张宝东
- 作品数：28 被引量：95H指数：6
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省卫生厅科研项目黑龙江省重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 骨髓间充质干细胞定向诱导成类软骨细胞的实验研究(英文)
- 2005年
- 背景:用组织工程的方法修复软骨缺损克服了传统方法的诸多不足。目的:体外诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞表型分化,探讨其作为软骨组织工程种子细胞的可行性。设计:完全随机设计,对照实验研究。单位:哈尔滨医科大学组胚教研室及神经生物教研室。材料:Wistar大鼠清洁级动物6只,雌雄不限,来源于哈尔滨医科大学()附属第二医院实验动物中心,实验动物生产许可证号:SCXK(黑)20020002。方法:取第二代成年大鼠骨髓间充质干细胞,实验组用无血清培养液诱导;对照组用含10%胎牛血清的培养液自然分化。Ⅱ型胶原免疫组化、甲苯胺蓝染色检测其分化情况。主要观察指标:软骨细胞的鉴定,不同诱导时间Ⅱ型胶原免疫组化阳性率的比较。结果:诱导后的MSCs具有软骨细胞的特点。结论:成年大鼠骨髓间充质干细胞在特定的培养基能向软骨细胞方向转化,作为软骨组织工程种子细胞具有可行性。
- 李冬梅金连弘张宇李呼伦刘慧雯张宝东
- 关键词：骨髓细胞干细胞软骨
- F9细胞的培养和全细胞抽提物获取方法的比较
- 2010年
- 目的对F9小鼠畸胎瘤细胞进行培养,探索理想的获取全细胞抽提物的方法。方法应用蛋白质抽提试剂盒、反复冻融循环和超声波裂解法进行F9全细胞抽提物的获取。结果通过蛋白质抽提试剂盒和反复细胞冻融循环的方法所获取的细胞抽提物渗透压和浓度偏低,而选用超声波裂解法所获取的细胞抽提物,无论从pH,渗透压,还是蛋白浓度方面分析均与理想值接近。结论选择超声波裂解法作为获取F9小鼠畸胎瘤全细胞抽提物的理想方法 。
- 张喜梅郭铁云王宁闫晓飞徐燕宁雷蕾金连弘张宝东池美花
- 关键词：畸胎瘤抽提物小鼠
- BHA和β-ME对表观修饰后的NIH/3T3细胞向神经方向诱导的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的通过联合应用表观修饰药物5-氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza-dC)和曲古抑菌素A(TrichstatinA,TSA)对NIH/3T3细胞进行重编程,应用β-羟基酸(betahydroxyacid,BHA)和β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol,β-ME)进一步诱导,以期表达与神经细胞密切相关的基因。方法应用流式细胞技术检测实验组(4.5μM5-aza-dC+0.35μMTSA+1mMβ-ME+200μMBHA作用后的NIH/3T3细胞)和对照组中NIH/3T3细胞的DNA甲基化水平。应用RT-PCR的方法检测Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4的表达,免疫细胞化学染色检测巢蛋白(nestin)和神经丝轻链(neurofilamentlightchain,NF-L)的表达情况。结果实验组NIH/3T3细胞DNA甲基化水平较对照组明显降低,细胞均呈现出Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4基因的阳性表达。经过BHA和β-ME诱导后,NIH/3T3细胞呈巢蛋白和神经丝轻链阳性。结论表观修饰后的细胞经诱导后可以呈现nestin和NF-L的阳性表达。
- 张喜梅张宝东郭铁云闫晓飞陈雅隽雷蕾金连弘
- 关键词：重编程表观遗传学
- 改良透射电镜方法观察小鼠ICSI胚胎核仁超微结构
- 2011年
- 小鼠植入前胚胎的发育过程中,核仁经历从简单到复杂、从致密结构到网状结构的变化。对核仁超微结构的观察有助于揭示早期胚胎发育过程中核仁结构的动态变化及其特定阶段的功能。但由于核仁结构微小,数目较少,并且在胚胎中只处于卵裂球细胞核的内部,难以定位,因而给核仁的超微结构观察带来很大的困难。本实验探索了透射电镜观察小鼠植入前胚胎核仁的方法:先用琼脂对小鼠胚胎进行预包埋,在经过常规的透射电镜样品制备流程后,将整个胚胎先切成半薄切片;经过甲苯胺蓝染色后,选取含核仁结构的切片进行重包埋;最后再对回收来的半薄切片进行超薄切片,醋酸铀染色后上电镜观察;最终成功获得小鼠胚胎植入前发育不同时期核仁清晰的透射电镜图像。
