张媛 作品数:27 被引量:22 H指数:3 供职机构: 北华大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 理学 生物学 更多>>
重组小鼠14-3-3蛋白theta亚型的构建 2009年 目的克隆编码14—3—3蛋白质θ亚型的cDNA,制备该蛋白质的基因重组蛋白质.方法参照小鼠14—3-3蛋白质θ亚型mRNA结构设计引物,以小鼠脑总RNA为模板,RT—PCR法克隆编码14—3—3蛋白质θ亚型的cDNA,插入原核表达质粒pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21(DE3)使其表达谷胱甘肽S转移酶(GST)为标签的融合蛋白质,以凝血酶定点分解融合蛋白并采用GlutathioneSepharose4B亲和层析纯化目的蛋白.结果RT—PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳分离可见约800bp条带,序列分析表明重组质粒pGEX-1433theta中的插入子为738bp,编码245个氨基酸,其核苷酸及氨基酸序列与PubmedNM-011739展示的结果一致.重组质粒pGEX-1433theta在BL21(DE3)中的表达量随IPTG诱导时间递增,融合蛋白质为可溶性组分.亲和层析纯化的14—3—3theta在SDS.PAGE上表现为单一条带,表观相对分子质量为30ku.每L培养菌液可收获4mg基因重组型小鼠14—3—3theta.结论克隆了编码小鼠14—3-3蛋白质θ亚型的cDNA,制备了高纯度基因重组型小鼠14—3—3theta,为进行单克隆抗体的制备奠定了坚实的基础. 张雷 王尔孚 倪红霞 张媛 陈立梅关键词:原核表达载体 基因重组蛋白 影响金针菇多酚氧化酶活性因素研究 被引量:4 2009年 目的从金针菇中提取多酚氧化酶,并对其特性进行研究.方法采用分光光度法研究温度、pH、抑制剂对金针菇多酚氧化酶活力的影响.结果以邻苯二酚为底物,金针菇多酚氧化酶(Polyphenoloxidase from Flammulina velutipes,FVPPO)的酶促褐变产物在可见光波长295nm处有最大吸收峰;在pH为5.0—6.0范围内酶活力较大;在20—40℃的范围内随着温度升高,酶活性逐渐增强;在40℃时PPO活性最强;抗坏血酸、柠檬酸、EDTA-2Na对金针菇多酚氧化酶的活性都有抑制作用,在同浓度下,对金针菇PPO活性的抑制效果次序为抗坏血酸〉柠檬酸〉EDTA-2Na.结论金针菇多酚氧化酶的最适pH为6.0,最适温度为40℃,抗坏血酸对金针菇PPO活性的抑制作用最强. 朱梅 王相春 张媛关键词:金针菇 多酚氧化酶 影响因素 n阶行列式的解法技巧 2016年 n阶行列式的计算是高等代数和线性代数中的基本问题,也是重要问题.现整理出几种常用的解题方法,促进学习. 张媛 王一迪关键词:降阶法 递推法 范德蒙行列式 组织学理论与实习一体化教学模式的探讨与实践 被引量:3 2008年 周艳 李淑波 张媛 潘安娜 鞠文博 李大宁关键词:教学模式 组织学 医学基础课程 微细结构 传统教学 知识结构 成人自体血清体外扩增培养骨髓间充质干细胞的生物学特性分析 被引量:2 2007年 目的:为避免种子细胞培养过程中应用异体或异种血清的排斥及伦理问题,制备成人自体血清体外扩增培养骨髓间充质干细胞,观察其增殖及生长特征。方法:实验于2005-01/2006-01在北华大学医学院细胞生物实验室完成。