沈炼桔
- 作品数：37 被引量：96H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学金属学及工艺更多>>
- Piwi互作RNA的筛选及其在儿童肾母细胞瘤组织中的表达被引量：4
- 2020年
- 目的探讨Piwi互作RNA(piRNA)在儿童肾母细胞瘤中的表达及临床意义。方法对Piwi样蛋白2(Piwil2)基因重编程人成纤维细胞所形成的肿瘤样干细胞进行高通量测序,筛选出差异表达piRNA,并利用miRanda软件预测其靶基因,对靶基因进行基因本体(GO)功能分析。采用qRT-PCR检测差异表达piRNA及其靶基因在34例肾母细胞瘤患儿肿瘤组织及癌旁正常肾组织标本中的表达,并分析差异表达piRNA及其靶基因与肾母细胞瘤临床病理特征的关系。结果通过高通量测序筛选出230个差异表达piRNA,利用miRanda软件预测出43个靶基因,经GO分析发现其参与的生物学过程主要为调节细胞钙离子浓度,分子功能主要为参与ATP酶的活动及多聚A尾RNA结合。选取5个未知的差异表达piRNA及其靶基因检测其在肾母细胞瘤肿瘤组织及癌旁正常组织中的表达情况,结果显示第13位未知上调piRNA(NU13)表达量在肿瘤组织中下调(P<0.01),其靶基因NOP56核糖核蛋白(NOP56)表达在肿瘤组织和癌旁正常组织中差异表达无统计学意义(P=0.58);第9位未知上调piRNA(NU9)表达量在肿瘤组织中下调(P<0.01),其靶基因40S核糖体蛋白S8(RPS8)基因在肿瘤组织和癌旁正常组织中差异表达无统计学意义(P=0.29);第5、7、9位未知下调piRNA(ND5、ND7、ND9)及其共同靶基因MT-RNR2样蛋白1(MTRNR2L1)基因的表达量在肿瘤组织中均下调(P均<0.01)。以上在儿童肾母细胞瘤组织中出现差异表达的piRNA及其靶基因与患儿年龄、性别、肿瘤临床分期、病理分型无明显相关性(P均>0.05)。结论piRNA NU9、NU13、ND5、ND7、ND9及靶基因MTRNR2L1在儿童肾母细胞瘤组织中出现差异表达,有望成为鉴别肾母细胞瘤与正常肾组织的标志物。
- 王璋张丹张朝霞王钊颖谭小军卢虹旭沈炼桔龙春兰魏光辉何大维
- 关键词：高通量测序肿瘤干细胞肾母细胞瘤
- 人脐带间充质干细胞缓解马兜铃酸诱导小鼠肾纤维化的作用及机制
- 2019年
- 该实验探究了人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell,hucMSC)缓解马兜铃酸(aristolochic acid,AA)诱导小鼠肾纤维化的作用及可能机制。我们将huc-MSC经尾静脉注射干预AA诱导的肾纤维化小鼠模型。HE、PAS和Masson染色观察肾脏形态变化,Western blot和免疫组化检测上皮间质转化相关标志物E-cadherin、N-cadherin和TGF-β/Smad信号通路蛋白TGF-β1和p-Smad2/3表达水平。组织形态学染色结果显示,AA可诱导小鼠出现肾小管扩张、结构破坏,肾间质区胶原纤维沉积,呈纤维化改变;Western blot和免疫组化结果显示,其E-cadherin表达降低,N-cadherin、TGF-β1及p-Smad2/3表达增高。huc-MSC干预后,肾脏形态明显改善,胶原纤维沉积减少,E-cadherin表达增高,N-cadherin、TGF-β1及p-Smad2/3表达受到降低。研究结果表明,huc-MSC能够通过抑制TGF-β/Smad信号通路减轻肾脏上皮间质转化,从而缓解马兜铃酸诱导的小鼠肾纤维化。
- 余熠杭张德迎胡东周宇刘博向涵龙春兰沈炼桔刘星林涛何大维魏光辉
- 关键词：人脐带间充质干细胞肾纤维化马兜铃酸上皮间质转化TGF-Β/SMAD信号通路
- 聚苯乙烯微塑料（PS-MPs）破坏血睾屏障完整性的氧化应激机制研究
- 目的探索PS-MPs致生精功能损伤的病因及分子机制,为政府制定环保政策及临床诊疗男性不育提供科学的实验依据。材料和方法成年Balb/c雄鼠随机分为5组,分别为正常对照组、20 mg/kg·bw4μmPS-MPs暴露组、4...
