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杨淋清: 作品数：129 被引量：327H指数：10; 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>

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人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2启动子区CpG岛的甲基化状态: 2012年; 目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中Foxa2的表达改变及其启动子区CpG岛的甲基化水平变化。方法按传代情况将人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞[第22代细胞,即22 PDL(populationdoubling levels,群体倍增水平)]组、中年细胞(35PDL)组、复制性衰老细胞(49PDL)组和氧化应激诱导的早衰细胞(premature senescence,PS)组。用荧光定量PCR方法检测人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2的mRNA表达改变,应用甲基化特异性PCR(MSP)检测启动子区-777～-478 bp甲基化的变化情况,并用亚硫酸氢盐修饰基因组结合克隆测序检测启动子区域CpG岛的甲基化水平。结果与年轻细胞组比较,中年细胞组人胚肺成纤维细胞Foxa2 mRNA的表达水平无明显变化;而复制性衰老细胞组和早衰细胞组人胚肺成纤维细胞Foxa2的mRNA表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。早衰细胞组的启动子区具有一定的甲基化水平;年轻细胞组、复制性衰老细胞组及早衰细胞组Foxa2启动子区CpG岛的甲基化水平分别为5.7%,17.1%和43.6%。结论人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2的mRNA表达水平逐渐降低,其启动子区CpG岛甲基化水平逐渐升高,参与其表达调控。; 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲庄志雄; 关键词：细胞衰老早衰甲基化

长期低剂量甲醛染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE部分癌症相关基因启动子区甲基化的影响: 目的探讨低剂量甲醛长期染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE癌症相关基因启动子区甲基化水平的影响。方法 16HBE细胞每周染毒甲醛10μmol·L24 h,连续24周,分别于染毒3,6,9,12,15,18,21和24周...; 杨淋清吴德生刘庆成龚春梅张文娟胡恭华周丽黄新凤刘建军庄志雄; 关键词：甲醛亚甲基四氢叶酸还原酶基因; 文献传递

1,2-二氯乙烷对大鼠肝细胞损理机理的初步研究: 目的了解1,2-二氯乙烷染毒二十四小时对大鼠肝细胞的损伤及其机理。方法运用显微荧光术测定了大鼠肝细胞内活性氧含量及游离钙离子浓度,同时,测定了大鼠肝细胞培养上清液乳酸脱氢酶活力作为大鼠肝细胞受损的指标。结果接触浓度为5m...; 张锦周申治国庄志雄杨淋清; 关键词：大鼠肝细胞活性氧游离钙离子浓度; 文献传递

肾细胞癌RASSF1A基因启动子区甲基化状况与表达水平研究: 2008年; 目的检测19例肾细胞癌患者癌组织及癌旁组织Ras相关区域家族蛋白1A(RASSF1A)基因启动子区甲基化情况并检测其mRNA表达水平,探索两者之间的联系。方法收集肾细胞癌患者癌组织及相应癌旁组织19份,分别提取其基因组DNA,以甲基化特异性PCR(Methylation special PCR,MSP)法检测RASSF1A基因启动子区甲基化情况,并以QPCR法检测了RASSF1A基因的mRNA表达水平。结果19例中有10例肾细胞癌患者癌组织存在高甲基化,mRNA表达水平表达降低,二者之间存在显著负相关性(r=-0.8734,P<0.01)。结论肾细胞癌中RASSF1A基因启动子区存在高甲基化,并抑制该基因的表达。; 袁建辉周建孟黄海燕周丽徐新云杨淋清刘建军庄志雄; 关键词：肾细胞癌启动子甲基化

职业接触六价铬对人群线粒体MT-TF基因甲基化水平的影响: 【目的】六价铬化合物为Ⅰ类致癌物,但相关分子机制尚未阐明,本文拟探讨职业接触六价铬对工人线粒体DNA中MT-TF基因甲基化水平的影响,为阐明六价铬致癌机制提供数据,并为寻找新型生物标志提供依据。【方法】采用水浴酸消化一电...; 杨淋清吴德生丁鸿杨学琴张慧敏夏菠崔栋刘建军庄志雄; 关键词：线粒体DNA DNA甲基化; 文献传递