①细胞来源:选取北华大学医学院附属医院收治的行骨髓干细胞保健治疗的成年志愿者3名,25~30岁,对本实验均知情同意。②实验方法:空腹无菌采集志愿者外周静脉血40mL,4℃静置4h,37℃静置4h,500g离心30min,吸取上清,即自体血清。从骨髓血中提取间充质干细胞,利用DMEM/F12培养基添加自体血清进行黏附培养和扩增。原代记为P1,按1∶3进行传代接种,第2代记为P2,以此类推。每次传代培养的细胞接种密度严格控制与原代培养接种密度相同的水平。③实验评估:倒置光学显微镜下观察骨髓间充质干细胞生长和形态变化,计数和MTT法观察原代和传代培养的增殖及生长特征,免疫组化法分析骨髓间充质干细胞纯度。结果:①原代及传代培养的成人骨髓间充质干细胞的光镜观察:原代培养24h后可见贴壁细胞,部分细胞有伪足伸展,第3天换液时有散在克隆生长,第5天呈克隆式增殖,10~12d可达90%细胞融合,基本铺满孔底面,呈骨髓间充质干细胞特征性的旋涡状生长,排列有方向性,旋涡中心细胞呈多层分布,细胞界限不清,细胞形态多呈梭形。传代细胞的生长较原代快,4h内即发现有贴壁细胞,24h内完全贴壁并伸展,第6~8天即可达到80%以上融合。②成人骨髓间充质干细胞的生长曲线分析:原代接种后2~6d为生长潜伏期,第7天开始形成大小不一的多个细胞克隆,至第9天细胞克隆进一步扩大,细胞数目呈指数级递增,为对数增殖期;第10~12天细胞生长进入平台期,原代培养结束。传至5代内的细胞生长旺盛,生长特性基本与第1代一致。③成人骨髓间充质干细胞免疫组化鉴定结果:P0� 张媛 陈立梅 张雷 倪红霞关键词:骨髓 间充质干细胞 体外培养 自体动脉注射法制备大鼠脑尾状核出血动物模型 2006年 目的通过立体定向法制备大鼠自体动脉血脑出血动物模型,观察模型制备后大鼠的行为学改变及病理学变化的规律.方法取SD大鼠20只。随机分成实验组15只和对照组5只.实验组用肝素化100μL微量进样器抽取尾动脉血55μL,用立体定向仪将微量注射器针进至尾状核中心。将血液分两次缓慢注入尾状核内(注射速度8μL/min),假手术组完成立体定向术及尾动脉抽血,但不注血.结果所有动物均成活,出血6h后出现行为异常,组织形态学改变显著、结论此方法成本低,成活率高。操作简单。对肢体运动功能损伤小,与临床脑出血相似. 张媛 倪红霞 陈立梅关键词:脑出血 高中数学课堂的有效教学 2016年 在新的教育形式和理念下,结合当下高中数学课堂的现状,就如何发挥学生主体地位以及教师主导作用,以及提升高中数学课堂教学的有效性行为进行了简单的探讨. 张媛 吕洪斌关键词:高中数学 一类二分块下的α-对角占优矩阵 被引量:1 2017年 利用矩阵分析法,研究了基于二分块的一类矩阵的对角占优性,给出了此类矩阵为H-矩阵的充分条件,讨论了此对角占优矩阵类与其他对角占优矩阵类的关系. 张媛 张秀玉 吕洪斌关键词:Α-对角占优矩阵 分块矩阵 H-矩阵 一种动物医学实验专用台 本实用新型提供了一种动物医学实验专用台,主要包括台面、台脚,台面四周设有护栏,台面一侧设有弹性照明灯,台面中间区域为凹槽形内腔,台面一端的护栏上设有弧形凹槽状的头部支架,台面一侧铰接有钢丝网,台面两侧护栏上还设有角度调节... 倪红霞 张冰 刘楠楠 陈立梅 张雷 张媛文献传递 一种治疗复发性口腔溃疡的中药配方及其制备方法 本发明公开了一种治疗复发性口腔溃疡的中药配方,由以下重量份的原料组成:四季青20‑30份、芦根10‑20份、月季花5‑10份、荷叶10‑20份、地耳草10‑20份、石斛10‑20份、苦地胆10‑20份、山豆根5‑12份、... 李淑波 李开 张媛 黄卓然 聚欣达 张馨予 刘絮 卞良奇 石鑫 孙培宇文献传递