- 环境毒素导致多巴胺能神经元蛋白水解应激的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨环境毒素诱发蛋白水解应激在多巴胺能神经元变性死亡中的作用。方法6-羟多巴(6-OHDA)、1-甲基4-苯基吡啶离子(MPP^+)、鱼藤酮作用于神经生长因子诱导的 PC12细胞,MTT 法检测各种药物的神经毒性作用,应用共聚焦免疫荧光双标染色观察药物处理后细胞内α-突触核蛋白及泛素化蛋白的表达及聚集。荧光分光光度计测量各组细胞蛋白酶体中各蛋白水解酶活性的变化。结果 3种神经诱变剂处理 PC12细胞后,细胞活力呈浓度依赖性下降,其中6-OHDA100 μmol/L、MPP^+75μmol/L、鱼藤酮20 nmol/L 作用24 h 使细胞活力分别下降52%、44%、40%(P<0.01)。共聚焦显微镜观察显示药物处理后细胞胞质内α-突触核蛋白及泛素表达上调,并形成蛋白颗粒物。酶活性测定提示 MPP^+75μmol/L、鱼藤酮20 nmol/L 处理使胰蛋白酶,糜蛋白酶及 PgH 水解酶活性明显下降(P<0.05),而6-OHDA 100μmol/L 处理使细胞蛋白酶水解能力轻度降低,差异无统计学意义(P>0.05),6-OHDA 200μmol/L 则诱导3种蛋白酶活性进一步下降,荧光指数分别为7.23±0.58,79.60±2.73和4.23±0.49(正常组为13.90±1.75,99.30±5.23和6.90±0.60,P<0.01)。结论神经诱变剂可导致多巴胺能神经元泛素蛋白酶体功能失调及α-突触核蛋白和泛素化蛋白的积聚,诱发蛋白水解应激异常状态。
- 王岚曹雪兵王建明曲瑞森徐丽乔娴孙圣刚
- 关键词：帕金森病Α-突触核蛋白蛋白酶体
- 重组大鼠肝再生增强因子原核表达载体构建及多克隆抗体制备被引量：2
- 2010年
- 背景:国外有1篇文献报道了肝再生增强因子在中枢神经系统内的分布与表达。由于关于重组大鼠肝再生增强因子蛋白多克隆抗体制备、鉴定及原核表达载体如何构建的相关文献较少,国内对于其在中枢神经系统的研究目前未见报道。目的:利用大肠杆菌BL21表达大鼠肝再生增强因子融合蛋白,并制备和鉴定其多克隆抗体。方法:提取SD大鼠海马组织RNA,构建原核表达重组质粒pET28a-ALR并转化到宿主菌BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达目的融合蛋白,经Ni2+亲和层析纯化回收,4次免疫日本大耳白兔后,心脏取血,吸取血清作为多克隆抗体,以ELISA测定抗体血清效价,Western-blotting检测抗体的特异性和亲和性。观察:①原核表达重组质粒pET28a-ALR构建。②pET28a-ALR重组体酶切鉴定。③ELISA及Western-blotting检测结果。结果与结论:双酶切电泳检测结果显示得到了预期条带,其大小分别为5.3kb和0.4kb,经核苷酸序列分析证明成功构建了pET28a-ALR原核表达载体。成功获得分子质量约为19ku纯化的融合蛋白。ELISA测定显示多克隆抗体效价可达到1∶2000,说明抗体与纯化的重组肝再生增强因子蛋白具有良好的反应性,有较高的效价,可满足实验的要求。通过Western-blotting检测证明该抗体可以特异性识别肝再生增强因子蛋白。实验成功地利用原核表达体系表达了肝再生增强因子融合蛋白,并制备、纯化了抗肝再生增强因子蛋白的多克隆抗体,经鉴定能够满足针对肝再生增强因子免疫印迹检测的实验要求。
- 刘正芳王建明王岚曾晓云熊玲罗志秀伍俊伊
- 关键词：肝再生增强因子原核表达多克隆抗体
- 脑卒中患者血浆中白细胞介素-2含量的研究被引量：1
- 2004年
- 目的:探讨脑卒中患者发病急性期血清白细胞介素-2(IL-2)水平的变化及意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定34例缺血性卒中患者(包括急性脑梗死22例,短暂性脑缺血(TIA)12例),29例出血性卒中患者及健康对照者血清中IL-2的含量。结果:与正常对照组相比,急性脑梗死及脑出血患者IL-2水平均明显下降(P<0.01,P<0.05),TIA组略低于正常,但无统计学差异:结论:IL-2含量降低提示急性脑卒中患者免疫功能下降,与神经-免疫-内分泌网络结构及功能异常有关,并可能存在双向调节作用。
