宋革 作品数:31 被引量:95 H指数:6 供职机构: 广东省计划生育科学技术研究所 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 国家自然科学基金 广东省人口和计划生育委员会科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 一般工业技术 更多>>
梯度密度离心中离心力、时间和梯度液体积对精子回收率和受精潜能的影响 被引量:3 2016年 目的探究梯度密度离心中离心力、时间和梯度液体积对前向运动精子回收率和受精潜能的影响。方法实验分新鲜精液组和冷冻精液组各30例。每例精液充分混匀后,平均分为4份,进行下列各组实验:(1)组1为80%和40%的梯度离心液各0.5m L,300×g,离心20min;(2)组2为80%和40%的梯度离心液各1.0m L,300×g,离心20min;(3)组3为80%和40%的梯度离心液各1.0m L,1 200×g,离心5min;(4)组4为80%和40%的梯度离心液各0.5m L,1 200×g,离心5min。分别检测处理前后每组精液浓度、前向运动精子百分率、正常形态率以及精子DNA碎片率,以分析离心力、时间和梯度液体积对精子前向运动精子回收率和受精潜能的影响。结果无论是新鲜精液,还是冷冻精液,组1、组3和组4前向运动精子的回收率和精子的正常形态率以及精子的DNA碎片率与组2比较无明显差异(P>0.05)。结论将现行的300×g,离心20min的离心方法,改为1 200×g,离心5min,梯度离心液体积从1.0mL降低至0.5mL,并不显著影响精子正常形态率、前向运动精子的回收率和精子的受精潜能,是可行的。 张清健 宋革 祝晓丽 谭玉梅 郑炜炜关键词:精子 受精 吸烟和饮酒对正常生育男性精液质量的影响 目的 探讨吸烟、饮酒等行为因素对正常生育男性精液质量的影响.方法 招募年龄在20-45岁之间,无避孕,同居生活12个月内使配偶获得妊娠的男性,填写问卷、体检,按照WHO手册第五版方法进行精液分析.通过对吸烟组与非吸烟组,... 唐运革 周雨 唐立新 王奇玲 宋革 姜彦嘉 邓顺美 江芳关键词:精液质量 吸烟 饮酒 不同来源精子对卵胞浆内单精子注射周期中胚胎发育潜能的影响 刘善文 谭玉梅 郑炜炜 祝晓丽 宋革小鼠胚胎培养在新建辅助生殖实验室质量控制中的作用 被引量:5 2015年 目的利用鼠胚试验(mouse embryo assay,MEA)检测新建辅助生殖实验室培养系统是否适合胚胎培养。方法收集小鼠合子随机放入6个不同的培养箱中,观察各个箱中的囊胚形成情况;利用小鼠配子体外授精法将取出的卵子和精子体外授精,分别用COOK和Vitrolife两个系列的培养液处理配子、完成授精和胚胎培养,分别观察囊胚形成情况。结果共获得合子161枚,放入6个培养箱中的囊胚形成率分别为87.50%、100.00%、83.87%、95.00%、88.57%、92.11%。共获得51枚卵子,用COOK系列和Vitrolife的培养液授精后胚胎培养的囊胚形成率分别为87.50%和94.44%。结论利用收集小鼠合子和小鼠配子体外授精的胚胎培养技术对新建IVF实验室培养环境、培养系统及技术员水平评估,检测的结果符合各项质控标准。 谭玉梅 宋革 祝晓丽 郑炜炜 张清健 钟安关键词:小鼠 体外授精 胚胎培养 供精人工授精10690个周期妊娠结局的多因素分析 被引量:18 2017年 目的分析探讨多种因素对供精人工授精(AID)妊娠结局的影响。