郑炜炜 作品数:22 被引量:70 H指数:5 供职机构: 广东省计划生育科学技术研究所 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 国家自然科学基金 广东省人口和计划生育委员会科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
密度梯度离心联合上游法的精液处理在供精体外受精胚胎移植中的应用 被引量:3 2015年 目的:观察供精体外受精-胚胎移植术(D-IVF)中采用密度梯度离心法联合上游法处理精液后的胚胎情况。方法:回顾本院2013年1月-2014年7月D-IVF 135个周期,观察冷冻精液复苏后经采用密度梯度离心法联合上游法处理后精子总活动率、前向运动精子活动率等精液情况,以及受精以后的受精率、卵裂率、临床妊娠率,对照组为同期46个因丈夫梗阻性无精行ICSI的周期。结果:处理后精子总活动率、前向运动精子活动率均大大提高,但是精子密度却大大下降,处理前后比较差异均有统计学意义(P<0.05);受精以后的实验室资料和对照组比较,各项参数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:密度梯度离心法联合上游法的精液处理方法在D-IVF中是一种稳定可行的方法。 谭玉梅 宋革 祝晓丽 郑炜炜关键词:体外受精-胚胎移植 冷冻精液 IVIG被动免疫治疗对原因不明复发性自然流产患者细胞免疫功能的影响——附56例报告 被引量:4 2012年 目的:探讨静脉滴注免疫球蛋白(IVIG)被动免疫治疗对原因不明复发性自然流产(URSA)患者机体细胞免疫的影响。方法:选择71例URSA患者,根据患者意愿分为IVIG治疗组56例和对照组15例,IVIG治疗组56例接受国产IVIG 10 g,每3周1次,妊娠后每月接受国产IVIG 1次,直至妊娠26~30周。对照组则未予IVIG治疗。观察两组妊娠结局。流式细胞仪分析IVIG治疗前后妊娠成功者和失败者体内IFN-γ+CD4+T细胞、IL-10+CD4+T细胞和NK细胞亚群比例变化。结果:56例患者经IVIG治疗后,妊娠成功率为86%(48/56),明显高于对照组的20%。IVIG治疗组中,妊娠成功者体内IFN-γ+CD4+T细胞、CD56+CD16+NK细胞亚群比例比治疗前明显下降(P均<0.01),IL-10+CD4+T细胞、CD56+CD16-NK细胞亚群比例比治疗前明显升高(P<0.01);而妊娠失败者IVIG治疗前后体内各细胞亚群比例无明显改变。结论:IVIG被动免疫治疗能调节URSA患者机体细胞免疫应答,有利于维持妊娠。 秦卫兵 杨宁 王一峰 韦成厚 钟兴明 郑炜炜 韦相才关键词:静脉滴注免疫球蛋白 原因不明复发性流产 细胞免疫 利用胚胎干细胞重建精子发生的研究 胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESC)是一种具有发育全能性的细胞系,理论上能分化成机体的各种组织细胞,包括生殖细胞。自1981年英国科学家Evans等首次建立小鼠ESC系以来,人类及其他动物的ES... 郑炜炜关键词:原始生殖细胞 胚胎干细胞 拟胚体 精子发生 文献传递 梯度密度离心中离心力、时间和梯度液体积对精子回收率和受精潜能的影响 被引量:3 2016年 目的探究梯度密度离心中离心力、时间和梯度液体积对前向运动精子回收率和受精潜能的影响。方法实验分新鲜精液组和冷冻精液组各30例。