方新初
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
- 供职机构：上海中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 生物化学教学中调节学生发散性思维促进创新能力的培养
- 2001年
- 方新初
- 关键词：发散性思维生物化学
- 整合蛋白α5,β1亚基的过表达对肝癌细胞粘附和迁移的影响被引量：15
- 2001年
- 目的 :研究整合蛋白α5 ,β1亚基的过表达与肝癌细胞粘附能力、迁移能力、集落形成能力、以及与肝癌细胞凋亡的关系。方法 :用已建立的单独转染α5 ,β1整合蛋白亚基的细胞株α5 3 772 1,β1 6 772 1和共转α5和 β1整合蛋白亚基的细胞株α5 β1 6 772 1;采用结晶紫染色法测定细胞的粘附能力、细胞的迁移能力 ;应用荧光染色法和流式细胞仪法测定细胞凋亡速度。结果 :转染后细胞与主要胞外基质蛋白 纤连蛋白的粘附分别为对照细胞的 1.39,1.34,1.7倍 ;与层粘连蛋白 (Ln)的粘附为对细胞的 1.3、2 .6、1.98倍 ;α5 ,β1整合蛋白转染株细胞在Fn上的迁移能力分别增加 1.2 2、0 .78、1.38倍。集落形成能力分别下降 38% ,35 %和 5 2 %。在无血清培养时 ,α5 ,β1整合蛋白转染株细胞的凋亡百分率分别提高 2 .4、0 .5 3、1.79倍。结论 :将α5 β1整合蛋白导入人肝癌细胞引起α5 β1整合蛋白过表达 ,可显著改变细胞的生长 ,粘附和迁移能力 ,从而导致体外集落形成能力明显下降 。
- 方新初苏剑敏周国飞王丽影陈伉丽查锡良
- 关键词：整合蛋白迁移Β1亚基基因过表达细胞粘附
- TNF-α对人肝癌细胞E-钙粘蛋白、α_5β_1整合蛋白及粘着斑激酶蛋白表达的影响
- 2001年
- 目的 研究应用肿瘤坏死因子 (TNF α)单独处理SMMC 772 1肝癌细胞不能引起肝癌细胞凋亡的原因。方法 采用免疫组化ABC法 ,结合图像分析仪及流式细胞术和Western印迹方法测定SMMC 772 1细胞表面E 钙粘蛋白 (E cadherin)、α5β1整合蛋白 (α5β1intergrin)、粘着斑激酶 (FAK )表达及粘着斑激酶磷酸化的程度。结果 在肿瘤坏死因子的作用下 ,E 钙粘蛋白的表达略有下降 ,但无明显差异。整合蛋白α5亚基的表达明显下降 ,而整合蛋白 β1亚基表达基本无变化。粘着斑激酶的蛋白表达随着肿瘤坏死因子浓度的增加略有下降 ,但变化不明显 ,粘着斑激酶的磷酸化程度无明显的变化。结论 单独用肿瘤坏死因子处理SMMC 772 1肝癌细胞后 ,并没有阻断由整合蛋白α5β1亚基及E 钙粘蛋白介导的 2条信号通路 ,且由胱冬肽酶 (caspases)介导的凋亡也没有被完全启动 ,不足以引起细胞的凋亡。
- 方新初苏剑敏方祎查锡良
- 关键词：肿瘤坏死因子肝癌粘着斑激酶E-钙粘蛋白
- 佛波酯促进NIH3T3细胞的铺展和聚焦粘附激酶的酪氨酸磷酸化被引量：3
- 1999年
- 100nmol/L佛波酯(12-O-tetradecanoylphobol-13-acetate,TPA)能明显促进NIH3T3细胞在纤连蛋白(Fn)上的铺展,该作用能分别被酪氨酸激酶(tyrosinekinase,TK)抑制剂4′,5,7-三羟基异黄酮(genistein)和蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)抑制剂calphostinC和神经鞘氨醇(sphingosine)所抑制.TPA作用于结合到Fn上的NIH3T3细胞,使其聚焦粘附激酶(focaladhe-sionkinase,FAK)的酪氨酸磷酸化程度较未处理细胞升高,于30min时达对照的204.0%,并存在浓度依赖性;该变化分别被上述抑制剂所拮抗;未经TPA处理的NIH3T3细胞和纤连蛋白结合诱导的FAK酪氨酸磷酸化亦分别被上述抑制剂所抑制.细胞松弛素D则无论TPA作用与否,都能完全阻断NIH3T3细胞的铺展和FAK的酪氨酸磷酸化.以上结果提示,TPA促进NIH3T3细胞在Fn上铺展的信号转导机制,与PKC的激活有关,进一步则可能通过影响FAK的酪氨酸磷酸化来实现,同时需要细胞骨架的参与;NIH3T3细胞和Fn结合并诱导FAK酪氨酸磷酸化的过程亦依赖于PKC和完整的细胞骨架.
- 涂立宇方新初查锡良
- 关键词：佛波酯蛋白激酶C