方法回顾性分析2013年1月-2015年12月期间在本中心治疗的10 690个AID周期,对女方年龄、不孕年限、治疗方案、输卵管通畅程度、子宫内膜厚度、每周期排卵数、每周期A I D授精次数、精子冻融复苏后浓度、精子冻融复苏后活动率、精子冻融复苏后前向运动精子总数与术后妊娠结局进行χ~2和多因素Logistic回归分析。结果年龄≤30岁妇女的妊娠机会是年龄>35岁者的1.934倍(OR=1.934,P<0.001)、年龄31~35岁妇女的妊娠机会是>35岁者的1.511倍(OR=1.511,P<0.001),自然周期妇女妊娠机会是促排卵周期者的1.307倍(OR=1.307,P<0.001),每周期AID授精2次的妇女妊娠机会是1次组的1.486倍(OR=1.486,P=0.001),每周期AID授精3次的妇女妊娠机会是1次组的1.338倍(OR=1.338,P=0.020),每周期排卵2个的妇女妊娠机会是排1个卵组的1.362倍(OR=1.362,P=0.001),每周期排卵3个的妇女妊娠机会是排卵1个组的1.499倍(OR=1.499,P=0.004),精子冻融复苏后活动率>60%的妇女妊娠机会是≤60%组的1.211倍(OR=1.211,P=0.038),精子冻融复苏后前向运动精子总数≥35×10~6的妇女妊娠机会是≤25×10~6组的1.319倍(OR=1.319,P=0.011)。结论女方年龄≤35岁、每周期排卵2~3个、每周期AID授精2~3次、精子冻融复苏后活动率>60%和精子冻融复苏后前向运动精子总数≥35×10~6能提高授精妇女的妊娠几率;在患者无明显排卵障碍的情况下,应首选自然周期。 张清健 宋革 钟小英 陆艳华 郑炜炜 祝晓丽 谭玉梅 黎敏茹 詹泽虎 张志健关键词:妊娠 LOGISTIC回归 恒河猴骨髓源性神经样细胞分化分子机制的基础研究 2011年 目的探讨神经发育音猬因子(SHH)诱导恒河猴骨髓间质细胞(BMSCs)向神经样细胞分化的丝裂原活化蛋白激酶信号分子变化。方法密度梯度离心法分离培养恒河猴骨髓干细胞,应用Western—blot方法检测SHH诱导细胞内信号蛋白变化,免疫组化方法观察丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂对细胞诱导过程的影响。结果SHH诱导恒河猴BMSCs分化为神经样细胞分化过程,细胞内激酶p38在加入诱导液5min后即被激活,随着时间的延长持续升高,1h达到最高峰,诱导前、后p38的总量未见变化;而磷酸化的ERKI/2被抑制,5min时即开始减少,在2h内逐渐降低,诱导前、后ERKI/2的总量未见变化。结论MAPK激酶系统参与SHH诱导恒河猴MSCs分化为神经样细胞分化过程,p38被激活,而ERK被抑制。 宋革 张阳 郑炜炜 江儒章 刘炳乾 孙雪融关键词:音猬因子 丝裂原活化蛋白激酶 恒河猴 骨髓间充质细胞 精子库供精导致近亲婚配的概率模型与统计分析方法 被引量:1 2015年 根据精子库供精生育子代婚配过程的系统性分析,采用大样本理论建立了供精导致近亲婚育概率模型与统计分析方法,利用蒙特卡洛模拟验证了该模型与方法的有效性,即:通过估计供精者子代数量及其生活区域人口规模,可计算供精导致近亲婚育的最大风险概率,并分析出主要影响因素,为分区域设置精子库和评估单个捐精者最大供精数的伦理风险提供新方法。 谭玉梅 范立青 宋革关键词:辅助生殖技术 近亲婚配 Hoechst33342、BrdU和GFP示踪恒河猴皮肤干细胞的实验研究 被引量:12 2007年 目的:通过采用Hoechst33342、5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)和绿色荧光蛋白(GFP)3种不同的方法标记恒河猴皮肤干细胞,探索最有效、便利的干细胞示踪方法。