- 郑重胡丽丽文刚张宝东雷蕾
- 关键词：小鼠胚胎核仁透射电镜
- 大鼠胎脑移植体视学观察
- 1998年
- 采用细胞悬液移植法将１５天大鼠胚胎新皮质移植物植入成年大鼠大脑皮质内，在移植后４、１０、３０、６０、９０、１２０、２００天取材，对存活移植物进行光镜水平组织学定性和定量观察，分别对移植物体积和神经元体积及其数密度的变化进行追踪观察。结果表明移植物发育成熟，移植物与宿主脑建立了解剖学上的整合。
- 李晶宋铁军张萱张宝东魏国兴郭筠秋金连弘刘强
- 关键词：胎脑体视觉
- 衰老时大鼠大脑皮质枕叶神经肽Y阳性神经元的变化被引量：2
- 2001年
- 目的 研究衰老时神经肽Ｙ（ＮＰＹ）阳性神经元在大鼠大脑皮质枕叶中的变化情况。方法 选用青年组（１～２个月）、中年组（１１～１２个月）和老年组（２２～２４个月）三组Ｗｉｓｔａｒ大鼠，采用免疫组化ＳＡＢＣ法结合计算机图像分析技术进行研究。结果 ＮＰＹ阳性细胞属于非锥体形神经元，在枕叶皮质Ⅱ—Ⅵ层均有分布；比较三个年龄组阳性细胞的数量和平均截面积的变化，发现老年组与青年组及中年组相比，两项指标都显著减小（Ｐ＜０．０１），而青年组和中年组相比，两项指标都没有显著性变化（Ｐ＞０．０５）。结论 ＮＰＹ作为神经调节物，可能与大脑皮质枕叶功能的调节有关；随着衰老其阳性神经元的变化可能影响ＮＰＹ发挥正常的生理功能。
- 王荣华李秋明付宜鸣张宝东宋铁军
- 关键词：大脑皮质衰老免疫组织化学
- 胶原蛋白与胎脑神经细胞移植入脑缺血大鼠的形态学研究被引量：3
- 2003年
- 目的 观察胶原蛋白 (Collagen)与胎脑神经细胞 (FBN)联合培养 2天后 ,神经细胞与胶原蛋白的吸附情况 ;观察胶原蛋白与胎脑神经细胞 (CFBN)移植入脑缺血大鼠后神经细胞的生长情况。方法 取孕 14天的胎脑神经细胞接种在胶原蛋白上 ;制备大脑中动脉闭塞 (MCAO)模型 ;将CFBN植入到脑缺血大鼠中 ,将移植的大鼠分别在 2、6、10、30天进行光镜和电镜观察。结果 CFBN植入 2天后 ,机体产生轻微的免疫反应 ,部分中性粒细胞和淋巴细胞浸润 ,6天后免疫反应消失。HE和尼氏染色可见实验组植入神经细胞生长良好。结论 CFBN在脑缺血大鼠中生长良好 。
- 于宏伟刘慧雯田波张宝东魏国兴
- 关键词：胶原蛋白胎脑脑缺血形态学
- 食管壁内淋巴管的微细分布
- 2000年
- 用半薄切片光镜观察和超薄切片电镜观察 ,研究了家兔食管壁内淋巴管的微细分布及各层淋巴管的分布密度。结果显示 :食管粘膜层固有膜内有毛细淋巴管 ,粘膜下层存在有毛细淋巴管及淋巴管。肌束间见有淋巴管 ,但肌束内未见淋巴管 ,外膜存有淋巴管。本研究作了淋巴管的检出率 :粘膜层占 15 % ,粘膜下层占 2 4% ,肌层占 40 % ,外膜占 2 0 %。
- 钟淑琦张雅芳徐玉东海力斯张云芳张宝东
- 关键词：食管淋巴管微细分布
- 一氧化氮合酶在不同年龄大鼠睾丸中的表达被引量：1
- 2005年
- 目的 研究一氧化氮合酶(NOS)在不同年龄大鼠睾丸中的表达情况,探讨NO在睾丸生殖功能中的作用。方法 将健康雄性Wistar大鼠按月龄分为成年组和未成年组,4 %多聚甲醛灌流固定,取大鼠睾丸,常规石蜡切片,免疫组化SABC法检测NOS在不同年龄大鼠睾丸中的表达。结果 成年组大鼠睾丸间质细胞和间质血管中均有nNOS、iNOS和eNOS阳性物质表达,生精小管周围肌样细胞和腔面精子可见nNOS阳性物质;未成年组大鼠睾丸间质血管中偶见iNOS和eNOS阳性物质表达。结论 3种NOS在睾丸中均有表达,但定位不同,且与年龄相关。
- 杨志文钟淑琦张宝东池美花
- 关键词：一氧化氮合酶睾丸
- 体外分离培养的人尿道黏膜上皮细胞的生物学特性
- 2009年
- 目的探讨体外分离培养的人尿道黏膜上皮细胞的生物学特性,为构建组织工程尿道提供种子细胞。方法取尿道下裂患者尿道黏膜,经消化离心后,接种于培养基中连续培养,观察细胞形态变化及生长、增殖过程,并绘制生长曲线;对细胞进行常规冻存和复苏;应用免疫细胞化学技术进行角蛋白染色的鉴定。结果体外培养的细胞呈铺路石样外观,可传至8代;可进行常规冻存和复苏;角蛋白免疫细胞化学染色呈阳性。结论人尿道黏膜上皮细胞的体外连续培养及扩增技术被建立,本实验培养的细胞可用于构建组织工程尿道。
- 李秋明付宜鸣张宝东申景岭杨志文刘慧雯金连弘
- 关键词：尿道上皮细胞体外培养
