徐晋妉
- 作品数：13 被引量：77H指数：3
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省医学重点人才培养基金江苏省高校重点实验室开放研究课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 麻醉剂对Balb/c小鼠心功能检测的影响被引量：2
- 2008年
- 目的比较麻醉剂水合氯醛、氯胺酮和戊巴比妥钠对Balb/c小鼠心功能检测的影响。方法将36只雌性Balb/c小鼠(8～9周龄)随机分为4组,分别腹腔注射水合氯醛(A)组(4.5 mg/10g,10只)、氯胺酮(B)组(2 mg/10g,8只)、戊巴比妥钠(C)组(0.5 mg/10g,8只),或等量生理盐水(N)组(0.1 ml/10g,10只)。注射后每隔5 min行超声心动图检查一次,至25 min。动态观察心率(HR)、短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)和每分输出量(CO)。结果与N组相比,麻醉组HR、FS、EF及CO均显著降低(P<0.05),以B组最为显著(P<0.01)。A组与C组相比,各检查时间点心功能指标变异系数(CV)降低,25 min时降低>30%。结论在麻醉状态下,小鼠心功能降低。水合氯醛较戊巴比妥钠或氯胺酮更易获取稳定的心功能指标。
- 李滨滨曹怡徐晋妉吴红宁张寄南杨笛
- 关键词：心功能麻醉剂超声心动图BALB/C小鼠
- 曲美他嗪对慢性心力衰竭大鼠心肌能量代谢及超微结构的影响被引量：50
- 2008年
- 目的研究曲美他嗪对异丙肾上腺素诱导的慢性心力衰竭大鼠心肌能量代谢和超微结构的影响。方法72只雄性SD大鼠随机分为对照组(14只)和模型组(58只),模型制备采用皮下多点注射异丙肾上腺素法,4周后模型组大鼠死亡12只,再将存活的46只模型组大鼠随机分为未治疗组(M组,16只)、曲美他嗪治疗组(T组,15只)和培哚普利治疗组(P组,15只)。治疗5周后行二维心脏超声检查和病理形态学观察,并测定心肌组织能量代谢相关指标。结果与M组比较,T组大鼠LVEF、左心室短轴缩短率均提高;光镜和电镜下观察T组和P组心肌损伤程度较M组明显减轻。T组与P组大鼠心肌二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷、ATP/ADP和总腺苷含量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。T组大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATPase活性与对照组和P组比较差异无统计学意义。结论曲美他嗪能够改善心力衰竭大鼠心肌能量代谢、病理和超微结构,并且有改善大鼠心功能的趋势。
- 李兵陈相健朱舒舒赵士禄杨国平徐晋妉张寄南杨笛
- 关键词：充血性异丙肾上腺素曲美他嗪能量代谢
- 心肌肌钙蛋白I磷酸化及降解与肥厚型心肌病
- 2006年
- 目的:观察心肌肌钙蛋白I在肥厚型心肌病小鼠心肌组织中的磷酸化与降解作用。方法:实验于2005-03/2006-01在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所及南京医科大学动物中心SPF级动物房进行。取4周龄BALB/c雌鼠12只,随机分为模型组6只,正常对照组6只,适应性饲养1周后模型组小鼠转染带有EGFP报告基因的CTnIArg146Trp突变基因。饲养至20周龄时二维超声心动图检测证实模型组小鼠室间隔肥厚,断颈处死两组小鼠后,称取小鼠心脏质量(湿),心尖部心肌组织光镜病理学检查,小鼠心肌组织进行WesternBlotting检测重组蛋白、肌钙蛋白I的磷酸化及降解表达,GAPDH作为内参半定量。结果:12只小鼠进入结果分析。①模型组小鼠心脏明显增大,心脏质量(湿)/体质量比显著高于正常对照组(P<0.01);模型组小鼠心肌细胞肥大、排列紊乱、间质血管增生、少量炎性细胞浸润;两组血清肌钙蛋白I水平均正常(P>0.05)。