林建贤
- 作品数：16 被引量：92H指数：5
- 供职机构：中山大学中山眼科中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家自然科学基金创新研究群体项目广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人免疫重建的非肥胖型糖尿病-重症复合性免疫缺陷小鼠联合视网膜母细胞瘤荷瘤模型的建立被引量：1
- 2007年
- 目的建立人免疫重建的非肥胖型糖尿病-重症复合性免疫缺陷（NOD—SCID）小鼠和人视网膜母细胞瘤（RB）动物模型，并观察其生物学特性。方法NOD—SCID鼠20只，采用计算机随机数字表法分为4组，即空白组（仅注射磷酸盐缓冲液）、人化组（仅注射人淋巴细胞）、荷瘤组（仅注射瘤细胞SO—RB50）及人化荷瘤组（注射人淋巴细胞及瘤细胞SO—RB50），每组各5只鼠。常规分离健康成人外周血淋巴细胞，分别腹腔注射到人化组及人化荷瘤组小鼠。24h后，对单纯荷瘤组和人化荷瘤组鼠双侧腹股沟皮下接种人RB细胞株SO—RB50。定期观察小鼠的健康情况及移植瘤生长、转移情况。采用组织病理学、酶联免疫吸附实验（ELISA）、流式细胞仪等方法检测小鼠人免疫功能重建情况及所生长肿瘤特性。结果荷瘤组及人化荷瘤组RB皮下移植瘤潜伏期为12～19d，成瘤率为100％，形态学及免疫组织化学特点与人类的低分化RB一致，移植瘤内可见人白细胞共同抗原（LCA）阳性淋巴细胞浸润。免疫重建后9d，在人化组及人化荷瘤组鼠检测到人IgG存在，且随时间延长其含量逐渐升高；免疫重建后26d，小鼠血液内检测到人CD3^＋ T淋巴细胞，人化荷瘤组为27．1％，人化组为25．5％。由此表明，人化组及人化荷瘤组鼠也获得了人的体液免疫及细胞免疫功能。结论初步建立人免疫重建的NOD-SCID鼠和人RB皮下移植瘤模型，较好地模拟了有免疫功能情况下人RB的生物学行为，为研究RB肿瘤的发生、发展及其免疫防治提供了一个较为理想的动物模型。
- 钟秀风葛坚彭福华张波林建贤张文忻李永平
- 关键词：视网膜母细胞瘤小鼠SCID肿瘤移植
- 转内皮抑制素基因治疗大鼠角膜新生血管被引量：7
- 2004年
- 目的:探讨转染内皮抑制素(Endostatin)基因对酸烧伤引起的大鼠角膜新生血管的基因治疗。方法:通过限制性内切酶酶切反应、聚合酶链式反应、DNA测序及用NCBIBLAST软件与基因库序列比较的方法进行鉴定,鉴定后在大肠杆菌中扩增,用质粒纯化试剂盒抽提纯化;用750g/L硝酸银和250g/L硝酸钾混合烧灼液制作大鼠角膜新生血管模型,用结膜下注射脂质体包裹的质粒pBlast- hEndostatin来进行体内基因治疗。结果:实验证实质粒pBlast-hEndostatin含有人endostatin基因。结膜下注射脂质体包裹的质粒Tel押029-82245172Email押IJO.2000@163.compBlast-hEndostatin对酸烧伤引起的炎症性角膜新生血管有明显抑制作用,术后6,10,15d对角膜新生血管面积的抑制率分别为37%,40%,43%;对角膜新生血管密度也有明显的抑制作用,抑制率达40%。对角膜新生血管长度和角膜炎症细胞没有明显抑制作用。角膜新生血管面积与角膜水肿、角膜混浊呈正相关。结论:用结膜下注射脂质体包裹的内皮抑制素基因可以部分抑制酸烧伤引起的大鼠角膜新生血管。其作用机制是转基因产生的内皮抑制素蛋白直接抑制角膜新生血管的形成,而不是通过抑制炎症反应来抑制角膜新生血管的形成。
- 张平吴德正岳滔朱振宇林建贤冯官光郑湖铃
- 关键词：基因角膜新生血管CNV手术
- 裸鼠抗So-RB50瘤细胞生长的免疫相关机理研究
- 周立军李永平张波钟秀风林建贤张文欣孟永
- 干眼患者结膜上皮细胞的凋亡与炎症被引量：24
- 2004年
- 目的了解干眼患者结膜上皮细胞是否存在凋亡与炎症状态,进一步理解干眼的发病机制。方法印迹细胞法获得干眼6例22眼和正常人7例10眼的结膜上皮细胞。Annexin V-FITC/PI流式细胞技术(flow cytometric.FCM)定量检测凋亡;免疫印迹细胞化学染色检测核转录因子-kB(NF-kB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果干眼患者结膜上皮细胞的凋亡指数较正常对照组明显增高(P<0.05),NF-kB和TGF-β1的表达较正常增强。凋亡指数与NF-kB和TGF-β1的表达呈正相关。结论干眼患者结膜上皮存在细胞凋亡及炎症,眼表上皮细胞的炎症可能是引起细胞凋亡的重要原因,抑制炎症是干眼的重要治疗方法。
