王谦
- 作品数：23 被引量：77H指数：4
- 供职机构：中国医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 应用10对引物多重PCR方法检测DMD基因缺失被引量：3
- 2010年
- 目的建立适合于Duchenne型进行性肌营养不良(DMD)临床基因诊断的10对引物多重PCR方法 ,并探讨其临床应用价值。方法抽提55例DMD患者及正常对照者外周血DNA,选取肌营养不良蛋白基因的10对外显子引物,应用多重PCR反应方法 ,同时扩增10个特异性片段,扩增产物行聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果 55例DMD患者中,28例(50.9%)存在外显子缺失,27例(49.1%)未检测到缺失;25例缺失片段集中于第45～53外显子,3例缺失片段集中于第12～19外显子。第50外显子缺失频率最高;其次为外显子45、47、51、52,再次之为外显子12、53。结论 DMD基因缺失片段主要分布于第45～53、12～19外显子2个缺失热点区域。该方法具有临床应用价值,是检测DMD基因缺失的首选方法 。
- 林长坤姜懿凌王谦曹东华崔婉婷金春莲
- 关键词：DUCHENNE肌营养不良基因缺失多重PCR基因诊断
- 105例Duchenne肌营养不良患者基因突变分析
- 2011年
- 目的分析大样本Duchenne肌营养不良(DMD)患者的基因突变特点,探讨基因型与表现型的关系。方法选择2005年至2009年在中国医科大学盛京医院儿科就诊的105例DMD患者。用MLPA法对患者的DMD基因的缺失/重复突变进行突变筛查,同时对先证者的母亲进行基因的缺失/重复突变检测。结果用MLPA方法在105例DMD患者中检测到54例患者有外显子缺失,17例外显子重复和2例点突变,同时检测出59例患儿的母亲为携带者。结论 105例患者中DMD基因重复突变占16.2%,突变热点集中在外显子2-20;缺失占51.4%;点突变占2%。重复突变率高于文献报道(5-10%)。
- 王谦崔婉婷林长坤金春莲
- 关键词：DUCHENNE肌营养不良症多重PCR
- 特异性抗体标记法检测母血中的胎儿细胞被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨免疫组化法检测孕妇外周血中胎儿有核红细胞 (nucleated red blood cell,NRBC)进行产前基因诊断的可行性。方法 对 30名孕 8～ 2 6周孕妇外周血进行密度梯度离心 ,初步富集胎儿 NRBC,细胞涂片离心机制片 ,胎儿血红蛋白 (fetal hemoglobin,Hb F)特异性抗体标记、识别 ,显微操作法获取全部阳性细胞 ,经全基因组扩增后 ,产物进行性别检测及杜氏肌营养不良 (Duchenne musculardystrophy,DMD)的基因诊断。结果 30名孕 8～ 2 6周孕妇外周血中均发现与 Hb F呈阳性反应的胎儿NRBC。性别检测结果 30名孕妇中共检出 17名男性胎儿 ,13名女性胎儿 ,结果经孕妇引产及羊水细胞对照证实准确率达 10 0 % ,并完成 8例 DMD的产前基因诊断。结论 免疫组化法以胎儿血红蛋白 Hb Fγ链抗体标记胎儿的 NRBC进行产前基因诊断是一种很有应用前景的方法。
- 刘丽英金春莲王雁林长坤王谦孙开来
- 关键词：母血胎儿细胞有核红细胞产前基因诊断免疫组织化学
- 辽宁地区一脊髓小脑性共济失调大家系症状前患者的基因诊断研究被引量：1
- 2010年
- 目的确定辽宁地区一脊髓小脑性共济失调大家系患者子女中目前健康的症状前患者。方法本家系已通过基因诊断的方法明确为SCA3型,所以提取本家系患者子女外周血DNA后,采用聚合酶链反应对SCA3基因三核昔酸重复片段进行扩增,并将PCR异常扩增片断测序,以明确异常扩增等位基因内重复拷贝数。结果 44名患者子女中有8人SCA3基因三核苷酸重复片断在70-82次,超过了正常人SCA3基因内三核苷酸重复的次数。结论通过基因检测诊断出此8人为SCA3型脊髓小脑性共济失调症状前患者。
- 曹东华王谦刘晓莉金春莲邱广斌
- 关键词：脊髓小脑性共济失调三核苷酸重复
- 缺氧诱导因子1-血管内皮生长因子-Notch信号通路参与马蹄内翻足畸形的发生机制被引量：1
- 2022年
- 目的研究马蹄内翻足畸形发生的分子机制。方法采用HE染色观察两组胎鼠足踝部组织结构差异,免疫组化染色、qRT-PCR和Western blot技术检测模型组和对照组大鼠足踝部组织缺氧诱导因子1(hypoxia inducible factor 1,HIF-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及Notch-1表达情况。结果光镜下观察,与对照组相比,实验组足踝部组织结构相对紊乱,组织间隙增大,软组织松散,局部软组织聚集挛缩。免疫组化染色、qRT-PCR和Western blot结果显示,实验组足踝部组织HIF-1表达水平下调,Vegf、Notch-1的表达减少。结论HIF-VEGF-Notch信号通路可能与马蹄内翻足畸形的发生相关。
- 张真翊陈曦王谦
- 关键词：缺氧诱导因子1血管内皮生长因子NOTCH信号通路
- 同源基因定量PCR方法产前快速诊断Down综合征
- 本实验应用饱和氯化钠法提取血液白细胞DNA;煮沸法提取羊水脱落细胞DNA;显微操作法获取单个胎儿有核红细胞(NRBC)。同时扩增位于21号染色体DSCR的人肝型磷酸果糖激酶基因(PFKL-CH21)和位于1号染色体的人肌...