②模型组小鼠心肌组织用抗EGFP单克隆抗体在Mr55000,24000检测到突变CTnI-EGFP及其降解片断表达。③模型组在Mr55000,30000,28000分别检测到磷酸化突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达,正常对照组在Mr30000见磷酸化肌钙蛋白I表达,模型组内源性磷酸化肌钙蛋白I表达明显高于对照组(1.18±0.15,0.97±0.15,P<0.05)。④去磷酸化抗肌钙蛋白I单克隆抗体在Mr55000,28000,检测到去磷酸化突变肌钙蛋白I-EGFP、内源性肌钙蛋白I降解片断表达,正常对照组未见去磷酸化肌钙蛋白I表达;用针对不同位点的抗肌钙蛋白I单克隆抗体3E3,2I-14,8I-7,MF4分别在Mr55000,30000,28000检测到突变CTnI-EGFP、内源性肌钙蛋白I及其降解片断表达,正常对照组在Mr30000,见肌钙蛋白I表达,未见降解片断。结论:AdcCTnIArg146Trp-EGFP突变基因在小鼠体内成功转染心肌组织并有明显表达及降解片断出现,小鼠心脏呈现明显室间隔肥厚;小鼠内�
- 朱春霞吴恒芳马继政朱舒舒陈相健卞智萍徐晋妉杨笛张寄南
- 关键词：肌钙蛋白I心肌
- 黄芪甲苷逆转血管紧张素Ⅱ引起的主动脉平滑肌细胞线粒体功能障碍被引量：5
- 2015年
- 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)引起的线粒体功能障碍的逆转作用。方法:培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),低血清培养液饥饿处理后分为24 h对照组、AngⅡ24 h处理组、48 h对照组、AngⅡ48 h处理组、As-Ⅳ治疗组。24 h对照组和AngⅡ24 h处理组使用线粒体呼吸功能检测仪进行线粒体呼吸功能检测,线粒体ATP含量检测;48 h对照组、AngⅡ48 h处理组和As-Ⅳ治疗组进行线粒体呼吸功能检测、线粒体ATP含量检测、电镜观察线粒体结构变化,共聚焦显微镜检测线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和Mn-SOD活性检测。结果:AngⅡ24 h处理组与24 h对照组相比,线粒体耗氧率(oxygen consumption rates,OCRs)出现下降,线粒体ATP含量减少(P≤0.05);AngⅡ48 h处理组与48 h对照组相比,线粒体OCRs显著下降,线粒体ATP含量明显减少(P<0.05),线粒体出现嵴模糊、肿胀、空泡,线粒体内ROS水平升高(P<0.05),Mn-SOD活性下降(P≤0.05);As-Ⅳ治疗组较AngⅡ48 h处理组线粒体OCRs和线粒体ATP含量明显回升(P<0.05),线粒体形态结构损伤减轻,线粒体内ROS水平降低(P<0.05),Mn-SOD活性升高(P≤0.05)。结论 :As-Ⅳ可以通过增强线粒体Mn-SOD活性,降低线粒体内ROS水平,进一步减轻线粒体结构损伤并提高线粒体OCRs和ATP含量,从而逆转AngⅡ引起的线粒体功能障碍。
- 路遥徐晋妉卞智萍吴恒芳顾春荣陈相健杨笛
- 关键词：黄芪甲苷线粒体功能障碍活性氧平滑肌细胞
- 游离与复合形式的心肌肌钙蛋白Ⅰ快速免疫测定法的建立被引量：1
- 2007年
- 目的制备结合游离与复合形式的心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)单克隆抗体(mAb),建立快速免疫测定法用于急性心肌梗死(AMI)的诊断。方法mAb通过提纯的人cTnI免疫小鼠和杂交瘤细胞融合技术制备,Western blotting和间接酶联免疫吸附技术(ELISA)鉴定cTnⅠ mAb的特异性。利用筛选的mAb建立双抗夹心模式的ELISA快速免疫测定法。结果制备的mAb仅和游离或复合形式的cTnI结合,与cTn C、cTn T无交叉反应。快速免疫测定法最低检测限1.2μg/L;阳性、阴性质控平均批内CV分别是11.3%和9.3%,批间CV分别是16.4%和12.2%。快速免疫测定法与定量ELISA法同步检测415例样本,符合率92.77%。检测43例AMI病人和42例正常人样本,其诊断敏感性和特异性分别是91.48%和95.45%。结论制备的抗cTnⅠ mAb可以和游离或复合形式的cTnⅠ结合,据此建立的cTnⅠ快速免疫法可方便地应用于AMI实验室诊断。
