林科雄王长征钱桂生孙鲲程晓明王金平赵志强
- 关键词：哮喘Β2-受体激动剂肺功能健康相关生命质量
- 支气管哮喘气道炎症的发生机制及临床防治研究
- 2007年
- 王长征程晓明林科雄李琦王彦孙鲲赖克方
- 关键词：哮喘气道炎症支气管哮喘嗜酸粒细胞性病理生理基础病理改变
- 哮喘小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞数量及功能的改变被引量：21
- 2005年
- 目的观察哮喘小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞(简称Treg细胞)数量及功能的改变。方法以屋尘螨提取液复制小鼠哮喘模型后,分离小鼠脾脏CD4+T细胞,采用流式细胞仪检测Treg细胞占CD4+T细胞的比例;分离Treg细胞,与屋尘螨提取液共同培养后测定上清液中白细胞介素-4(IL-4)及IL-10的含量;将Treg细胞与CD4+T细胞共同培养,观察其对CD4+T细胞增殖及IL-4、IL-5、γ-干扰素(IFN-γ)分泌的影响。结果哮喘小鼠脾脏Treg细胞占CD4+T细胞比例明显下降;与正常组相比,哮喘小鼠脾脏Treg细胞IL-4、IL-10的分泌无明显差异;Treg细胞可显著抑制哮喘小鼠CD4+T细胞的增殖,并降低其IL-4的分泌,对IFN-γ的合成分泌无明显作用;使用anti-CD25 mAb后,哮喘和正常小鼠Treg细胞的作用均被显著抑制。结论哮喘小鼠Treg细胞功能与正常对照组小鼠无明显区别,但数量显著下降。哮喘发病过程中Th2型反应占优势,与Treg细胞数量减少,对Th2型反应的抑制作用降低有一定关系。
- 吴奎孙鲲毕玉田夏俊波王长征
- 关键词：调节性T细胞哮喘
- 社区获得性下呼吸道重症感染病原菌及耐药性分析被引量：6
- 2004年
- 目的 了解社区获得性下呼吸道重症感染病原菌的主要种类分布及耐药情况。方法 收集我院呼吸重症监护室 2 0 0 2年 6月至 2 0 0 3年 6月的 80例社区获得性下呼吸道重症感染患者的 65株病原菌及其药敏实验结果 ,进行分析。结果 65株细菌中革兰阳性球菌 3 6株 ( 5 5 .4% ) ,革兰阴性杆菌 2 4株 ( 3 6.9% ) ,真菌 5株 ( 7.7% )。革兰阳性球菌主要为肺炎链球菌 ( 13 .9% ,) ,表皮葡萄球菌 ( 12 .3 % ) ,金黄色葡萄球菌 ( 12 .3 % ) ,粪肠球菌 ( 7.7% ) ,其中青霉素耐药的肺炎链球菌 (PRSP)占 11.0 % ,甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌 (MRSA )占 11.0 %。革兰阴性杆菌主要为铜绿假单孢菌( 12 3 % ) ,大肠埃希菌 ( 7.7% ) ,鲍曼氏不动杆菌 ( 7.7% ) ,非发酵菌检出率高达 2 0 % ,以铜绿假单孢菌为主 ,发现嗜麦芽窄食单孢菌 4株 ( 6.2 % ) ,对多数常见抗生素耐药。真菌感染中白色念珠菌 4例 ,烟曲菌 1例。结论 本研究收集的社区获得性下呼吸道重症感染 65株致病菌以革兰阳性球菌为主 ,其次为革兰阴性杆菌 ,亦有少量的真菌感染。多数病原菌具有多重耐药性 ,回顾性分析细菌耐药性对临床经验性用药具有重要参考价值。
- 张巧王长征林科雄李琦孙鲲王苹
- 关键词：细菌抗生素耐药性
- 屋尘螨过敏原DNA疫苗对哮喘模型小鼠Foxp3^＋调节性T细胞功能的影响被引量：7
- 2008年
- 目的观察编码屋尘螨主要过敏原Derp1和Derp2的质粒DNA疫苗对哮喘小鼠脾细胞Foxp3+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg细胞)功能的影响。方法以屋尘螨提取液复制哮喘模型后,将编码Der p1、Der p2的真核表达质粒pDs-Der p1、pCI-neo-Der p2等量混合接种小鼠后对小鼠进行再次激发。分离小鼠脾脏细胞,以流式细胞仪方法检测CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例。采用磁珠法分离CD4+CD25+T细胞,流式细胞仪检测其Foxp3基因的表达,并以IL-2进行刺激观察其增殖反应,测定其上清液中的IL-10、TGF-β含量。将分离的Treg细胞与哮喘小鼠CD4+CD25-T细胞共同培养,观察Treg细胞对CD4+CD25-T细胞增殖及IL-4、IL-5、IFN-γ的影响。结果哮喘组小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例显著低于对照组,经DNA疫苗治疗后CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞显著增加。体外培养发现各组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞增殖能力均显著低于CD4+CD25-T细胞,培养液上清中均未检测到IL-10和TGF-β存在。3组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞均可显著抑制哮喘CD4+CD25-T细胞的增殖及IL-4、IL-5和IFN-γ的分泌,但在3组Treg细胞中,哮喘组Treg细胞作用显著低于其他两组。结论Treg细胞可显著抑制哮喘CD4+CD25-T细胞的增殖及炎性介质的分泌,哮喘小鼠不仅出现CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量的减少,而且其功能也可能出现缺陷。DNA疫苗治疗可以诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞增加,并恢复其功能活性。
- 吴奎孙鲲毕玉田夏俊波王长征
- 关键词：DNA疫苗调节性T细胞哮喘
- 不同浓度过敏原对哮喘小鼠T淋巴细胞产生IL-5的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 探讨大剂量过敏原对哮喘小鼠T细胞产生IL 5的影响及其机制。方法 应用不同浓度过敏原体外处理哮喘模型小鼠T细胞 ,用单核细胞作抗原递呈细胞。ELISA法检测培养清中IL 5水平 ,并用TUNEL法检测T细胞的凋亡率。结果 ①在 0～ 10 0 μg/ml卵蛋白 (OVA)处理浓度级之间 ,哮喘组小鼠淋巴细胞产生的IL 5的水平随着处理浓度的增高而增高 ,但经高浓度OVA( 10mg/ml)处理后 ,T淋巴细胞产生的IL 5水平却较哮喘低浓度组及对照组明显降低 (P <0 .0 1) ;对照组各浓度级之间则无显著差异 ;②不同浓度OVA处理后哮喘组T细胞的凋亡率均无明显差异。结论 大剂量过敏原可以诱导哮喘T细胞IL 5产生减少为表现的免疫耐受现象 ,其机制主要是诱导淋巴细胞无不反应性 ,而不是诱导T细胞凋亡。
- 孙鲲王长征
- 关键词：哮喘T细胞凋亡小鼠IL-5
