杜翠红
- 作品数：48 被引量：218H指数：9
- 供职机构：集美大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金教育部跨世纪优秀人才培养计划更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程轻工技术与工程文化科学更多>>
- 大肠埃希菌与酿酒酵母偶联合成S-腺苷甲硫氨酸被引量：1
- 2015年
- 目的为大规模工业化生产S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)提供一套经济合理的生产工艺。方法将经DNA序列测定正确的SAM合成酶基因(SAMS)片段,经Eco RⅠ和NotⅠ双酶切,亚克隆至大肠埃希菌表达载体p ET-28a上,构建SAMS基因重组表达质粒p ET-28a-SAMS。将重组表达质粒转入大肠埃希菌表达宿主BL21(DE3),构建大肠埃希菌表达菌株BL21(p ET-28a-SAMS)。采用混合悬浮培养法,利用含有SAMS基因的重组大肠埃希菌BL21(p ET-28a-SAMS)中的SAM合成酶系和酿酒酵母JM-310中的ATP生物合成酶系,构建一个以葡萄糖为能源的中间偶合ATP再生系统,并对两种细胞的偶联合成比例、偶联时间、通透剂的种类及浓度、偶联缓冲液主要成分的浓度进行优化。结果经双酶切及菌落PCR鉴定证明,重组表达质粒p ET-28a-SAMS及大肠埃希菌表达菌株BL21(p ET-28a-SAMS)构建正确。大肠埃希菌BL21(p ET-28a-SAMS)与酿酒酵母的最佳偶联合成比例为4∶1,最佳偶联时间为5 h,添加5%甲苯通透效果最好,200 mmol/L磷酸缓冲液、200 mmol/L葡萄糖、10 mmol/L腺苷、30 mmol/L Mg Cl2·6H2O、30 mmol/L L-甲硫氨酸为最适偶联缓冲体系。最佳偶联条件下,偶联系统中SAM的浓度最高达1.7 g/L,对照组中SAM的浓度为0.17 g/L。结论本研究建立的方法操作方便,工艺简单,为SAM的廉价生产提供了一条新的途径。
- 魏晓楠燕龙龙李婷李欢杜翠红
- 关键词：大肠埃希菌酿酒酵母偶联S-腺苷甲硫氨酸
- 鳜鱼(Siniperca chuatsi)幽门垂中两种胰蛋白酶的cDNA克隆及其生物信息学分析被引量：2
- 2011年
- 采用RT-PCR、3′-RACE及5′-RACE技术从鳜鱼幽门垂组织中克隆了两种胰蛋白酶(分别命名为TRS-A与TRS-B)cDNA全长序列。将测序结果递交GenBank数据库,分别获得登录号为ACD70339和ACD70340。采用生物信息学的方法和工具预测了鳜鱼胰蛋白酶的理化参数及其高级结构,并构建了系统进化树。结果表明:(1)TRS-A和TRS-B的cDNA开放阅读框编码的蛋白序列中均含有一段长度为15个氨基酸残基的信号肽、5个氨基酸残基组成的激活肽、222个氨基酸残基组成的成熟蛋白区域;(2)TRS-A成熟蛋白的相对分子量为24.1kDa、理论等电点为5.69,TRS-B的相对分子量为24.2kDa、理论等电点为5.75;(3)建立了TRS-A和TRS-B的三维结构模型,预测了其活性位点及12个半胱氨酸残基形成二硫键的位置。
- 杜翠红苏文金卢宝驹刘光明邱晓燕曹敏杰
- 关键词：鳜鱼胰蛋白酶基因克隆生物信息学
- 一种利用虾蟹下脚料制备调味品原料的方法
- 本发明公开了一种利用虾蟹下脚料制备调味品原料的方法，包括以下步骤：步骤一、制备虾头粗酶及虾头酶；步骤二、虾头粗酶酶解虾壳；步骤三、虾头酶酶解蟹壳及蟹脚。本发明利用从虾头中的提取的虾头粗酶水解虾蟹下脚料制备海鲜味调味料。本...
