李慧姣
- 作品数：125 被引量：135H指数：7
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家科技基础性工作专项北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学经济管理生物学医药卫生更多>>
- 高致病性禽流感疫苗及其监督管理被引量：1
- 2004年
- 本文对禽流感的背景情况作了简要的介绍,重点介绍了我国研制的高致病性禽流感疫苗的种类及特点及高致病性禽流感疫苗的管理规定,可供禽流感疫苗研制、生产和使用人员借鉴。
- 李慧姣
- 关键词：高致病性禽流感疫苗监督管理
- 鸡传染性支气管炎毒种保存期试验(二)被引量：1
- 1998年
- 对不同时期制备的３批鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ５２毒种用ＳＰＦ鸡胚进行保存期测定，并用保存１５年的ＩＢＶＨ５２Ｅ２代毒种经复壮后繁殖冻干ＩＢＶＨ５２Ｅ４代毒种并进行全面鉴定，结果表明冻干的ＩＢＶＨ５２毒种在－７０℃条件下保存４年、７年、１５年毒种效价下降不明显，用保存１５年的ＩＢＶＨ５２毒种复壮后繁殖冻干的毒种其免疫原性、安全性等指标均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》［１］规定标准。
- 李孝欣缪从容李慧姣张存帅李启红
- 关键词：保存期
- 鸭肠炎病毒囊膜糖蛋白gE基因序列分析及真核表达载体的构建被引量：1
- 2014年
- 为探索鸭肠炎病毒（DEV）囊膜糖蛋白gE基因的相关特性和功能，应用PCR扩增了DEV的gE基因，全长1473bp，编码490个氨基酸，其中1～22位氨基酸为信号肽。gE基因与国内分离强毒CHv株、国内疫苗株同源性均为100％，与德国分离强毒2085株同源性达到99％，显示其高度保守。将gE基因完整开放阅读框（gE）和去信号肽的gE基因（gE’）分别克隆至真核表达载体pCDNA3．1．获得重组质粒pCDNA3．1-gE、pCDNA3．1-gE，然后应用脂质体法转染vero细胞。RT—PCR扩增证实gE、gE’均在细胞内进行了转录，而间接免疫荧光试验证实只有gE’基因在veto细胞中获得了表达，h研究gE蛋白的功能及研制鸭瘟抗体检测试剂盒奠定了基础。
- 文晶亮李启红李俊平刘丹李岭杨承槐李慧姣夏业才
- 关键词：鸭肠炎病毒真核表达
- 我国兽用生物制品质量分析及应对措施
- 2008年
- 我国重大动物疫病的防控成效与高质量疫苗的应用密不可分。因此,加强兽用生物制品的质量监督和促进兽用生物制品企业的良性发展直接关系到畜牧业的健康持续发展,关系到公共卫生安全和社会的稳定。为此,中国动物保健品协会于2008年3月20￣21日在广州市举办了兽用生物制品市场发展论坛,来自全国各地的68家通过GMP验收的生物制品企业和相关行业的老总及技术人员共400余人参加了本次大会。农业部兽医局副局长、中国动物疫病预防控制中心主任张仲秋,农业部兽医局药政药械处处长秦德超参加了本次大会。中国兽医药品监察所李慧姣研究员、王栋研究员等几位专家在会上作了相关技术讲座,本刊对部分讲座内容进行了整理,现予以刊登,敬请广大读者关注。
- 李慧姣
- 关键词：兽用生物制品重大动物疫病
- 禽用病毒性活疫苗外源病毒污染现状
- 由于原材料等原因,禽用活疫苗极易污染LLV、REV、CAV、REOV等外源病原,使用污染病原的禽用活疫苗给养禽业带来隐患,造成极大的经济损失。因此,实现禽用活疫苗的SPF化生产是保证产品的纯净、安全与有效的重要因素之一。...
