毛海燕
- 作品数：8 被引量：28H指数：3
- 供职机构：集美大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”福建省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 拟穴青蟹精氨酸激酶的克隆表达、纯化及免疫活性分析
- 目的 克隆拟穴青蟹(Scylla paramamosain)精氨酸激酶(arginine kinase,AK)基因,简称Scy P2；表达、纯化具有免疫活性的重组AK,为研究拟穴青蟹AK的过敏性及其构效关系奠定基础.方法...
- 毛海燕曹敏杰蔡秋凤张凌晶阮密密刘光明
- 关键词：拟穴青蟹精氨酸激酶克隆表达生物信息学分析纯化
- 甲壳类动物4种过敏原的序列分析、抗原表位预测及三维结构建模被引量：18
- 2012年
- 目的探明甲壳类动物各种过敏原之间是否存在相似性,以期深入研究甲壳类食品过敏原的构效关系。方法应用生物信息学方法,分析预测了甲壳类动物的4种过敏原—原肌球蛋白(TM)、精氨酸激酶(AK)、肌球蛋白轻链(MLC)和肌质钙结合蛋白(SCP)的二级结构、亲水性、可塑性、抗原性、表面可及性、线性抗原表位和三维结构等。结果 TM为超螺旋结构,而AK、MLC和SCP均为复合蛋白,含有较多的Turn和Coil结构;TM、AK、MLC和SCP 4种过敏原的亲水性区域均在60%以上,可塑性区域约为50%,抗原性区域均在60%以上。TM、AK、MLC和SCP分别有11、10、4和4个线性抗原表位。TM、AK、MLC和SCP的三维结构建模结果与相应的二级结构预测结果一致,基本能够反映此4种过敏原的空间构象。结论通过生物信息学方法分析,同时获得了甲壳类动物4种过敏原TM、AK、MLC和SCP的分子特征、抗原表位及部分三维结构,可望为进一步采用实验方法研究其构效关系奠定理论基础。
- 沈海旺陈亨莉曹敏杰蔡秋凤毛海燕苏文金刘光明
- 关键词：抗原表位预测三维结构建模
- 拟穴青蟹精氨酸激酶的过敏性及其构效关系的初步研究
- 近年来，食用水产品而导致的过敏事件不断发生，因此水产品的食用安全性受到了越来越多的重视。以蟹类为代表的甲壳类动物是联合国粮农组织公布的常见过敏食物之一，其中的原肌球蛋白（Tropomyosin，TM）和精氨酸激酶（Arg...
- 毛海燕
- 关键词：拟穴青蟹精氨酸激酶过敏性构效关系生物信息学
- 文献传递
- R-藻蓝蛋白的分离纯化及抗食物过敏活性研究被引量：1
- 2013年
- 为探究R-藻蓝蛋白抗过敏功效,以坛紫菜为原料,通过25%～35%硫酸铵盐析和DEAE-Sepharose Fast Flow、Sephacryl S-200 HR两步柱层析获得了高纯度的目的蛋白(A620/A280>6.0).SDS-PAGE显示,该蛋白质由分子质量为17.7 ku和20.5 ku的两个亚基组成,紫外可见分光光度法测得其在620 nm、555 nm有两个特征吸收峰,可确认其为R-藻蓝蛋白.热稳定性和pH值稳定性实验结果显示,R-藻蓝蛋白在低于35℃、pH=4.0～9.0条件下光谱性质相对稳定.动物实验结果表明,100μg/mL高纯度R-藻蓝蛋白能够显著降低小鼠血清中IgE水平;细胞实验结果表明,40μg/mL R-藻蓝蛋白能够降低细胞因子IL-4、IL-13的蛋白质分泌量;基因表达量分析结果显示,R-藻蓝蛋白能够降低IL-4在淋巴细胞中的表达量.可见,坛紫菜R-藻蓝蛋白通过促使CD4+T cell向TH1型转化发挥抗食物过敏活性.
