王日雄
- 作品数：24 被引量：109H指数：7
- 供职机构：福建医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：福建省科技计划重点项目福建省卫生厅青年科研基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 鹿茸多肽对兔骨髓间质干细胞体外软骨表型诱导分化的影响被引量：18
- 2007年
- 目的:通过对体外培养的兔骨髓间质干细胞(MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型分化的研究,探讨鹿茸多肽对其软骨分化的影响。方法:将第3代兔MSCs随机分为A组(空白对照组)、B组(诱导组)、C组(鹿茸多肽组),并取兔的关节软骨作为D组(关节软骨组)。A、B、C 3组分别采用普通培养液、诱导培养液、含10 ug/m l鹿茸多肽的诱导培养液于离心管内进行培养,分别于1、2、3周后取材,通过组织学、生物化学和RT-PCR技术,对离心管内构建的软骨组织进行形态学和细胞功能状态的观察。结果:A组培养2周后,细胞团块逐渐崩解,无法进行HE染色。B、C组细胞团块除有轻度收缩外,呈白色半透明状,HE染色发现细胞为圆形或卵圆形,表层细胞密度大。B、C组糖胺多糖(GAG)含量及Ⅱ型胶原mRNA表达随培养时间延长而增多,并以C组为著;各时间点B、C组与A组相比明显增多,且差异有显著性统计学意义(P<0.01),C组与B组相比较多,差异有显著性统计学意义(P<0.01),C组与D组相比较少,差异有显著性统计学意义(P<0.01)。结论:MSCs在特定培养条件下能向软骨细胞表型分化,且鹿茸多肽对其定向软骨分化有明显促进作用。虽然在体外可以构建出软骨组织,但其与关节软骨质量相比仍有很大差距。
- 修忠标林建华吴朝阳王日雄
- 关键词：鹿茸多肽间质干细胞软骨细胞分化
- 褪黑素对荷胃癌小鼠胸腺及脾转化生长因子-β1表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的研究褪黑素在抑制肿瘤过程中对荷胃癌小鼠胸腺及脾转化生长因子-β1(TGF-β1)表达变化的影响。方法培养小鼠前胃癌细胞株(MFC),采用小鼠荷胃癌模型。褪黑素用药干预1周后,运用实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测胸腺、脾TGF-β1的表达变化。结果在褪黑素抗肿瘤过程中,与正常对照组相比,荷瘤空白对照组小鼠脾TGF-β1mRNA表达明显下调,胸腺的则无明显变化,且胸腺及脾TGF-β1蛋白表达无明显差异;褪黑素干预后,大剂量组胸腺TGF-β1基因及蛋白表达明显下降,而小剂量组胸腺TGF-β1mRNA表达较荷瘤空白对照组明显升高,差别有统计学意义,小、中、大剂量组脾TGF-β1基因和蛋白表达均回调至正常水平。结论一定浓度褪黑素能够下调荷胃癌小鼠胸腺TGF-β1表达,使荷胃癌小鼠的脾表达下调的TGF-β1回调至正常水平。褪黑素抗胃癌作用与免疫器官中TGF-β1表达变化有关。
- 刘卉张慧王日雄周瑞祥
- 关键词：褪黑素转化生长因子Β1胸腺
- 基于胃癌血管生成的褪黑素核受体作用靶点研究
- 胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,表现为进展快、生存期短、预后较差。如何提高胃癌的生存率仍是目前临床面临的一大挑战。肿瘤的生长、转移和预后均与血管生成相关。肿瘤血管生成是一个多因子参与的多步骤过程,阻断其中任何一步,都将阻...
- 王日雄
- 关键词：褪黑素人胃癌细胞SGC-7901HIF-1Α
- 自体骨髓间充质干细胞复合胶原膜修复兔膝关节全层软骨缺损的实验研究
- 目的：研究自体骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)复合胶原膜(MCMG)对兔膝关节局部全层软骨缺损的修复作用。
方法：1□.抽取新西兰大白兔髂棘骨髓，梯度密度离心法分离结合贴壁...