双酚A对小鼠胚胎干细胞OCT4及SOX2基因表达的影响被引量：2: 2013年; 目的探讨双酚A（bisphenolA，BPA）对小鼠胚胎干细胞（mESC）的毒性特征及OCT4、SOX2基因表达的影响。方法分别以10^-8、10^-7、10^-6、10^-5、10^-4mol／L浓度的BPA及二甲亚砜（溶剂对照组，DMSO）处理mESC系（S6）细胞24h，重复处理3次，倒置显微镜下观察正常组、染毒组细胞的形态变化，CCK-8法检测BPA对细胞增殖的影响，计算半数抑制浓度（IC50）；分别采用real—time（RT）一Q—PCR和western—blotting技术检测BPA作用下OCTg、SOX2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。结果BPA对mESC有一定的毒性作用，染毒浓度越大，细胞活性越小，二者呈剂量-效应关系，并通过计算得出BPA对mESC的IC50为4．3×10^-4mol／L，同时结合BPA的环境相关暴露浓度和相关资料，最终取10^-8、10^-7、10^-6、10^-5、10^-4mol／L系列浓度作为后续实验浓度；BPA处理24h后，mESC细胞形态发生改变，较高浓度组与对照组比较，细胞数量明显减少，出现少许漂浮的细胞，克隆变得不规则，分化趋势明显。BPA浓度为10^-7、10^-6、10^-5、10^-4的OCT4mRNA相对表达量分别为1．146±0．087、1．156±0．030、1．158±0．103、1．374±0．053，均高于对照组（1．000±0．000）（t值分别为-2．384、-2．953、-3．203、-4．021，P值均〈0．05）；BPA染毒浓度为10^-4mol／L（1．113±0．052）的SOX2mRNA相对表达水平高于对照组（1．000±0．000）（t=-2．765，P〈0．05）。染毒浓度为10^-5、10^-4mol／L的OCT4蛋白质相对表达量分别为1．360±0．168、1．602±0．151，均高于DMSO组（1．0004-0．000），差异有统计学意义（t值分别为-3．538、-4．002，P值均〈0．05）；而各浓度组SOX2蛋白相对表达水平差异无统计学意义。结论BPA对mESC具有一定的细胞毒性，在一定剂量范围内BPA可以使mESCOCT4基因表达增加，而对SOX2基因无明显影响。; 罗凌凤杨淋清吴德生周明龚春梅刘庆成夏菠黄冠琴匡侠锋庄志雄张文昌; 关键词：胚胎干细胞双酚A

中国南方粤语方言地区汉族人群GSTM1、GSTT1基因多态性被引量：10: 2006年; 背景与目的:了解谷胱甘肽-S-转移酶M1、T1(GSTM1、GSTT1)基因多态性在中国南方粤语方言地区健康人群中的分布规律,初步探讨其与人群某些疾病家族史之间的关系。材料与方法:根据研究目的在广东省新兴县和广东省广州市两个地区选择符合条件的健康人群606人作为研究对象。应用聚合酶链式反应-2%琼脂糖凝胶电泳的方法检测调查对象GSTM1、GSTT1基因型。结果:在调查人群中,GSTM1基因纯合缺失基因型GSTM1(-/-)的出现频率为56.8%(n=597);GSTT1基因纯合缺失基因型GSTT1(-/-)的出现频率为42.1%(n=579);两基因联合缺失的频率为22.8%(n=570)。结论:GSTM1与GSTT1基因之间在人群中分布相互独立,无连锁现象,GSTM1基因在两个不同地区来源人群中的分布有显著差异。GSTT1在人群中不同基因型的分布与研究人群中冠心病疾病家族史的发生之间显著关联,有冠心病家族史人群GSTT1缺失基因型的表达显著增加。; 杨淋清杨杏芬林忠宁魏青潘尚霞周建强林育纯赵敏马文军黄俊明; 关键词：谷胱甘肽-S-转移酶基因多态性 GSTM1 GSTT1