- 罗丽辉刘祖国林建贤张梅张志红肖启国陈家祺
- 关键词：干眼病结膜上皮细胞炎症流式细胞技术
- 体外诱导翼状胬肉成纤维细胞向平滑肌细胞的分化
- 2012年
- 背景:作者前期研究发现翼状胬肉组织中存在平滑肌成分,但此平滑肌的来源并不清楚。目的:探讨翼状胬肉组织中平滑肌成分的起源。方法:组织块法对26例翼状胬肉进行原代细胞培养及鉴定。生长状态较好的原代细胞传代后分为诱导组和对照组,分别置于含或不含20μg/L碱性成纤维细胞生长因子的培养基中培养。倒置显微镜下对比观察两组细胞的形态学变化;共聚焦显微镜下观察免疫荧光染色波形纤维蛋白和α-平滑肌肌动蛋白在两组细胞中的表达情况。结果与结论:免疫组织化学染色显示所有细胞均表达波形纤维蛋白,鉴定为成纤维细胞。倒置显微镜下观察:对照组细胞呈长梭形,编织状排列;诱导组细胞饱满,胞体增大,呈"峰-谷样"生长。共焦显微镜观察:对照组细胞均表达波形纤维蛋白,不表达α-平滑肌肌动蛋白;诱导组细胞除表达波形纤维蛋白外,还不同程度地表达α-平滑肌肌动蛋白,胞浆内可见伸向细胞两极的肌动蛋白丝,证实为平滑肌细胞。结果表明翼状胬肉来源的成纤维细胞在体外经碱性成纤维细胞生长因子诱导可以向平滑肌细胞分化。
- 石颖颖李永平张文忻郑建樑林建贤
- 关键词：翼状胬肉成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子平滑肌
- 常见角膜病变基因治疗的进展被引量：1
- 2010年
- 角膜是基因治疗的理想靶器官。角膜碱烧伤、角膜新生血管、角膜移植术后排斥反应因其病理机制复杂,所牵涉的致病因素众多而治疗困难,疗效不佳。该文就基因治疗在上述疾病中的应用加以综述,以了解基因治疗应用于角膜病变的新进展。
- 姚娟李永平林建贤
- 关键词：角膜碱烧伤角膜新生血管移植物排斥反应基因治疗
- 体外培养的人视网膜下细胞移植的初步研究被引量：1
- 2005年
- 目的研究体外培养的人视网膜神经上皮层组织细胞和超微结构的改变。方法新鲜的人视网膜神经上皮层组织片进行体外培养,将溴化脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuri-dine,BrdU)标记的人视网膜胶质细胞种植于此视网膜神经上皮层组织片之下。光镜和电镜下分析培养视网膜神经上皮层组织学改变。以免疫荧光化学方法检测组织细胞内蛋白的表达。结果培养10d的视网膜组织片与未培养组相比,无明显结构异常。与未移植细胞组相比,行细胞移植后的视网膜神经上皮层无明显组织学改变。移植细胞能够在视网膜神经上皮层组织片下存活,表达胶质纤维酸性蛋白,并与邻近组织建立联系。结论将人视网膜胶质细胞移植到短期体外培养的人视网膜神经上皮层组织片下,培养视网膜的组织结构和移植的细胞均能保持原有特征。
- 马静林建贤李晓华唐仕波罗灿齐
- 关键词：视网膜细胞移植超微结构
- 18.肥大细胞与特发性眼眶炎性假瘤纤维化的初步探讨
- 探讨肥大细胞在特发性眼眶炎性假瘤(Idiopathic Orbital Inflammatory Pseudotumor,IOIP)纤维化进程中的作用.方法 应用免疫组织化学技术对53例特发性眼眶炎性假瘤组织标本(其中1...
- 颜建华鲁桂兰吴中耀李永平林建贤张文忻
- 自体颌下腺游离移植治疗实验性干眼症的显微技术探讨被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨自体颌下腺游离移植治疗实验性干眼症的相关显微技术。方法 制作干眼模型后 ,通过显微血管吻合将游离的兔颌下腺移植于颞部皮下 ,导管吻合于外下穹隆结膜 ,并对移植成功的颌下腺作光镜和电镜检查。结果 4只兔因血管意外致移植失败 ,10只移植成功兔分别于术后 3～ 8个月处死 ,发现 9只兔的移植颌下腺成活 ,1只兔的移植颌下腺萎缩并纤维化。成活腺体的组织病理学检查均显示正常颌下腺的结构。结论 掌握显微镜下颌下腺及其血管与导管的分离、吻合技巧和相关并发症的处理是手术成功的关键 ,血管并发症 ,尤其是静脉并发症 ,如栓塞、狭窄、扭转等是导致腺体移植失败的主要原因。
- 沙翔垠陈家祺许扬滨林建贤王晓贞戴淑珍
- 关键词：颌下腺干眼症显微技术
- RB实体瘤中肿瘤干细胞的分离鉴定
- 目的:探讨人视网膜母细胞瘤(Rb)组织内是否存在视网膜干细胞样的肿瘤干细胞。
方法:新鲜Rb组织经酶消化法获取单个瘤细胞,接种于无血清化学限定培养基培养。对培养7～15天的神经样球体,分别进行克隆形成、增殖能力...
- 钟秀风李永平葛坚黄冰林建贤江儒章
- 关键词：视网膜母细胞瘤肿瘤干细胞视网膜干细胞眼内肿瘤
- 文献传递