- 徐晋妉杨国平卞智萍朱兰兰陈相健杨笛张寄南
- 关键词：心肌肌钙蛋白I单克隆抗体心肌梗死
- 肥厚型心肌病心肌肌钙蛋白I R145W突变对大鼠心肌细胞钙调控的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨国人新的致肥厚型心肌病(HCM)心肌肌钙蛋白 I 基因突变(eTnI R145W)引起 HCM 发病的可能机制。方法采用定点突变技术在大鼠 cTnI cDNA 引入 R146W(相当于人R145W)突变,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)做报告基因,构建含野生型和突变型大鼠 cTnI cDNA 的重组腺病毒载体。Langendoff 逆流灌注系统分离成年大鼠心肌细胞,无血清法培养后重组腺病毒转染。Western blot 检测重组蛋白的表达,全膜片钳技术记录心肌细胞膜 L 型钙电流,Fura-2/AM 孵育后测定细胞内游离钙离子浓度和咖啡因诱导的肌浆网钙释放。结果 DNA 测序证实 R146W 突变成功引入大鼠 cTnI cDNA。新鲜分离的成年大鼠心肌细胞存活率达70%～80%,无血清培养7天后绝大部分能保持长杆状形态。重组腺病毒转染48h 后荧光显微镜下可观察到绿色荧光,cTnI 和绿色荧光蛋白单抗均能检测到重组蛋白。与野生型 cTnI 和正常对照组比较,突变型 cTnI 组心肌细胞膜 L 型钙电流峰值明显降低。Fura-2/AM 法测定细胞内游离钙离子浓度和咖啡因诱导的肌浆网钙释放,三组之间差异无统计学意义。结论含 R146W 突变的 cTnI 蛋白可能引起心肌细胞的电生理学重构,进一步研究可探讨肌丝对钙的敏感性及钙调节蛋白表达的改变。
- 吴恒芳陈相健杨笛卞智萍徐晋妉张寄南
- 关键词：突变腺病毒科L型钙通道
- C反应蛋白对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对小鼠主动脉内皮细胞胞内游离钙[Ca2+]i的作用。方法:原代培养小鼠主动脉内皮细胞,取生长状态良好的内皮细胞分为对照组(未加CRP)和不同浓度CRP处理组,25 min后观察各组内皮细胞[Ca2+]i。将内皮细胞用1μmol/L阿托伐他汀预处理30 min后,加入100 mg/L CRP,观察阿托伐他汀对CRP作用的影响。结果:与对照组相比,CRP可显著升高内皮细胞胞内[Ca2+]i并呈剂量依赖关系;阿托伐他汀可明显降低CRP引起的[Ca2+]i升高。结论:CRP可导致和加重小鼠主动脉内皮细胞的炎症反应,阿托伐他汀可部分拮抗CRP的致炎作用。
- 刘强张丹丹徐晋妉卞智萍吴恒芳顾春荣陈相健杨笛
- 关键词：C反应蛋白内皮细胞动脉粥样硬化
- 老龄cTnIR146W转基因小鼠心脏结构与功能的超声特征
- 2009年
- 目的探讨老龄cTnIR146W转基因小鼠心脏结构与功能。方法应用GEVivid7超声诊断仪,检测老龄cTnIR146W小鼠心脏结构与功能,包括室间隔厚度(IVS)、射血分数(EF)、短轴缩短率(FS),并用组织多普勒测量二尖瓣环收缩期峰值速度(S)等指标。结果老龄cTnIR146W基因型阳性(A)组小鼠IVS为(1.010±0.011)mm,显著高于基因型阴性(B)组小鼠的(0.911±0.007)mm(P<0.01);A组小鼠EF和FS分别为(71.534±2.488)%和(35.289±1.918)%,均显著低于B组小鼠的(77.737±1.990)%和(40.501±1.697)%(P<0.01);A组小鼠二尖瓣前叶、后叶瓣环收缩期峰值速度分别为(0.032±0.006)m/s和(0.031±0.010)m/s,均显著低于B组小鼠的(0.037±0.005)m/s和(0.039±0.006)m/s(P<0.05)。结论老龄cTnIR146W基因型阳性小鼠室间隔心肌增厚,左室收缩功能减退。超声心动图及组织多普勒可以评价转基因小鼠心脏结构与左室收缩功能。