结晶型硫化镍诱发细胞恶性转化过程中基因组总体DNA甲基化的改变被引量：4: 2010年; 目的探讨结晶型硫化镍（NiS）对体外培养细胞基因组总体DNA甲基化水平的影响.方法分别以0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2结晶型NiS处理人支气管上皮细胞系（16HBE）24 h,隔天再次进行相同处理,共处理3次;以3μmol/L DNA甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷（DAC）处理72 h的正常细胞为阳性对照.应用免疫荧光法和SssI甲基转移酶法定性、定量分析结晶型NiS处理细胞和恶性转化细胞（NSTC）基因组DNA总体甲基化的变化.结果结晶型NiS处理细胞DNA甲基化免疫荧光的强度均有不同程度降低,转化细胞DNA甲基化免疫荧光的强度明显降低.定量分析结果显示,对照组基因组总体甲基化率（mCpG%）为（81.9±7.3）%,0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2的结晶型NiS处理3次的细胞（NiS0.25、NiS0.50、NiS1.00、NiS2.00）基因组总体mCpG%则分别为（77.9±6.2）%、（75.3±6.8）%、（59.5±4.9）%、（67.4±5.1）%.经单因素方差分析显示,不同组间总体mCpG%差异有统计学意义（F=124.95,P＜0.01）,两两比较发现NiS1.00和NiS2.00组与对照组相比,差异均有统计学意义（t值分别为7.64、4.89,P值均＜0.01）;恶性转化细胞（NSTC1、NSTC2）基因组总体mCpG%分别为（46.2 ±4.1）%、（43.6±4.3）%,低于对照组,差异有统计学意义（t值分别为12.79、13.56,P值均＜0.01）.结论结晶型NiS诱发细胞恶性转化过程中,整体基因组DNA甲基化水平降低.; 杨淋清纪卫东陶功华张文娟龚春梅周丽刘建军柯跃斌庄志雄; 关键词：DNA甲基化荧光免疫测定细胞转化硫化物

β-1,3-D-葡聚糖的遗传毒性研究被引量：1: 2005年; 目的检测β-1,3-D-葡聚糖的遗传毒性。方法采用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验对受试物进行遗传毒性研究。结果β-1,3-D-葡聚糖Ames试验在加和不加S9条件下均无致突变性,对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验无诱发微核作用,小鼠精子畸形试验未见精子畸形率增高。结论β-1,3-D-葡聚糖在本实验条件下,无致突变作用。; 黄海雄庾蕾张锦周杨淋清刘丽清; 关键词：遗传毒性 AMES试验微核精子

慢病毒介导的RNA干扰技术构建hOGG1和hMTH1基因缺陷细胞模型: 2011年; 目的:分别建立8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(human 8-hydroxyguanine glycosylase,hOGG1)基因和8-羟基鸟嘌呤核苷酸酶(human Mut T homlogue,hMTH1)基因缺陷细胞模型,为进一步研究两个基因的相互关系提供理想的研究平台。方法:利用慢病毒载体介导的小发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA)转入人胚胎肾细胞(293FT)包装慢病毒,用所得到的慢病毒感染人胚肺成纤维细胞(HFL),杀稻瘟菌素筛选稳定表达的细胞株,荧光显微镜下观察慢病毒的包装效率和感染效率,Real-time RT-PCR鉴定基因干扰效果。结果:得到了滴度较高的慢病毒,感染靶细胞后得到hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型,hOGG1 mRNA和hMTH1mRNA表达水平分别比正常HFL细胞下降了90%和60%。结论:通过慢病毒包装技术,成功构建hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型。; 黄娟袁建辉杨淋清柯跃斌; 关键词：慢病毒 RNA干扰 HOGG1

杨淋清

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