周国飞
- 作品数:3 被引量:17H指数:2
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- RT-PCR法检测 SMMC-7721人肝癌细胞α5β1整合蛋白 mRNA的表达
- 2000年
- 整合蛋白α 5β 1是一类存在于细胞表面的细胞粘附分子,在肝癌的发生发展和演进中起着重要的作用。研究了快速定量检测整合蛋白α 5β 1 mRNA表达的 RT- PCR方法,结果表明:在 PCR反应体系中加入 25 ng到 200 ng mRNA的逆转录产物呈较好的线性关系,并以此为反应条件测定 pcDNA3-α 5, pcDNA3-β 1质粒共转染或单转染的α 5β 1.6- 7721, α 5.3- 7721, β 1.6- 7721细胞株 mRNA的表达,表明经 pcDNA3-α 5, pcDNA3-α 1质粒感染后人肝癌细胞株 SMMC7721细胞中整合蛋白α 5β 1的表达有较大幅度的提高,而且α5,β1亚基间可能存在相互的诱导作用。
- 周国飞查锡良
- 关键词:RT-PCR人肝癌细胞
- 过表达整合蛋白α5β1的SMMC7721细胞株的建立和鉴定被引量:2
- 1999年
- 构建过表达整合蛋白α5β1的SMMC7721细胞株。方法应用分子克隆技术和基因转染建立过表达整合蛋白α5β1的SMMC7721细胞株,应用RT-PCR及流式细胞术鉴定SMMC7721细胞表面整合蛋白α5β1的表达。结果获得过表达整合蛋白α5/β1的SMMC7721细胞株α5.3-7721,β1.6-7721,α5β1.6-7721细胞。结论整合蛋白α5β1基因转染后,SMMC7721细胞整合蛋白α5β1的RNA及蛋白质表达明显提高。
- 周国飞范勤冯晔葛昊平查锡良
- 关键词:整合蛋白基因转染SMMC7721细胞肝肿瘤
- 整合蛋白α5,β1亚基的过表达对肝癌细胞粘附和迁移的影响被引量:15
- 2001年
- 目的 :研究整合蛋白α5 ,β1亚基的过表达与肝癌细胞粘附能力、迁移能力、集落形成能力、以及与肝癌细胞凋亡的关系。方法 :用已建立的单独转染α5 ,β1整合蛋白亚基的细胞株α5 3 772 1,β1 6 772 1和共转α5和 β1整合蛋白亚基的细胞株α5 β1 6 772 1;采用结晶紫染色法测定细胞的粘附能力、细胞的迁移能力 ;应用荧光染色法和流式细胞仪法测定细胞凋亡速度。结果 :转染后细胞与主要胞外基质蛋白 纤连蛋白的粘附分别为对照细胞的 1.39,1.34,1.7倍 ;与层粘连蛋白 (Ln)的粘附为对细胞的 1.3、2 .6、1.98倍 ;α5 ,β1整合蛋白转染株细胞在Fn上的迁移能力分别增加 1.2 2、0 .78、1.38倍。集落形成能力分别下降 38% ,35 %和 5 2 %。在无血清培养时 ,α5 ,β1整合蛋白转染株细胞的凋亡百分率分别提高 2 .4、0 .5 3、1.79倍。结论 :将α5 β1整合蛋白导入人肝癌细胞引起α5 β1整合蛋白过表达 ,可显著改变细胞的生长 ,粘附和迁移能力 ,从而导致体外集落形成能力明显下降 。
- 方新初苏剑敏周国飞王丽影陈伉丽查锡良
- 关键词:整合蛋白迁移Β1亚基基因过表达细胞粘附