- 王有朝曹敏杰苏文金张凌晶毛海燕时超岚刘光明
- 关键词：坛紫菜R-藻蓝蛋白食物过敏原肌球蛋白
- 拟穴青蟹新型过敏原肌质钙结合蛋白的纯化、鉴定及分子克隆被引量：5
- 2014年
- 为进一步认识蟹类的过敏原,采用免疫印迹方法,分析发现甲壳类过敏患者血清能与拟穴青蟹肌浆蛋白中分子质量约为21 kD的蛋白质产生特异的IgE结合反应,结果显示该蛋白可能是蟹类新型过敏原。通过硫酸铵盐析、阴离子交换和凝胶过滤柱层析等方法对21 kD-蛋白进行分离纯化,采用Western blotting和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight-mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)确认纯化的21 kD-蛋白为肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein,SCP)。采用SMART-RACE(Switching Mechanism At RNA Termini-Rapid Amplification of cDNA Ends)的方法获得SCP的cDNA序列,该序列全长986 bp,开放阅读框为579 bp,编码193个氨基酸,其理论分子质量21.94 kD,等电点4.44。拟穴青蟹SCP与甲壳类动物SCP具有较高的同源性,与昆虫SCP的同源性较差;三级结构模拟分析显示,SCP含有5个螺旋-转角-螺旋结构区,即EF-手型结构区,并在其中两个手型结构区形成2个钙离子结合位点;进一步预测得到SCP的4个线性抗原表位和3个构象性抗原表位。
- 毛海燕蔡娜陈亨莉曹敏杰蔡秋凤刘光明
- 关键词：拟穴青蟹纯化质谱分析分子克隆生物信息学分析
- R-藻蓝蛋白的分离纯化及抗食物过敏活性研究
- 为探究R-藻蓝蛋白抗过敏功效,以坛紫菜为原料,通过25％～35％硫酸铵盐析和DEAE-Sepharose Fast Flow、Sephacryl S-200 HR两步柱层析获得了高纯度的目的蛋白(A620/A280＞6....
- 王有朝曹敏杰苏文金张凌晶毛海燕时超岚刘光明
- 关键词：坛紫菜R-藻蓝蛋白食物过敏原肌球蛋白
- 拟穴青蟹精氨酸激酶的重组表达及致敏性分析
- 2024年
- 为比较拟穴青蟹(Scylla paramamosain)重组精氨酸激酶(recombinant arginine kinase,rAK)和天然AK(native AK,nAK)的致敏性,并鉴定AK分子中的致敏优势区域,首先基于AK的抗原表位分布与空间结构,将AK分子分为AK-E1(氨基酸(amino acids,AA)1~92)、AK-E2(AA 87~187)、AK-E3(AA 172~265)和AK-E4(AA 276~357)4个片段,采用大肠杆菌原核表达系统对其进行分段表达,并分别分离纯化nAK、rAK及AK的4个分段表达产物。用BALB/c小鼠模型评价重组蛋白的致敏性,结果显示,rAK致敏小鼠血清中特异性抗体水平、脾脏淋巴细胞的Th2型细胞因子释放水平均显著升高,表明rAK可使机体致敏,但其免疫原性较nAK弱;AK的4个分段表达产物中AK-E2的免疫原性最强。同时,rAK能够刺激RBL-2H3细胞释放β-己糖苷酶,但rAK对效应细胞的刺激作用低于nAK;4个分段表达产物中AK-E2和AK-E4对效应细胞的刺激作用较强。综上,通过原核表达系统获得的rAK免疫原性较nAK弱,而AK分子中免疫原性较强的区域为AA 87~187,免疫反应性较强的区域为AA 276~357。
- 杨阳杨阳何少贵陈锦莉刘萌费丹霞毛海燕毛海燕
- 关键词：拟穴青蟹精氨酸激酶重组蛋白致敏性BALB/C小鼠
- 拟穴青蟹新型过敏原肌质钙结合蛋白的纯化、鉴定及分子克隆
- 为进一步认识蟹类的过敏原,采用免疫印迹方法,分析发现甲壳类过敏患者血清能与拟穴青蟹肌浆蛋白中分子质量约为21 kD的蛋白质产生特异的IgE结合反应,结果显示该蛋白可能是蟹类新型过敏原.通过硫酸铵盐析、阴离子交换和凝胶过滤...
- 毛海燕蔡娜陈亨莉曹敏杰蔡秋凤刘光明
- 关键词：拟穴青蟹纯化质谱分析分子克隆生物信息学分析