- 沈炼桔魏跃新吴雨昊吴盛德刘星华燚张德迎魏光辉
- 关键词：MPS血睾屏障MTORROS
- DEHP通过氧化应激损伤导致SD大鼠生精功能损伤
- <正>目的:DEHP导致SD大鼠生精功能损伤的氧化应激机制。方法:产后雌鼠随机分为玉米油对照组和DEHP暴露组,于子鼠出生后(postnatal day,PND)1-30天灌胃母鼠玉米油或DEHP 100 mg/kg b...
- 沈炼桔吴盛德彭金普王养才周玥曹希宁刘洋魏仪龙春兰林涛何大维魏光辉
- 文献传递
- 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯通过氧化应激损伤导致小鼠睾丸间质细胞凋亡
- <正>目的:采用小鼠睾丸间质细胞系TM3,阐明DEHP暴露导致间质细胞凋亡的氧化应激机制。方法:小鼠睾丸间质细胞分为3组:空白对照组,DMSO溶剂对照组和DEHP暴露组,分别给予空白、DMSO或不同浓度的DEHP处理,收...
- 沈炼桔彭金普王养才孙茫周玥曹希宁刘洋龙春兰林涛何大维魏光辉
- 文献传递
- 邻苯二甲酸二(2-乙己基)酯导致隐睾症发生跨代遗传的机制研究
- 陈进军魏光辉彭金普温晟曹希宁严超周玥沈炼桔龙春兰吴盛德
- 维甲酸促进隐睾大鼠睾丸生精功能改善的实验研究被引量：3
- 2019年
- 目的探讨维甲酸改善氟他胺诱导隐睾大鼠生精功能的相关机制,为临床预防隐睾患儿发生不育提供动物实验基础。方法30只雌性SD大鼠合笼成功后采用随机数字表法平均分为:对照组10只,孕期第12~20天皮下注射1 mg/ml的玉米油25 mg·kg^-1·d^-1;氟他胺诱导隐睾组10只,孕期第12~20天皮下注射玉米油配制的氟他胺25 mg·kg^-1·d^-1;维甲酸干预组10只,在氟他胺诱导隐睾组处理基础上,予子代雄鼠生后1~10 d及28~30 d玉米油配制的维甲酸1 mg·kg^-1·d^-1。于生后30 d及60 d观察子代雄鼠睾丸组织病理、精子数量及质量,免疫组织化学及蛋白质印迹法检测氧化应激水平蛋白、凋亡水平蛋白及血睾屏障相关连接蛋白水平改变。结果对照组无隐睾发生,睾丸重量为(0.56±0.17) g,体积为(0.44±0.12)cm^3,精子数量为(2.25±0.14)个/ml;睾丸组织各级生精细胞排列整齐,层次清楚,可见较多精子细胞;氧化应激蛋白SOD1、HO-1、Gpx表达量分别为0.92±0.02和0.62±0.06、0.93±0.12,凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达量分别为0.67±0.06和0.80±0.04,血睾屏障相关连接蛋白Cx43及Zo-1表达量分别为1.44±0.07和3.84±0.10。氟他胺诱导隐睾组隐睾发生率为62.50%(20/32),睾丸重量为(0.13±0.03) g、体积为(0.07±0.02)cm^3,精子数量为(0.65±0.17)个/ml,上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);睾丸组织各级生精细胞排列紊乱,层次不清,结构破坏;氧化应激蛋白SOD1、HO-1、Gpx表达量分别为1.23±0.07和0.90±0.09、1.70±0.01,凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达量分别为0.87±0.01和0.53±0.20,血睾屏障相关连接蛋白Cx43及Zo-1表达量分别为0.51±0.07和1.48±0.25,上述指标与对照组比较,差异亦均有统计学意义(P<0.05)。维甲酸干预组睾丸重量为(0.29±0.11) g、体积为(5.21±0.30)cm^3,精子计数为(1.49±0.31)个/ml,与对照组比较差异无统计学意义,但较氟他胺诱导隐睾组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)�
- 周宇彭金普张德迎周玥龙春兰沈炼桔刘星林涛何大维魏光辉
- 关键词：隐睾维甲酸氧化应激血睾屏障
- 细胞凋亡抑制因子6(Api6)在高脂肺损伤中的作用研究被引量：2
- 2011年
- 目的:了解单纯高脂饮食对小鼠肺组织形态学的影响及细胞凋亡抑制因子6(Api6)的表达情况.方法:将8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为2组,分别饲以普通饮食和高脂饮食,14周后获得上述2组小鼠的肺部组织切片,进行油红O染色、HE染色和免疫组化实验,观察单纯高脂饮食对小鼠肺组织形态学的影响;提取小鼠肺组织RNA,检测Api6在病变小鼠肺组织中的表达.结果:与普通饮食组小鼠肺组织相比,油红O染色可见高脂饮食组小鼠肺组织有明显的脂质沉积;HE染色和增殖期细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色可见高脂饮食组肺组织肺泡间隔增宽,肺组织炎性细胞浸润,同时增殖期细胞明显增多;Api6在高脂饮食组小鼠肺组织中的表达明显升高.结论:高脂饮食可直接导致小鼠肺组织脂质蓄积和炎性损伤,Api6可能在其发病机制中发挥一定的作用.
