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piggyBac转座子介导的转基因家蚕丝腺生物反应器研究进展被引量：5: 2011年; 综述了基于piggyBac转座子的转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白的3个关键环节:(1)外源目的基因高效插入家蚕基因组;(2)转基因家蚕的高效、快捷的检测;(3)具有生物活性的外源目的蛋白的高效表达和纯化。同时介绍了有关转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白的研究进展,为更好地利用转基因家蚕丝腺生物反应器表达外源蛋白提供了参考。; 钟伯雄危浩庄兰芳; 关键词：家蚕 PIGGYBAC 转基因

家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法: 本发明公开了一种家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法。是先构建家蚕合成分泌溶菌酶的载体pBSer1hLYZ-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这种质粒与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕受精卵内，依靠p...; 钟伯雄危浩庄兰芳

家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法: 本发明公开了一种家蚕中部丝腺细胞合成分泌溶菌酶的方法。是先构建家蚕合成分泌溶菌酶的载体pBSer1hLYZ-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这种质粒与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕受精卵内，依靠p...; 钟伯雄危浩庄兰芳; 文献传递

家蚕hsp70启动子的克隆及功能研究被引量：6: 2011年; 该研究通过PCR的方法克隆得到家蚕热激蛋白70基因(Bombyx mori hsp70)的5'侧翼的两个长度分别为538 bp和305 bp的序列hsp70-538和hsp70-305。生物信息分析结果表明这两段序列在TATA序列的上游存在保守的热激元件HSE(heat shock element)CTnGAAnnTTCnAG。采用双荧光报告基因技术研究表明这两段序列在BmN细胞中都表现出热激活性,转基因家蚕实验证明hsp70-305在家蚕个体中也具有热激活性,可以认为这两个片段具有hsp70热激启动子特性。; 庄兰芳危浩林健荣钟伯雄; 关键词：热激家蚕

piggyBac转座子介导的转基因叉尾斗鱼的构建被引量：2: 2012年; 为探讨piggyBac转座子在鱼类动物中应用的可能性,以包含家蚕(Bombyx mori)肌动蛋白3启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protein,EGFP)基因的piggyBac质粒为载体,以及一个包含piggyBac转座酶的辅助质粒,采用显微注射的方法将其导入叉尾斗鱼(Macropodusopercularis)受精卵中,利用PCR技术证实了piggyBac转座子能够介导EGFP基因进入叉尾斗鱼基因组,并能够稳定遗传到下一代,符合孟德尔遗传规律。EGFP基因遗传到G1代的阳性鱼占交配鱼比率,即外源基因整合率为12.30%。实验证明,piggyBac质粒有可能成为水产动物转基因实验的新型载体。; 高强杨国梁钟伯雄王军毅陈雪峰危浩庄兰芳叶少群杨浩; 关键词：叉尾斗鱼 PIGGYBAC转座子转基因鱼显微注射

A3启动子缺陷piggyBac转座子在家蚕中的转基因研究被引量：4: 2008年; 构建了A3启动子缺陷piggyBac转座质粒,以增强型绿色荧光蛋白基因EGFP为标记基因对家蚕品种N is-tari进行转基因实验,发现其具有较高的表达EGFP的转化效率,G0代中EGFP阳性蛾区检出占总注射蚕卵的比率达0.618%,且EGFP的表达呈组织特异性。PCR实验分析也证实了标记基因的成功导入。该实验中标记基因及转基因阳性个体均易于检出,为启动子缺陷转基因方法在家蚕组织特异性启动子筛选研究上的应用奠定了基础。; 杨惠娟庄兰芳范伟兰天云丁农陆长德钟伯雄; 关键词：家蚕转基因 PIGGYBAC转座子

家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法: 本发明公开了一种家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法。是先构建家蚕合成分泌狂犬病病毒糖蛋白RVGP的载体pBSer1RVGP-A3EGFP质粒和pBFibLRVGP-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将...; 钟伯雄周继勇庄兰芳阮系真危浩颜焰

重组AcNPV载体携带的外源基因在家蚕中的动态表达被引量：1: 2008年; 重组AcNPV作为用于昆虫培养细胞的真核表达载体,感染部分家蚕品种,感染症状较BmNPV轻,可以存活较长时间,且不会经口传染,因此将它用作一种瞬时表达载体来研究基因的功能及其表达调控具有一定的优越性。该实验构建了分别由A3和Polh启动子控制的分泌型萤火虫荧光素酶为报告基因的供体质粒,通过"Bac-to-Bac"原理得到重组杆状病毒的bacmid,转染Sf9细胞获得具有感染性的病毒。用Real-time PCR方法测定其拷贝数后,注射五龄起蚕和蛹。通过测定血液中荧光素酶活性,比较了由A3和Polh启动子分别控制的外源蛋白在家蚕中的动态表达。结果表明A3启动子控制的外源基因进入家蚕体内后在前24 h表达高于Polh启动子,Polh启动子控制的外源基因则在病毒注射48 h后逐渐高于A3启动子。蛹血中的动态表达情况与蚕血中情况基本一致。文章还应用Real-time定量RT-PCR对于A3和Polh启动子的不同表达动态进行了分析。; 庄兰芳张翌张惠展陆长德; 关键词：家蚕苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒

家蚕转基因载体元件的结构优化及在基因功能分析中的应用研究: 家蚕既是支撑蚕丝产业的生物基础，又是鳞翅目昆虫研究的典型模式种类，同时，也是开发新一代生物反应器和新型昆虫产业的材料。近几年来对其的科学研究所取得的成果具有较高的学术价值，代表了国际同领域的先进水平，特别是在遗传连锁图谱...; 庄兰芳; 关键词：家蚕转基因技术转座酶; 文献传递

利用A3启动子缺陷piggyBac转座子创制转基因家蚕方法: 本发明公开了一种利用A3启动子缺陷piggyBac转座子创制转基因家蚕方法。是先切除带有荧光标志基因的piggyBac转座子中A3启动子，利用转基因技术将这种启动子缺陷转座子插入家蚕功能基因的启动子后面，借助功能基因启动...; 杨惠娟钟伯雄陆长德庄兰芳范伟兰天云丁农; 文献传递

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庄兰芳