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李启红: 作品数：118 被引量：154H指数：7; 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>; 发文基金：国家科技基础性工作专项北京市自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学经济管理更多>>

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鸡抗REV血清的制备与检定被引量：7: 2011年; 用网状内皮组织增生症病毒(REV)HA9901株免疫SPF鸡,无菌采血制备鸡抗REV血清。通过ELISAI、FA、AGP、HI等方法对制备的血清进行检测,未检出禽类常见的其他17种(或亚型)病毒的抗体,该血清具有良好的特异性。通过测定,该血清用于间接免疫荧光试验(IFA)的效价为1∶2000,用于IFA检测REV的染色效果与REV单抗(11B18和11B54的混合物)相当。试验结果表明,该批血清1000倍稀释可作为一抗,用于REV的间接免疫荧光检测。; 李俊平杨承槐李启红夏业才黄建华陈永忠; 关键词：网状内皮组织增生症病毒抗血清间接免疫荧光试验

产气荚膜梭菌ε毒素重组突变体大肠杆菌表达条件的优化被引量：1: 2021年; 为优化产气荚膜梭菌ε毒素重组蛋白的表达条件,以前期构建的产气荚膜梭菌ε毒素重组突变体为基础,通过控制变量法确定诱导温度、诱导时间、IPTG诱导浓度以及诱导时菌液浓度等原核蛋白表达条件。结果表明,ε毒素的重组突变体在37℃、菌液OD_(600)值为0.895~1.295,1.6 mM IPTG诱导6 h条件下可溶性表达量最高。这为下一步大规模生产ε毒素基因工程亚单位疫苗奠定基础。; 朱真杜吉革薛麒李启红印春生张莹辉李倩琳姚文生陈小云; 关键词：产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗蛋白表达

产气荚膜梭菌ε毒素突变体的表达及免疫保护力评价被引量：4: 2018年; 为获得产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)的重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因进行优化设计,并将第106位组氨酸突变为脯氨酸,经人工合成获得基因片段GETXH106P。将GETXH106P克隆至原核表达载体p ET30a(+),转染BL21(DE3)菌中进行表达与纯化,从而获得重组蛋白r ETXH106P。利用Western blot方法检测r ETXH106P与D型产气荚膜梭菌抗血清的反应性,并检测其对犬肾细胞系(MDCK细胞)以及小鼠的毒力。随后,将r ETXH106P与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,免疫4只健康家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。结果表明,r ETXH106P为可溶性表达,通过灰度扫描,其可溶性表达量比例可达30%;该重组蛋白能与D型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应;细胞毒性试验结果显示,100μg/m L的重组蛋白仍无细胞毒性;小鼠安全性实验结果显示,6.25×106ng/kg剂量的重组蛋白对小鼠仍无致死性;每毫升的一免抗血清可中和450~700个最小致死量(MLD)、二免抗血清可中和3000~4000个MLD的D型产气荚膜梭菌毒素;用1 MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔4/4保护。以上结果表明,产气荚膜梭菌r ETXH106P重组蛋白毒力基本消失,且保留了良好的免疫原性,是D型产气荚膜梭菌病基因工程亚单位疫苗的理想候选抗原蛋白。; 杜吉革彭小兵张秀坤朱真薛麒王磊李启红印春生姚文生康凯蒋玉文陈小云; 关键词：突变毒力抗原性

两种不同品系小鼠对狂犬病灭活疫苗免疫效果的影响: 狂犬病是由狂犬病毒感染引起的可侵犯哺乳动物中枢神经系统的人兽共患病,发病后死亡率几乎为100%。全世界每年约有4～7万人死于狂犬病,其中99%发生在发展中国家,主要是亚洲和非洲。犬猫等动物接种疫苗是预防狂犬病最关键的措施...; 张莹辉李启红杜吉革朱真陈小云印春生; 关键词：狂犬病中和抗体 KM小鼠 BALB/C小鼠

鸭肠炎病毒AV1221株gI基因序列分析: 鸭病毒性肠炎(Duck Virus Enteritis,DVE),俗称鸭瘟(Duck plague),是由鸭肠炎病毒(Duck EnteritisVirus,DEV)引起的鸭、鹅和其他雁形目禽类的一种急性、热性、败血性传...; 杨承槐李俊平李启红刘丹黄建华蒋桃珍李慧姣夏业才; 文献传递