方法:体外培养纯化恒河猴皮肤干细胞后,分别用Hoechst33342、BrdU以及GFP基因转染3种方法标记皮肤干细胞。Hoechst33342和GFP标记皮肤干细胞直接通过荧光显微镜进行鉴定,BrdU标记后的细胞通过细胞免疫化学鉴定,均用流式细胞仪检测标记率。对绿色荧光蛋白标记的干细胞利用显微注射仪挑选阳性细胞进行纯化。结果:3种标记方法对细胞均未显示明显毒性。其中,Hoechst33342的标记率最高(100%),但随时间延长荧光有衰减;BrdU标记细胞较稳定,实验期间细胞内BrdU无明显减少,标记率较高(75.81%);GFP标记最稳定,但标记率低(7.5%),显微注射仪挑选阳性细胞,阳性率高,无明显细胞损伤。结论:GFP基因转染皮肤干细胞,是一种明确、有效的标记细胞的方法,对成体干细胞的示踪有重要意义,用显微注射仪挑选细胞阳性率高,细胞损伤小,利于进一步实验。 卢蓉 张新春 黄丹平 宋革 黄冰 高楠 王智崇 葛坚关键词:恒河猴 干细胞 高龄妇女供精人授助孕后子代安全性的随访分析 2019年 目的研究高龄妇女供精人授助孕后子代安全性。方法本研究使用随机数字表法选择2007-06/2014-06在我中心行供精人授助孕(AID)的高龄(>35周岁)妊娠妇女196例纳入研究组,并选择同期我中心行供精人授助孕的≤35周岁妊娠妇女120例作为对照组,采用SPSS软件进行统计分析,以a=0.05作为检验水准,随访时间为2年,观察两组妊娠情况与子代安全。结果两组患者AID手术时基本情况均无明显差异(t=-1.668、-0.662、-1.173,=0.096、0.508、0.242);两组新生儿在2周岁体重、走路时间、说话时间、2周岁身高、2周岁MDI、2周岁PDI上无明显差异(t=0.294、0.610、0.575、1.009、0.000、0.478,P=0.769、0.543、0.566、0.314、1.000、0.633),P>0.05;研究组妊娠相关并发症11.73%高于对照组4.17%,手术分娩率19.90%高于对照组6.67%(χ~2=3.905、7.597,P=0.048、0.006),差异有统计学意义,P<0.05。结论随着年龄的增长,高龄妇女供精助孕整体情况较差,子代安全性较低,临床意见早期妊娠,提高新生儿健康水平,值得应用。 李秋华 周泽荣 祝晓丽 谭颖 钟小英 姜荣华 宋革关键词:高龄妇女 随访 恒河猴皮肤干细胞的体外培养纯化与鉴定 2007年 探索恒河猴皮肤干细胞的体外培养及纯化条件,为进一步的研究奠定基础.通过组织块培养法和消化培养法在体外培养恒河猴表皮细胞,然后用Ⅳ型胶原吸附法吸附20min,获得快吸附细胞.对快吸附细胞进行克隆培养,并进行免疫细胞化学双标染色、RT-PCR鉴定β1整合素和角蛋白15的表达,用流式细胞仪鉴定纯化前后的细胞中β1整合素和角蛋白15的阳性细胞比例,并通过透射电镜观察细胞的超微结构.组织块培养法和消化培养法均可获得表皮细胞,Ⅳ型胶原纯化后的细胞胞体较小,饱满,核/浆比例大,细胞镶嵌状排列.细胞克隆分析显示,细胞全克隆生长率高.细胞免疫荧光显示,分选后的细胞显示β1整合素和角蛋白15阳性.RT-PCR检查呈现β1整合素和角蛋白15的特异性片段.流式细胞仪检查显示,纯化前的细胞中角蛋白15阳性细胞占总细胞中的比例为8%,β1整合素阳性细胞的比例为10.7%;纯化后,角蛋白15阳性细胞的比例为89.4%,β1整合素阳性细胞的比例为88.5%.通过组织块培养法和消化培养法均可培养获得活性良好的表皮细胞,Ⅳ型胶原吸附法是一种简便、有效的皮肤干细胞分离方法,可以为进一步的眼表上皮替代重建眼表提供足量的高纯度的干细胞建立可靠的物质基础. 卢蓉 张新春 黄丹平 黄冰 宋革 高楠 王智崇 彭展 葛坚关键词:干细胞 纯化