- 严滨杜翠红
- 文献传递
- 沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/氧化酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2010年
- 核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/氧化酶(RubisCO)(EC4.1.139)是光合细菌通过卡尔文循环固定二氧化碳的关键酶。本文采用PCR方法,从沼泽红假单胞菌株No.9中克隆到RubisCO基因(cbbM)序列(该序列已提交GenBank,登录号:GU061327)。采用同源建模法,建立了该RubisCO蛋白的三维结构模型,预测其活性位点。将cbbM基因亚克隆到表达载体pTV118N上,构建表达质粒pTV-CBBM,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株BL21(DE3)/pTV-CBBM,该菌株经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE检测。采用气相色谱法测定破菌上清中的RubisCO酶活。结果表明:①cbbM基因编码461个氨基酸,与沼泽红假单胞菌株DCP3和DH1的RubisCO蛋白序列相似性分别为98%和99%;②推测沼泽红假单胞菌No.9中RubisCO蛋白的活性中心由Asn112、Lys192、Asp194、Glu195、His288、Arg289、His322、Gly424、Ser369、Gly370和Gly394等氨基酸残基组成;③重组蛋白分子量约为50kDa左右,与预测相符;④破菌上清中的RubisCO酶比活高于原始菌株中的酶活,说明目的基因在大肠杆菌中得到了有效表达。
- 杜翠红刘静雯周集体
- 关键词：沼泽红假单胞菌基因克隆大肠杆菌
- 生物发酵罐集中控制系统的实现被引量：3
- 2007年
- 本文以西门子的S7-200可编程控制器(PLC)作为生物发酵罐的主控制器,利用传感器检测发酵过程的动态数据,采用VC6.0作为开发工具设计上位机的监控程序,实现了上位机(PC)与可编程控制器(PLC)之间的数据通信,达到了多台发酵罐进行集中控制的目的。
- 朱宇杜翠红
- 关键词：可编程控制器PCVC6.0发酵罐集中控制系统
- 杂多酸盐在可见光照射下对染料的催化降解被引量：7
- 2009年
- 将杂多酸(PW9Fe3)负载到阴离子交换树脂(Resin)上,得到PW9Fe3/Resin(PWFR)固相光催化剂,在可见光的照射下,可以有效地活化H2O2降解染料.以罗丹明B(Rhodamine B,RhB)为模型化合物,研究了不同条件下RhB的降解动力学,以及降解过程中其UV-vis光谱及体系的总有机碳(Total Organic Carbon,TOC)变化情况,结果表明RhB的共轭芳环结构被破坏.催化剂的循环实验表明,PWFR固相光催化剂易于分离,并且具有良好的稳定性,可以重复利用.
- 王力杜翠红黄高凌钟惠萍
- 关键词：杂多酸阴离子交换树脂降解总有机碳
- 大肠杆菌与酿酒酵母偶联合成S-腺苷甲硫氨酸的制备方法
- 本发明公开了一种大肠杆菌与酿酒酵母偶联合成S-腺苷甲硫氨酸（SAM）的制备方法，其基本过程为：首先将含有S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因（SAMS）的大肠杆菌工程菌株BL21/pET-28a-SAMS与酿酒酵母分别在适宜的条件...
- 杜翠红魏晓楠
- 文献传递
- 不同加工方式降低大黄鱼鱼卵过敏原及其消化产物免疫反应性的比较研究被引量：8
- 2014年
- 目的本文以大黄鱼鱼卵为原料,分析比较不同加工方式对大黄鱼鱼卵过敏原及其消化产物免疫反应性的影响。方法采用不同加工方式(美拉德反应、紫外照射、超声联合加热、高温高压)处理鱼卵,制备卵黄蛋白粗提物并进行模拟胃肠液二相消化实验,利用免疫印迹及抑制性ELISA方法对粗提物及消化产物中过敏原的IgG/IgE结合活性进行分析。结果分析不同加工方式处理后卵黄蛋白中过敏原的IgG结合活性,结果发现当抗体稀释倍数为4×104时,检测不到美拉德反应产物与抗体发生特异性结合,而经后三种物理加工方式处理后的粗提物均与抗体有不同程度的免疫反应。此外,分析加工处理及其消化产物中过敏原与患者血清的IgE结合活性,结果显示经不同加工方式处理后,仅有美拉德反应产物的抑制率低于50%;经高温高压处理的粗提物抑制率为65%,但消化后其抑制率降至20%以下。结论在4种不同的加工方式中,美拉德反应能有效地降低大黄鱼鱼卵中过敏原的IgG/IgE结合活性,超声联合加热及高温高压处理明显减弱过敏原消化产物的IgE结合活性,紫外照射对过敏原的影响不明显。
- 刘妍妘曹敏杰李玉宝张凌晶杜翠红刘光明
- 关键词：免疫反应性
- 一种重组鸭白细胞介素-2的毕赤酵母表达菌株及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种重组鸭白细胞介素-2的毕赤酵母表达菌株，该菌株的染色体上整合了鸭白细胞介素-2基因；及其此种重组鸭白细胞介素-2的毕赤酵母表达菌株的构建方法和应用。本发明具有操作方便、转化率高，生产工艺简单，产品纯度高、...
- 杜翠红曹敏杰刘静文肖安风
- 文献传递
- 苯甲酸厌氧降解机理及功能基因的研究进展被引量：1
- 2003年
- 对芳香化合物降解重要中间体的苯甲酸在厌氧条件下的降解途径及机理。指出了降解过程中每一步骤所涉及的酶及其相关基因。
- 严滨周集体王竞杜翠红
- 关键词：降解基因苯甲酸