- 王日雄
- 关键词：膝关节软骨缺损
- 文献传递
- 褪黑素对小鼠胃癌细胞褪黑素膜受体MT1、MT2表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的：探讨褪黑素对小鼠胃癌细胞褪黑素膜受体MT1、MT2表达的影响。方法：应用小鼠MFC前胃癌细胞建立荷胃癌小鼠模型，不同浓度褪黑素干预后，运用免疫组织化学、实时荧光定量PCR、免疫印迹定位定量检测MT1、MT2表达的变化。结果：移植瘤肿瘤细胞表达褪黑素膜受体MT1、MT2，褪黑素促进肿瘤组织膜受体MT1、MT2表达，并呈剂量依赖关系。结论：褪黑素上调褪黑素膜受体MT1、MT2的表达，说明褪黑素可能通过膜受体信号通路抑制胃癌生长。
- 徐丽金清东刘卉王日雄周瑞祥
- 关键词：褪黑素
- 光动力联合紫杉醇对食管癌细胞株Eca-109增殖的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨血卟啉衍生物联合紫杉醇注射液对人食管癌细胞Eca-109体外光动力疗法效应的影响。方法将食管癌细胞株Eca-109分为8组:对照组、化疗组、化疗+高剂量光敏剂治疗组、化疗+中剂量光敏剂治疗组、化疗+低剂量光敏剂治疗组、高剂量光敏剂治疗组、中剂量光敏剂治疗组和低剂量光敏剂治疗组。种板孵育24 h,检测肿瘤细胞的存活率;于化疗方案组加入紫杉醇作用12 h,再往含光敏剂实验组分别加入血卟啉衍生物高、中、低剂量,4 h后行光动力照射,照光前后荧光显微镜下观察细胞凋亡形态,照光后继续培育24 h,开始行MTT法检测食管癌细胞增殖的抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果血卟啉衍生物浓度越高食管癌细胞显示的荧光强度越强,荧光强弱与细胞的活性成正比,与紫杉醇联合组则可见到更多凋亡细胞。在肿瘤细胞的生长抑制率、细胞凋亡率方面,化疗+高剂量光敏剂光动力治疗组与空白对照组、单纯化疗组及低剂量光敏剂光动力治疗组相比,差异均有显著意义(P<0.01);含光敏剂大剂量组与小剂量组相比,差异有显著意义(P<0.05);化疗组及光动力组与空白对照组相比,差异有显著意义(P<0.05)。结论光动力联合紫杉醇化疗对人食管癌细胞细胞株Eca-109增殖有协同抑制作用,二者可协同诱导人食管癌细胞株发生凋亡。
- 张志锋黄沂施烯王日雄林小燕林学德郑航李黎波
- 关键词：食管癌ECA-109光动力疗法血卟啉衍生物紫杉醇
- 褪黑素对人胃癌细胞生长的影响
- 2021年
- 目的分析褪黑素与人胃癌细胞生长指标的关系,探讨褪黑素对人胃癌细胞增殖、肿瘤生长的影响。方法选用人胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901及AGS培养、传代,在氯化钴(CoCl_(2))模拟乏氧条件下及常氧条件下,采用0.01、0.1、1、3 mmol/L不同浓度的褪黑素干预,分别在不同时间点0.5、2、16、24 h给药,观察褪黑素对人胃癌细胞生物学行为的影响。结果常氧及乏氧条件下,低浓度褪黑素(0.01、0.1 mmol/L)对胃癌细胞无明显抑制作用;而高浓度褪黑素(1、3 mmol/L)能明显抑制人胃癌细胞株MGC-803、SGC7901及AGS增殖,呈时间和剂量依赖趋势。各组间癌细胞抑制率比较,差别有统计学意义(P<0.05)。3 mmol/L褪黑素在体外抑制人胃癌细胞增殖最为显著,并能明显抑制SGC-7901细胞分泌血管内皮生长因子-A(VEGF-A)。结论常氧及乏氧条件下,褪黑素体外能抑制人胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901及AGS增殖,呈时间-剂量依赖性,高浓度褪黑素明显抑制SGC-7901细胞分泌VEGF-A。
- 王日雄宋军刘卉周瑞祥
- 关键词：褪黑素人胃癌细胞株肿瘤增殖血管内皮生长因子缺氧环境
- 鹿茸多肽对兔骨髓间质干细胞体外增殖的影响被引量：17
- 2005年