- 王谦
- 关键词：DOWN综合征产前基因诊断
- 文献传递
- MLPA方法在假肥大性肌营养不良基因诊断中的应用
- 假肥大性肌营养不良症是一种严重的神经肌肉疾病,分为 DMD(Duchenne muscular dystrophy)和 BMD(Becker muscular dystrophy),均是由于 dystrophin 基因突...
- 王谦林长坤任梅宏崔婉婷武盈玉麻宏伟金春莲
- 文献传递
- MLPA和多重PCR法检测假肥大性肌营养不良患者DMD基因突变被引量：3
- 2010年
- 目的应用多重连接依赖式探针扩增(MLPA)法和多重PCR法对临床诊断为假肥大性肌营养不良患者进行基因诊断,并比较两种方法检测DMD基因缺失和重复改变的效果。方法选择2005年至2007年在中国医科大学盛京医院儿科就诊的51例DMD患者和8例BMD患者。采用MLPA法对经多重PCR法检测过的患者的DMD基因的缺失/重复突变进行突变筛查,同时对先证者的母亲进行基因的缺失/重复突变检测。结果用多重PCR方法在59例假肥大性肌营养不良症患者中检测到31例患者有外显子缺失。MLPA检测出33例外显子缺失,6例外显子重复和1例点突变,同时检测出26例患儿的母亲为携带者。MLPA比多重PCR多检测出10例DMD基因突变,两种方法共同检测出的30例突变中MLPA检测出16例基因突变范围比多重PCR大。结论与多重PCR法相比,MLPA更加简便、快捷、可靠,同时可以对携带者进行诊断,是一种高效的遗传病基因诊断手段。
- 王谦汪晶林长坤崔婉婷麻宏伟武盈玉金春莲
- 关键词：多重PCR
- 一种提高孕妇外周血中游离胎儿DNA产量的新方法被引量：1
- 2014年
- 目的探讨提高孕妇外周血中游离胎儿DNA产量的新方法。方法用QIAamp DNA Blood Mini Kit和QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit提取56名孕妇外周血血浆DNA。应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析样本中游离胎儿DNA的含量。结果与QIAamp DNA Blood Mini Kit相比,经QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit提取试剂盒提取的总DNA平均浓度是前者的1.5倍。29名早期妊娠孕妇外周血游离胎儿DNA平均浓度为812拷贝/mL,27例晚期妊娠为4 876拷贝/mL。29名男性胎儿SRY基因平均浓度是前者1.2倍,妊娠早期平均浓度为28.6拷贝/mL,晚期平均浓度为264拷贝/mL。结论经改良后,采用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit提取试剂盒可以获得更高浓度的胎儿游离DNA,可以应用于孕早期和孕中期的无创性产前基因诊断。
- 王谦白宁郭珊珊李凡
- 关键词：孕妇胎儿DNA
- 芍药-甘草配伍的研究进展被引量：36
- 2014年
- 配伍是中药复方用药的特色和优势,而药对则是最常见的配伍形式。芍药-甘草是来源于《伤寒论》的经典药对,研究显示芍药-甘草配伍具有抗炎、镇痛、解痉等药理作用,临床广泛应用于呼吸、消化、神经、肌肉、泌尿、内分泌等多系统疾病的治疗。综述芍药-甘草配伍后的药理作用、药效物质基础及其药动学研究进展,分析配伍后化学成分在机体内的变化规律,了解其体内的生物药剂学特征。
- 郭珊珊王谦白立川郭政东
- 关键词：芍药甘草中药复方芍药苷甘草苷