每例精液充分混匀后,平均分为4份,进行下列各组实验:(1)组1为80%和40%的梯度离心液各0.5m L,300×g,离心20min;(2)组2为80%和40%的梯度离心液各1.0m L,300×g,离心20min;(3)组3为80%和40%的梯度离心液各1.0m L,1 200×g,离心5min;(4)组4为80%和40%的梯度离心液各0.5m L,1 200×g,离心5min。分别检测处理前后每组精液浓度、前向运动精子百分率、正常形态率以及精子DNA碎片率,以分析离心力、时间和梯度液体积对精子前向运动精子回收率和受精潜能的影响。结果无论是新鲜精液,还是冷冻精液,组1、组3和组4前向运动精子的回收率和精子的正常形态率以及精子的DNA碎片率与组2比较无明显差异(P>0.05)。结论将现行的300×g,离心20min的离心方法,改为1 200×g,离心5min,梯度离心液体积从1.0mL降低至0.5mL,并不显著影响精子正常形态率、前向运动精子的回收率和精子的受精潜能,是可行的。 张清健 宋革 祝晓丽 谭玉梅 郑炜炜关键词:精子 受精 小鼠胚胎干细胞体外诱导分化为精原干细胞的研究 被引量:1 2008年 目的:初步探讨在体外条件下诱导小鼠胚胎干细胞(EGFP-mESC)分化为精原干细胞(SSC)的条件,建立有效的技术平台。方法:采用部分模拟胚胎早期发育的方法,将EGFP-mESC(XY)经体外悬滴培养,制备拟胚体(EB);使用免疫磁珠分选法从EB中分离出表达原始生殖细胞(PGC)表面标志SSEA-1的细胞;获得的细胞经2μmol/L维甲酸(RA)诱导增殖,使之向雄性生殖细胞分化。对诱导的细胞采用RT-PCR及免疫荧光检测特异性基因及蛋白的碱性磷酸酶。结果:在诱导EGFP-mESC向雄性生殖细胞分化的过程中,采用RT-PCR方法检测到了雄性生殖细胞特异表达基因Sry、fragilis、stella、Tex14等mRNA的表达;利用激光共聚焦方法检测到SSC表面标志蛋白Stra8、integrin-α6及Hsp90α的表达。结论:采用RA体外诱导EGFP-mESC定向分化为SSC是可行的。 郑炜炜 崔光辉 陈系古 韦相才关键词:诱导分化 不同来源精子对卵胞浆内单精子注射周期中胚胎发育潜能的影响 刘善文 谭玉梅 郑炜炜 祝晓丽 宋革供精精液冻存时间对人工受精结局及子代出生缺陷的影响 被引量:6 2014年 目的:探讨精液冻存时间对供精人工受精(AID)结局及子代出生缺陷的影响。方法:回顾性分析2007年4月~2013年4月在本生殖中心实施AID助孕治疗的6038例妇女共14 290个AID周期的临床资料,分析供精精液冻存0.5~1年、>1~3年、>3~5年、>5~7年、>7~10年对AID妊娠率、流产率、子代出生缺陷率的影响。结果:供精精液不同冻存时间的妊娠率、流产率未见统计学差异(P>0.05);子代出生缺陷发生率为1.33%,不同冻存时间子代出生缺陷率未见统计学差异(P>0.05)。结论:供精精液冻存0.5~10年,并不影响AID的临床妊娠率、流产率和子代出生缺陷率,用于人工受精安全有效,能获得类似自然妊娠的效果。 郑炜炜 宋革 钟小英 张清健 祝晓丽 谭玉梅 姜荣华关键词:供精人工授精 妊娠率 辅助生殖技术 小鼠胚胎培养在新建辅助生殖实验室质量控制中的作用 被引量:5 2015年 目的利用鼠胚试验(mouse embryo assay,MEA)检测新建辅助生殖实验室培养系统是否适合胚胎培养。方法收集小鼠合子随机放入6个不同的培养箱中,观察各个箱中的囊胚形成情况;利用小鼠配子体外授精法将取出的卵子和精子体外授精,分别用COOK和Vitrolife两个系列的培养液处理配子、完成授精和胚胎培养,分别观察囊胚形成情况。