- 李慧姣
- 文献传递
- 2005年后我国兽用生物制品业面临的选择
- 2004年
- 李慧姣
- 关键词：合法化生产技术
- 传染性法氏囊病病毒BC6/85株全基因组克隆及其序列分析
- 以传染性法氏囊病病毒(IBDV)BC6／85株基因组RNA为模板，采用RT-PCR方法扩增并克隆了IBDV BC6／85株基因组全长cDNA。序列测定结果表明：A节段全长共3260个核苷酸，与IM株的同源性最高为97.4...
- 于雷杨承槐李俊平李启红刘丹黄建华李慧姣
- 关键词：传染性法氏囊病病毒基因克隆
- 鸭瘟病毒强毒株在感染鸭体内的动态分布研究
- 为了研究鸭瘟强毒CSC株在感染鸭胸腺、脾脏、法氏囊、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、十二指肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、大脑、三又神经节、血清和泄殖腔拭子中的动态分布规律,根据Gene Bank中鸭瘟CSC株的gD基因...
- 文晶亮李俊平李启红李岭孙淼李慧姣杨承槐夏业才
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 表达绿色荧光蛋白重组鸭肠炎病毒构建被引量：3
- 2016年
- 【目的】鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)不同毒株间存在明显差异,DEV疫苗株的UL2基因在195bp后连续缺失528bp,导致第65位氨基酸后连续缺失176aa^([1])。将绿色荧光蛋白(GFP)基因插入DEV UL2基因中,获得表达绿色荧光蛋白的重组病毒,以研究UL2基因对DEV生物特性的影响和探讨DEV作为载体表达外源基因的可行性。【方法】以实验室保存的DEV细胞适应株DNA为模板,利用PCR技术扩增出病毒UL2基因上下游序列并克隆入pMD-18T载体;以UL2基因作为外源基因插入靶点及同源重组臂,将CMV启动子控制的含有GFP-gpt基因表达盒克隆入DEV UL2基因中,构建含GFP基因的转移质粒载体pT-UL2-GFP-gpt;用脂质体将其与DEV细胞适应株共转染CEF细胞,待80%细胞出现病变后,冻融3次,接种到新鲜CEF细胞单层的6孔培养板中,用含5%血清、1%双抗、1%琼脂的M199培养液覆盖,在荧光显微镜下挑取单个有绿色荧光的蚀斑,再接到新的细胞上,重复蚀斑筛选、纯化表达绿色荧光蛋白的重组病毒;利用PCR、基因测序技术鉴定重组病毒;重组病毒接种CEF(moi=0.01),每12h取出1瓶接毒细胞,分别收集上清和细胞,测量其病毒含量,绘制一步生长曲线;重组病毒在CEF中连续传代20次,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,并用PCR检测GFP的传代稳定性;重组病毒免疫4周龄SPF鸭后14d,肌肉注射接种DEV强毒(CVCC AV1221),观察免疫保护情况。【结果】经双酶切鉴定,成功构建了含绿色荧光蛋白报告基因的转移质粒载体p T-UL2-GFP-gpt,将其与DEV共转染CEF细胞后8h,即可见转染细胞中有带有绿色荧光的梭形细胞,经过8轮蚀斑筛选,获得纯化的重组病毒rDEV-△UL2-GFP-gpt;PCR鉴定及基因测序结果显示,GFP标记基因成功地插入到DEV基因组中,替换了DEV UL2基因的196—723位核苷酸;一步生长曲线结果显示,重组病毒在细胞和上清中的病毒含量分别在36h和72h达到峰值,为10^(6.
- 孙莹李俊平黄小洁李岭曹明慧李启红李慧姣杨承槐
- 关键词：鸭肠炎病毒绿色荧光蛋白重组病毒
- BHK-21细胞全悬浮培养技术在新城疫疫苗生产中的应用
- 本发明涉及BHK-21细胞全悬浮培养技术在新城疫疫苗生产中的应用。本发明公开的BHK-21细胞全悬浮培养生产新城疫疫苗的工艺包括以下步骤：(1)病毒株选育：鸡胚培养的新城疫疫苗种毒接种单层BHK-21细胞，加入病毒维持液...
- 吴华伟陈晓春高艳春郎洪武邓永李俊平李慧姣夏业才
- 文献传递