- 龚雪沈炼桔刘丹叶秀峰唐任宽练雪梅
- 关键词：高脂饮食脂代谢异常
- 肿瘤样干细胞来源的外泌体促进人脐带间充质干细胞的增殖和侵袭被引量：3
- 2018年
- 目的探讨Piwil2诱导肿瘤干细胞(Piwil2-iCSC)来源的外泌体对人脐带间充质干细胞(hucMSCs)肿瘤样生物学行为的影响。方法超速离心法提取Piwil2-iCSCs外泌体,透射电镜、粒径分析、Western blot及外泌体摄入实验检测外泌体形态、直径、标志蛋白表达及作用途径。将hucMSCs分为对照组、PBS干预组和外泌体干预组(Exo),CCK-8、细胞划痕实验、Transwell和Western blot检测各组hucMSCs的增殖、迁移、侵袭能力以及基质金属蛋白酶(MMPs)MMP2和MMP9蛋白的表达水平。细胞染色体核型分析检测经Piwil2-iCSCs外泌体长期干预的hucMSCs的染色体结构。结果透射电镜可见Piwil2-iCSCs外泌体大小均匀,直径在50～100 nm,呈形态较规则的圆形或椭圆形囊泡状小体,粒径分析显示外泌体直径分布集中在在100～200 nm;Western blot显示外泌体标志性蛋白CD9、CD63和piwil2蛋白阳性表达;外泌体摄入实验表明外泌体进入细胞发挥作用。与对照组和PBS干预组相比,Exo组细胞增殖数量明显增多(P<0.05),划痕愈合速度加快(24 h,P<0.05;48 h,P<0.01),侵袭细胞数目显著增加(P<0.01)。经Piwil2-iCSCs外泌体干预后的hucMSCs细胞MMP2(P<0.05 vs PBS干预组,P<0.01 vs对照组)、MMP9蛋白水平表达增高(P<0.05),但染色体核型仍是46XY,无异常。结论肿瘤样干细胞Piwil2-iCSC外泌体能促进hucMSCs的增殖、迁移及侵袭,但是未出现肿瘤样异质性改变。
- 张丹何大维李典唐波胡东郭文浩王璋沈炼桔魏光辉
- 关键词：外泌体肿瘤干细胞人脐带间充质干细胞增殖
- 邻苯二甲酸二（2-乙己基）酯导致隐睾症发生跨代遗传的机制研究被引量：2
- 2017年
- 目的探讨增塑剂邻苯二甲酸二（2-乙己基）酯（DEHP）于性腺发育的关键时期作用于孕鼠（F0），研究F1-F3代隐睾跨代遗传的演变情况及各代睾丸基因组DNA甲基化转移酶水平的改变情况。
方法妊娠SD大鼠随机分为两组：正常对照组和DEHP实验组，实验组自妊娠第七天（GD7）到第十九天（GD19）持续经口予以DEHP 750 mg·kg－1·d－1灌胃，观察子代隐睾发生情况，雌鼠受孕率；记录大鼠体重和睾丸、附睾重量以及AGD值，观察精子数量和质量；观察连续三代大鼠睾丸组织形态的演变情况，检测DNA甲基化转移酶变化情况。
结果孕鼠在孕期（GD7-GD19）暴露于DEHP,第一代（F1）隐睾发生率为30%，第二代（F2）隐睾发生率为12.5%，第三代（F3）未见隐睾发生；交配实验F1代受孕率50%，F2代75%，F3代100%；HE染色发现F1代睾丸生精上皮明显萎缩，生精细胞少，F2代有所改善，F3代形态趋于正常。Real Time-PCR、免疫组化和Western Blot表明DNA甲基化转移酶的表达随着遗传代数的增加而上调，差异有统计学意义。
结论DEHP损伤大鼠雄性生殖功能，通过改变DNA甲基化转移酶的表达，继而导致基因组印记甲基化修饰模式改变并遗传给下一代，从而使子代雄性生殖系统发育的关键性印记基因作用失衡，并最终导致子代产生隐睾，可能是导致生殖系统损害的重要毒理机制之一。
- 陈进军吴盛德温晟沈炼桔彭金普曹希宁龙春兰林涛何大维魏光辉
- 关键词：DNA甲基化隐睾