结果共获得合子161枚,放入6个培养箱中的囊胚形成率分别为87.50%、100.00%、83.87%、95.00%、88.57%、92.11%。共获得51枚卵子,用COOK系列和Vitrolife的培养液授精后胚胎培养的囊胚形成率分别为87.50%和94.44%。结论利用收集小鼠合子和小鼠配子体外授精的胚胎培养技术对新建IVF实验室培养环境、培养系统及技术员水平评估,检测的结果符合各项质控标准。 谭玉梅 宋革 祝晓丽 郑炜炜 张清健 钟安关键词:小鼠 体外授精 胚胎培养 供精人工授精10690个周期妊娠结局的多因素分析 被引量:18 2017年 目的分析探讨多种因素对供精人工授精(AID)妊娠结局的影响。方法回顾性分析2013年1月-2015年12月期间在本中心治疗的10 690个AID周期,对女方年龄、不孕年限、治疗方案、输卵管通畅程度、子宫内膜厚度、每周期排卵数、每周期A I D授精次数、精子冻融复苏后浓度、精子冻融复苏后活动率、精子冻融复苏后前向运动精子总数与术后妊娠结局进行χ~2和多因素Logistic回归分析。结果年龄≤30岁妇女的妊娠机会是年龄>35岁者的1.934倍(OR=1.934,P<0.001)、年龄31~35岁妇女的妊娠机会是>35岁者的1.511倍(OR=1.511,P<0.001),自然周期妇女妊娠机会是促排卵周期者的1.307倍(OR=1.307,P<0.001),每周期AID授精2次的妇女妊娠机会是1次组的1.486倍(OR=1.486,P=0.001),每周期AID授精3次的妇女妊娠机会是1次组的1.338倍(OR=1.338,P=0.020),每周期排卵2个的妇女妊娠机会是排1个卵组的1.362倍(OR=1.362,P=0.001),每周期排卵3个的妇女妊娠机会是排卵1个组的1.499倍(OR=1.499,P=0.004),精子冻融复苏后活动率>60%的妇女妊娠机会是≤60%组的1.211倍(OR=1.211,P=0.038),精子冻融复苏后前向运动精子总数≥35×10~6的妇女妊娠机会是≤25×10~6组的1.319倍(OR=1.319,P=0.011)。结论女方年龄≤35岁、每周期排卵2~3个、每周期AID授精2~3次、精子冻融复苏后活动率>60%和精子冻融复苏后前向运动精子总数≥35×10~6能提高授精妇女的妊娠几率;在患者无明显排卵障碍的情况下,应首选自然周期。 张清健 宋革 钟小英 陆艳华 郑炜炜 祝晓丽 谭玉梅 黎敏茹 詹泽虎 张志健关键词:妊娠 LOGISTIC回归 恒河猴骨髓源性神经样细胞分化分子机制的基础研究 2011年 目的探讨神经发育音猬因子(SHH)诱导恒河猴骨髓间质细胞(BMSCs)向神经样细胞分化的丝裂原活化蛋白激酶信号分子变化。方法密度梯度离心法分离培养恒河猴骨髓干细胞,应用Western—blot方法检测SHH诱导细胞内信号蛋白变化,免疫组化方法观察丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂对细胞诱导过程的影响。结果SHH诱导恒河猴BMSCs分化为神经样细胞分化过程,细胞内激酶p38在加入诱导液5min后即被激活,随着时间的延长持续升高,1h达到最高峰,诱导前、后p38的总量未见变化;而磷酸化的ERKI/2被抑制,5min时即开始减少,在2h内逐渐降低,诱导前、后ERKI/2的总量未见变化。结论MAPK激酶系统参与SHH诱导恒河猴MSCs分化为神经样细胞分化过程,p38被激活,而ERK被抑制。 宋革 张阳 郑炜炜 江儒章 刘炳乾 孙雪融关键词:音猬因子 丝裂原活化蛋白激酶 恒河猴 骨髓间充质细胞