一种无毒性气肿疽梭菌基因工程亚单位疫苗用菌种及其应用: 本发明涉及一种无毒性气肿疽梭菌基因工程亚单位疫苗及其应用，本发明制备的无毒性气肿疽梭菌基因工程亚单位疫苗用菌种，系重组表达经过密码子优化的气肿疽梭菌鞭毛蛋白和细胞毒素A重组融合蛋白的大肠杆菌，用该菌种生产的气肿疽梭菌基因...; 杜吉革陈小云刘莹彭小兵薛麒朱真李启红印春生姚文生康凯; 文献传递

产气荚膜梭菌α毒素突变体的表达及免疫保护力评价被引量：7: 2019年; 对已知的产气荚膜梭菌CPA编码基因进行优化设计,同时引入包括第56和130位的天冬氨酸(D)突变为甘氨酸(G),及第275位的酪氨酸(Y)和第336位的天冬氨酸(D)突变为天冬酰胺(N)的4个氨基酸突变,经人工合成获得基因片段Gcpam4。将Gcpam4克隆至原核表达载体pET-30a(+)中进行表达与纯化,获得重组蛋白rCPAm4。利用Western blot方法检测rCPAm4与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清的反应性,并采用小鼠检测纯化蛋白的毒力。随后,将rCPAm4与Montanide ISA 201佐剂以1∶1的比例混合乳化制备疫苗,免疫家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测兔血清的中和抗体效价。二免后21d,对家兔通过耳缘静脉注射1个家兔MLD剂量的A型产气荚膜梭菌毒素,以检测rCPAm4对家兔的免疫保护效果。结果表明,rCPAm4主要以包涵体的形式表达,且能与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清反应;小鼠安全性试验显示,5.5mg/kg剂量的rCPAm4对小鼠仍无致死性;免疫rCPAm4后,每毫升的一免抗血清可中和10～20个小鼠MLD、二免抗血清可中和30～50个小鼠MLD的A型产气荚膜梭菌毒素;1个家兔MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔100%死亡,免疫组家兔得到了100%的保护。以上结果表明,rCPAm4具有良好的安全性和免疫原性,从而为A型产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗的研制提供了重要的试验数据。; 杜吉革薛麒朱真李启红印春生姚文生康凯陈小云; 关键词：突变毒力抗原性

新城疫浓缩灭活疫苗的初步研究被引量：1: 2012年; 以103.0、104.0、105.0EID503个不同剂量接种非免疫鸡胚,收获鸡胚液,病毒含量测定结果显示,以103.0～104.0EID50剂量接种的鸡胚收获的抗原含量高。用该优化方法繁殖了一批新城疫抗原,采用截留分子量为100 kD的浓缩滤膜对新城疫抗原进行浓缩,对不同浓缩倍数的新城疫抗原制备疫苗进行了免疫效力试验。结果表明,以新城疫3倍浓缩抗原制备疫苗,以5μL剂量(现有相关产品效力检验的1/4剂量)免疫SPF鸡,即可达到现有同类产品的效力检验质量标准,高抗体水平至少可以维持35 d。本研究为进一步研制新城疫灭活浓缩疫苗用于低剂量免疫肉鸡提供了基础。; 李俊平李启红杨承槐刘丹李慧姣蒋桃珍黄建华; 关键词：灭活疫苗

灭毒净对鸡新城疫病毒和传染性法氏囊病病毒的杀灭试验: 2001年; 采用鸡胚接种法对灭毒净杀灭鸡新城疫病毒和传染性法氏囊病病毒的效能进行了试验 ,结果 1 0 0倍稀释的灭毒净分别与含 1 0 3.0 ELD50 /0 .1 ml的 IBDVB87毒液和含 1 0 5.0 ELD50 /0 .1 ml的 NDVI系毒液等量混合 ,室温作用 30 min可以完全将病毒杀灭。; 张存帅李启红李慧姣李孝欣缪从容; 关键词：新城疫病毒传染性法氏囊病病毒杀灭试验消毒剂

羊传染性脓疱病毒TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：7: 2020年; 为建立快速、灵敏的羊传染性脓疱病毒(ORFV)检测方法,本研究利用新一代的TaqMan MGB探针技术,根据ORFV编码F1L蛋白的059基因保守序列设计了1对引物和1条探针,建立了基于羊传染性脓疱病毒059基因的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,对该法进行灵敏性、重复性、特异性分析,检测了14份临床样品。结果显示,所建立的方法标准曲线斜率为-3.36,截距为38.36,相关性系数(R2)为0.995,灵敏性在3.2~32 copies/μL之间,组内与组间重复的变异系数均小于1.65%,与常见羊病的病原体无交叉反应,表明所建立的基于ORFV 059基因的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法适用于羊传染性脓疱病毒的快速检测。; 陈勇李倩琳杜吉革李启红印春生陈小云朱真; 关键词：羊传染性脓疱病毒实时荧光定量PCR

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