- 曹怡朱舒舒李滨滨吴红宁徐晋妉张寄南杨笛
- 关键词：转基因小鼠超声心动图心功能
- 低剪切力下调PPAR信号通路参与BALB/c小鼠局部血管早期病变的实验研究被引量：2
- 2015年
- 目的 :研究局部血流低剪切力对BALB/c小鼠局部血管内皮细胞损伤及平滑肌细胞增殖的影响及其分子机制。方法:以左侧颈总动脉套管植入术造成局部血流剪切力变化。30只雄性BALB/c小鼠随机分为假手术组(n=10,普通饮食)、模型1组(n=10,套管植入术+普通饮食)、模型2组(n=10,套管植入术+高脂饮食)。术后喂养8周,监测小鼠体重,颈总动脉超声测量术后3 d和术后8周左、右颈总动脉血流峰值、血管舒张末内径及剪切力变化,检测血脂水平,HE染色观察颈总动脉病理形态学变化,测量血管中膜厚度,透射电镜观测颈总动脉内皮细胞、内皮下超微结构。芯片比较小鼠低剪切力区与自身正常剪切力区血管段基因表达谱变化,GO及KEGG信号通路分析与细胞迁移及增殖相关基因和信号通路的变化并行实时定量PCR(quantificational real time-polymerase chain reaction,QRT-PCR)验证。结果 :与假手术组相比,模型1组小鼠术后8周体重及血脂均无明显差异(P>0.05),模型2组小鼠术后8周体重增加明显,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均升高(P<0.05)。模型1、2组左侧颈总动脉套管近心端呈低剪切力变化,HE染色可见内皮细胞不同程度损伤,血管中膜增厚,无脂纹和斑块形成;电镜下可见有不同程度的内皮细胞空泡化形成,内皮下未见脂质空泡和脂滴堆积。合并高脂喂养加强了低剪切力导致的血管病变。芯片检测提示与自身正常剪切力血管段相比,低剪切力血管段标本呈现mi R-27a上调(>2倍),PPAR信号通路下调,MAPK、TGF-β、PI3K/Akt及NF-κB信号通路上调,包括TGFB2、END1、CTGF等促细胞迁移及(或)增殖的基因上调>2.0倍。QRT-PCR验证结果显示:相比于自身正常血管段,在低剪切力血管段中PPARG下调0.14倍,TGFB2和EDN1分别上调2.51倍和1.83倍,差异有统计学意义(P<0.05,n=4),与基因芯片结果
- 张友明杨笛吴恒芳卞智萍徐晋妉顾春荣陈相健王连生
- 关键词：内皮细胞损伤
- 芪参益气浸膏对异丙肾上腺素致大鼠慢性心力衰竭治疗作用研究被引量：11
- 2008年
- 目的:观察芪参益气浸膏对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠慢性心力衰竭(CHF)的治疗作用和对心肌能量代谢的影响方法:142只雄性SD大鼠随机分为对照组和CHF组,模型制备采用皮下多点注射ISO法,4周后CHF组再随机分为模型组和芪参益气浸膏高、中、低3个治疗组及曲美他嗪治疗组。平均治疗5周后进行心脏超声检查,并测定心肌组织中高能磷酸化合物的含量和肌浆网Ca2+依赖型ATP酶(SERCA)活性。结果:芪参益气浸膏显著提高心衰大鼠左室短轴缩短率(FS%)(36.35±3.80vs31.48±5.98,P<0.05),左室射血分数也有改善趋势,心肌ATP和总腺苷(TAN)含量比模型组分别提高了19%和31%,与正常对照组无统计学差异(P>0.05)。芪参益气浸膏组和曲美他嗪组心肌SERCA活性显著高于模型组。结论:芪参益气浸膏有改善ISO诱导慢性心衰大鼠心功能的趋势,这种作用可能与心肌能量代谢的改善有关。
- 李兵陈相健朱舒舒雍永宏赵士禄杨国平徐晋妉张寄南杨笛
- 关键词：慢性心力衰竭异丙肾上腺素能量代谢