- 王建明王岚曾晓云罗志秀田和平熊玲杨虹
- 关键词：IL-2脑卒中患者白细胞介素-2急性脑梗死血浆出血性卒中
- 依达拉奉注射液治疗急性脑出血的临床疗效被引量：3
- 2007年
- 目的:观察依达拉奉注射液(MCI-186)治疗急性脑出血的疗效。方法:脑出血患者64例,随机分为观察组和对照组各32例,均给予控制血压、颅内压,预防感染,防止并发症及维持水电解质平衡和营养支持治疗。观察组同时增加MCI-186 30 mg+0.9%氯化钠100 ml静脉滴注,30 min滴完,每日2次。治疗前后行头颅CT扫描测量血肿周围低密度区的改变;欧洲卒中量表(ESS)评价肢体功能。结果:观察组在治疗第14和24 d时,与治疗前及对照组比较,血肿周围低密度区明显缩小(P<0.01);ESS评分,在治疗第4、14和24天时明显高于治疗前及对照组(P<0.01和0.05)。结论:MCI-186可明显促进脑出血患者血肿的吸收和神经功能康复。
- 罗志秀王建明汪琦
- 关键词：依达拉奉脑出血疗效观察
- 脑卒中患者血浆中白细胞介素－2含量的研究
- 王建明王岚曲瑞森田和平熊玲曾晓云罗志秀
- 该研究进一步了解细胞因子在急性脑卒中后的状态水平，同时确认IL-2为一种重要的神经及神经内分泌系统的调节因子,提示IL-2可来源于外周或中枢神经系统并与功能性的IL-2R分子结合，发挥作用。IL-2/IL-2R系统的失调...
- 关键词：
- 关键词：脑卒中
- 肝再生增强因子在β-淀粉样肽(25-35)诱导PC12细胞中的表达
- 2011年
- 目的观察肝再生增强因子(ALR)在β-淀粉样肽(25-35)(Aβ25-35)诱导PC12细胞阿尔茨海默病(AD)体外模型中的表达。方法体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞,分为实验组和空白对照组,实验组用终浓度为25μmol/L Aβ25-35处理PC12细胞建立AD细胞模型,MTT法测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,应用RT-PCR检测ALR mRNA表达变化、Western印迹法检测ALR蛋白表达变化。结果 Aβ25-35组中PC12细胞的存活率较对照组明显降低(P<0.05),细胞凋亡率也明显增高(P<0.05),ALR mRNA在Aβ25-35组中表达较对照组明显降低(P<0.05),W estern印迹法检测其蛋白表达也较对照组下降(P<0.05)。结论 ALR在Aβ25-35诱导PC12细胞致AD模型中表达减少,可能与AD的发生发展有关。
- 刘正芳王建明王岚曾晓云熊玲罗志秀伍俊伊
- 关键词：Β-淀粉样肽(25-35)PC12细胞阿尔茨海默病肝再生增强因子
- 出血性脑梗死54例分型治疗与临床分析被引量：2
- 2008年
- 曾晓云王建明
- 以面神经麻痹为首发症状的糖尿病25例临床分析被引量：1
- 2007年
- 曾晓云王建明伍俊伊
- 关键词：面神经麻痹首发症状糖尿病神经系统并发症相关病例多发病
- 脊髓型多发性硬化12例临床分析
- 2006年
- 多发性硬化（MS）是中枢神经系统最常见的脱髓鞘疾病及中青年非外伤性致残的最常见原因，其发病机制尚不完全清楚，仅以脊髓的病灶为主的引起l临床症状及体征者，称为脊髓型多发性硬化，其发病率占MS的9％-22．9％。本文对武汉普爱医院神经内科1996—2005年收治的12例脊髓型MS的病例进行回顾性分析，以了解脊髓型MS的临床特点及MRI变化。
- 熊玲王建明
- 关键词：脊髓型多发性硬化磁共振成像
- 帕金森病α-突触核蛋白异常聚集诱发内质网应激机制的研究
- 王岚王建明曲瑞森曹学兵孙圣刚熊玲曾晓云罗志秀伍俊伊汪琪
- 帕金森病是一种好发于中老年人的中枢神经系统变性疾病，以静止性震颤、肌强直、运动减少及姿势反射异常为典型临床表现。流行病学调查显示该病发病率较以往呈明显上升趋势，在65岁以上人群中患病率达到1.7%。目前对于该病的治疗仍限...
- 关键词：
- 关键词：帕金森病Α-突触核蛋白
