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张新建
作品数:
4
被引量:12
H指数:1
供职机构:
中国预防医学科学院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
张宝云
中国预防医学科学院
洪涛
中国预防医学科学院
李晶
中国预防医学科学院
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张宝云
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中华实验和临...
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1996
2篇
1995
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中国株白喉杆菌白喉毒素全基因编码序列的克隆
被引量:1
1995年
中国株白喉杆菌白喉毒素全基因编码序列的克隆张新建,李晶,张宝云,洪涛白喉毒素(Diphtheriatoxin,DT)是由携带β棒状噬菌体(Corynephageβ)的白喉棒状菌(corynebacteriumdiphtheriae)所产生的由535氨...
张新建
李晶
张宝云
洪涛
关键词:
白喉杆菌
白喉毒素
基因克隆
中国株白喉杆菌白喉毒素全基因编码序列的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
被引量:1
1995年
通过聚合酶链式反应(PCR)从一中国株中型白喉产毒杆菌的β噬菌体基因组中克隆出1065碱基对的白喉毒素全基因编码序列,将PCR产物直接克隆到pGEM-T/载体系统,经有关限制性内切酶消化,核苷酸序列分析表明,成功的克隆出白喉毒素全基因编码序列。利用上下游引物中导人的NdeI和BamHI位点,将白喉毒素基因插入原核表达载体PET-3a,从而构建出白喉毒素表达载体PET/DT。以BL21(DE3)为工程菌,用IPTG诱导T7启动子进行表达,经SDS-PAGE分析表明,在58000处可见一产物条带,表达量可达菌体蛋白的25%,经豚鼠毒性实验和Western-blot实验表明,表达产物与白喉杆菌分泌的毒素有相同的免疫学及生物学活性。
张新建
李晶
张宝云
洪涛
关键词:
白喉杆菌
白喉毒素
克隆
大肠杆菌
中国株白喉杆菌毒素全基因编码序列的克隆
被引量:1
1996年
本实验从我国自己分离的白喉杆菌噬菌体中成功地克隆了白喉毒素的全基因。此基因克隆是以自己设计合成的寡核苷酸为引物,以B棒状噬菌体DNA为模板,用热启动聚合酶链反应(PCR)一次扩增出全基因编码序列。该基因全长共1605个碱基对。将PCR产物直接克隆到pGEM-T/载体系统,经有关限制性内切酶消化,核苷酸序列分析并与已知序列比较,结果表明,所获白喉毒素基因的序列与已知序列基本一致,仅有个别碱基位点的差异。该研究为在我国开展白喉毒纱基因工程疫苗及其相关的融合蛋白的研究奠定了必备的基础。
张新建
李晶
张宝云
洪涛
关键词:
白喉杆菌
白喉毒素
核苷酸序列
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