- 目的探讨鹿茸多肽(PAP)对兔骨髓间质干细胞(MSCs)体外增殖的影响。方法分离MSCs,并用流式细胞术检测CD34、CD45、CD29、CD90表达;将MSCs分为对照组、PAP不同浓度组、转化生长因子β1(TGFβ1)组,培养48h后用四唑盐比色法测细胞活力、流式细胞术测细胞增殖指数(PI)、免疫组织化学Envision二步法测增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果CD34、CD45、CD29、CD90分别为0.81%、0.09%、95.90%、67.00%;PAP不同浓度组与TGFβ1组吸光度值与PI较大,免疫组织化学表达棕褐色颗粒较多,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.0.1);PAP不同浓度组MSCs在体外连续培养中没有异倍体的产生。结论PAP对兔MSCs的增殖有促进作用,且能逆转MSCs体外连续培养中异行性的产生。
- 林建华修忠标吴朝阳王日雄
- 关键词：鹿茸多肽兔骨髓间质干细胞ENVISION四唑盐比色法细胞增殖指数CD29
- 鹿茸多肽对软骨表型化骨髓间充质干细胞凋亡的影响被引量：11
- 2006年
- 目的通过观察鹿茸多肽对白细胞介素1β(interleukin1β,IL-1β)诱导软骨表型化骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)凋亡的影响,以优化软骨组织工程的种子细胞。方法新西兰大白兔2只,抽取其骨髓;经密度梯度离心得到单核细胞,经体外分离、培养获得兔MSCs。用转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)将其诱导分化软骨表型。将软骨表型化MSCs随机分成A组(空白对照组)5%胎牛血清的α-MEM培养液;B组(IL-1β组)5%胎牛血清的α-MEM培养液加入100ngIL-1β;C组(鹿茸多肽组)5%胎牛血清的α-MEM培养液加入10μg/ml鹿茸多肽作用3d后再加入100ngIL-1β;D组(TGF-β1组)5%胎牛血清的α-MEM培养液加入10ng/mlTGF-β1作用3d后再加入100ngIL-1β。分别于培养24、48和72h后取样,采用透射电镜观察细胞形态,AnnexinV法检测细胞凋亡率,RT-PCR技术分析Caspase-3mRNA表达水平,ELISA法检测Caspase-3蛋白酶活性。结果透射电镜观察B组24h后细胞核内染色质开始呈块状凝集,分布于核膜下,核膜不规则;48h后细胞核内染色质凝集加剧;72h后部分细胞内的核碎片凝集成凋亡小体。各时间点C、D组细胞结构改变相对滞后,且数量较少;A组细胞结构几乎无明显改变。各时间点B组MSCs凋亡率、Caspase-3mRNA表达及蛋白酶活性逐渐增高,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01);C、D组与B组比较则逐渐下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论Caspase-3参与MSCs凋亡,鹿茸多肽通过减少Caspase-3mRNA表达,并抑制其蛋白酶活性,阻止或逆转软骨表型化MSCs凋亡。
- 林建华修忠标吴朝阳王日雄
- 关键词：鹿茸多肽骨髓间充质干细胞凋亡
- 褪黑素对小鼠CD4^+ T细胞增殖及Foxp3启动子活性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨褪黑素(melatonin,MLT)对小鼠CD4+T细胞增殖及Foxp3(Forkhead box P3)启动子活性的影响,进一步丰富神经内分泌免疫网络学说。方法免疫磁珠分选小鼠脾CD4+T细胞,CCK-8法检测褪黑素对其增殖活性的影响;构建、筛选及鉴定Foxp3核心和全长启动子重组载体,并且电转染入小鼠CD4+T细胞,加以不同淋巴细胞刺激因子和褪黑素干预,用双荧光素酶报告基因法检测Foxp3启动子的活性变化。结果与空白对照组相比,从10-5mol浓度的MLT开始对CD4+T细胞有毒性作用,并呈剂量依赖性。10-6mol MLT对CD4+T细胞的增殖活性无影响。3种淋巴细胞刺激因子(佛波酯PMA+离子霉素ionomycin;植物血凝素PHA;T细胞抗原受体TCR)刺激和(或)褪黑素干预虽然使小鼠Foxp3核心或全长启动子活性有所上调,但与空白对照差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同浓度褪黑素对小鼠CD4+T细胞增殖活性产生不同影响;褪黑素未显著增强小鼠Foxp3启动子活性。
- 刘卉徐丽王日雄张慧周瑞祥
- 关键词：褪黑素CD4+T细胞FOXP3启动子小鼠
