曹慧慧
- 作品数：12 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院油料作物研究所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗菌肽基因BnPCD842895克隆表达及活性检测被引量：2
- 2013年
- 为寻找新型植物抗菌肽,通过生物信息学的手段在全基因组范围内进行油菜抗菌肽基因的预测和分析,初步筛选出与已知抗菌肽具有类似序列结构特征的候选基因BnPCD842895。BnPCD842895基因长度为189bp,编码48个氨基酸,通过overlap PCR方法,将合成的抗菌肽基因克隆到pET30a-EDDIE-GFP表达载体上。将大肠杆菌中表达得到的包涵体融合蛋白在体外复性,并通过融合蛋白EDDIE的自我剪切,从而获得不增加任何多余氨基酸的抗菌肽产物。抑菌活性检测结果表明BnPCD842895对革兰氏阳性菌和阴性菌都具有较强的抑菌活性。
- 黄金黄军艳柯涛周瑢曹慧慧马向东童超波于景印吴南董彩华刘胜毅
- 关键词：抗菌肽甘蓝型油菜活性检测
- 一种油菜抗菌肽BnPRP1及其应用
- 本发明公开了一种油菜抗菌肽BnPRP1及其应用。本发明提供了一种油菜抗菌肽BnPRP1，其序列为SEQ ID NO.2所示。通过overlap PCR方法完成该基因的人工合成，将合成的抗菌肽基因克隆到pET30a/His...
- 刘胜毅董彩华柯涛曹慧慧黄军艳刘越英童超波程晓辉
- 文献传递
- 一种油菜抗菌肽BnCRP1及其应用
- 本发明公开了一种油菜抗菌肽BnCRP1及其应用。本发明提供了一种油菜抗菌肽BnCRP1，其序列为SEQ ID NO.2所示。通过overlap PCR方法完成该基因的人工合成，将合成的抗菌肽基因克隆到pET30a/His...
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- 文献传递
- 一种油菜抗菌肽BnLTP1及其应用
- 本发明公开了一种油菜抗菌肽BnLTP1及其应用。本发明提供了一种油菜抗菌肽BnLTP1，其序列为SEQ ID NO.2所示。通过overlap PCR方法完成该基因的人工合成，将合成的抗菌肽基因克隆到pET30a/His...
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- 一种油菜抗菌肽BnPRP1及其应用
- 本发明公开了一种油菜抗菌肽BnPRP1及其应用。本发明提供了一种油菜抗菌肽BnPRP1，其序列为SEQ ID NO.2所示。通过overlap PCR方法完成该基因的人工合成，将合成的抗菌肽基因克隆到pET30a/His...
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- 甘蓝型油菜组织特异型P8启动子及其在制备转基因油菜中的应用
- 本发明涉及植物基因工程、植物保护和生物技术领域，公开了甘蓝型油菜组织特异型P8启动子及其在制备转基因油菜中的应用。本发明自中双11中克隆了启动子P8，该启动子能够特异性驱动基因在植物中高效表达，而在种子中不表达。利用P8...
- 黄军艳李艳刘胜毅程晓晖陈旺刘立江童超波曹慧慧白泽涛
- 萝卜抗菌肽基因Rs对菌核病的抗性被引量：2
- 2015年
- 为分析萝卜抗菌肽Rs是否对核盘菌具有抗性,人工合成了Rs基因,并利用水稻α-淀粉酶信号肽αAmy3SP引导目的基因在胞间隙和质体表达的作用特点,通过基因重组技术构建植物表达载体p35S-SP-Rs,同时构建了p35S-SP-GFP载体,基因枪轰击洋葱表皮。实验发现荧光信号主要存在于植物细胞的细胞壁和细胞膜之间,说明在35S和信号肽αAmy3SP的引导下GFP在细胞间隙中有效表达。采用浸花法将植物表达载体p35SSP-Rs转入拟南芥中,通过卡那霉素抗性筛选和PCR检测,获得35株Rs转基因阳性植株。qRT-PCR显示Rs基因在转基因拟南芥中的表达水平得到显著提高,而植株的生长发育未受影响。抗病鉴定结果显示,转基因植株对菌核病的抗性显著增强。结果说明通过在细胞间隙中高量表达抗菌肽Rs,在避免对细胞产生毒性的同时,显著抑制了核盘菌菌丝的扩展,从而达到抗病目的。
- 曹慧慧黄军艳柯涛于景印董彩华刘胜毅
- 关键词：拟南芥基因转化菌核病
- 一种油菜抗菌肽BnCRP1及其应用
- 本发明公开了一种油菜抗菌肽BnCRP1及其应用。本发明提供了一种油菜抗菌肽BnCRP1，其序列为SEQ ID NO.2所示。通过overlap PCR方法完成该基因的人工合成，将合成的抗菌肽基因克隆到pET30a/His...
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- 文献传递
- 油菜抗菌肽基因BnLTP1的克隆表达及活性被引量：2
- 2016年
- 为研究转脂蛋白(lipid transfer protein,LTP)作为抗菌肽在油菜防御反应中的作用,利用生物信息学的方法,从油菜中筛选获得了一个转脂蛋白类抗菌肽基因,命名为Bn LTP1。Bn LTP1基因长度为93bp,编码31个氨基酸残基。抗菌肽Bn LTP1分子量约为3.4k Da,其序列中的4个半胱氨酸形成两个分子内二硫键,对于稳定抗菌肽的结构起到至关重要的作用。通过overlap PCR的方法对该基因进行体外人工合成,并克隆到p ET30a/His-EDDIEGFP表达载体上进行体外原核表达。抑菌活性实验检测发现,Bn LTP1对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和酵母菌都有较强的抑菌活性;对植物病原真菌(核盘菌、灰霉菌和稻瘟病菌)等也具有抑菌活性。
- 曹慧慧董彩华于景印柯涛童超波黄军艳刘胜毅
- 关键词：油菜抗菌肽活性检测
- 一种油菜抗菌肽BnLTP1及其应用
- 本发明公开了一种油菜抗菌肽BnLTP1及其应用。本发明提供了一种油菜抗菌肽BnLTP1，其序列为SEQ ID NO.2所示。通过overlap PCR方法完成该基因的人工合成，将合成的抗菌肽基因克隆到pET30a/His...
- 刘胜毅董彩华曹慧慧黄军艳刘越英童超波程晓辉柯涛
- 文献传递
