孔维立
- 作品数：10 被引量：21H指数：3
- 供职机构：华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家高技术研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型RT-PCR方法的建立
- 引言/目的猪流感病毒是A型流感病毒属成员,属于正黏病毒科,分阶段的负链RNA病毒。A型流感病毒的亚型鉴定是根据血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)基因的抗原差异性来区...
- 齐海涛孔维立曹楠粟硕谭力凯黄震张桂红
- 1株H3N2亚型猪流感病毒的分离鉴定
- 2012年
- 为了解广东猪流感病毒(SIV)的流行变异情况,2010年11月从广东某规模猪场采集流感症状的猪鼻拭子60份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到1株猪流感病毒,通过流感分型RT-PCR和HI试验鉴定为H3N2亚型SIV,命名为A/swine/Guangdong/L22/2010(H3N2),进行全基因序列测定及相似性分析发现,该分离株有低致病性流感分子特征,该毒株的8个基因片段连同最近广东猪群流行的流感毒株与2000年前后H3N2人流感病毒有较高的同源性。系统遗传演化显示,该病毒分离株可能是由1999年人源H3N2流感病毒A/Moscow/10/99(H3N2)进化而来。
- 齐海涛闫军霞粟硕黄震曹楠谭力凯孔维立张桂红
- 关键词：H3N2猪流感病毒
- 4株PRRSV GP5蛋白编码序列的序列测定和特性分析被引量：4
- 2008年
- 针对PRRSV ORF5基因组设计了1对特异性引物,利用RT-PCR的方法,对在南方地区分离的4株PRRSV ORF5基因进行了基因扩增,克隆到pMD18-T载体后测序,获得了4株PRRSV ORF5基因全长603bp的核苷酸序列。利用生物信息学软件对4株PRRSV ORF5基因序列进行了遗传进化分析,结果显示GD1、GD2、GD3、GD4株与美洲型参考株(VR-2332)的核苷酸序列同源性分别为87.1%、87.2%、87.1%和86.9%。利用系统进化树分析表明GD1、GD2、GD3、GD4株均属于美洲型。进一步采用序列分析软件对病毒结构蛋白推导糖基化位点比较,结果表明不同毒株GP5糖基化位点在基序和位置上均有所不同,这可能与毒株的毒力、免疫原性的差异相关,这些为更好地了解PRRSV的分子流行病学特征和抗原变异规律提供依据,同时为研制基因工程疫苗奠定了基础。
- 秦宏阳曹宗喜汤国凯张得玉于淼孔维立张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征GP5蛋白特性分析
- H1N2亚型猪流感病毒NS1的原核表达及抗原性分析
- 2011年
- 为了进一步监控猪流感病毒对猪群的感染情况,研究对H1N2亚型猪流感病毒NS1基因进行RT-PCR扩增,并将其克隆到表达载体pET-30a(+)上构建重组质粒pET-NS1获得纯化产物,结果表明:NS1蛋白能够高效表达,与预期分子质量大小相符;经Western-blot分析,NS1蛋白能很好地与猪流感活病毒产生血清反应,而不能与灭活疫苗产生血清反应;被检血清稀释度为1∶640时,ELISA检测阳性血清的OD490值约为阴性血清的3倍,差异明显。说明NS1蛋白具有良好的血清学反应特异性。
- 孔维立齐海涛曹楠亓文宝焦培荣张桂红
- 关键词：猪流感病毒NS1抗原性分析
- 猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型RT-PCR方法的建立被引量：7
- 2012年
- 根据GenBank中H1N1和H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(neuraminidase,NA)和M基因保守序列,分别设计合成了5对特异性引物,利用RT-PCR技术对SIV的型和亚型进行鉴定。结果表明,该方法的型RT-PCR可以检测出104 EID50病毒量所提取的RNA;H1、H3、N1和N2的亚型RT-PCR均可以检测出104 EID50病毒量所提取的RNA。除每对特异性引物所对应的亚型外,对其他亚型及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CS-FV)的检测均为阴性,应用该方法对临床样品进行检测,其结果与病毒分离结果符合率为100%。结果表明,该方法特异性好、敏感性高,有望成为SIV的一种特异、敏感、快速的分型检测方法,为猪流感分子流行病学的调查奠定了良好的基础。
- 齐海涛孔维立张桂红
- 关键词：猪流感病毒H3亚型RT-PCR方法
- 猪流感疫苗研究进展被引量：6
- 2009年
- 猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性高度传染性疾病,可引起病猪高热、食欲不振、呼吸困难、孕猪流产、延迟出栏等,同时该病常继发其他细菌病感染,严重危害养猪业的发展。由于该病具有重要的公共卫生意义,因此研制安全有效的疫苗尤其重要。目前对猪流感疫苗的研究热点主要集中在表位疫苗和利用反向遗传构建弱毒疫苗。论文针对国内外猪流感疫苗的研究情况做了系统描述,包括灭活疫苗、弱毒疫苗、DNA疫苗、载体疫苗等,旨在为新型疫苗的研制提供参考。
- 孔维立刘志刚亓文宝焦培荣张桂红
- 关键词：猪流感表位疫苗DNA疫苗载体疫苗
- 多种亚型猪流感病毒混合感染的纯化和鉴定被引量：2
- 2013年
- 为了研究多种亚型猪流感病毒混合感染后病毒的纯化,试验采用鸡胚终点稀释法结合特异血清中和法对可能混合多种亚型猪流感病毒的样品进行纯化,并对纯化结果进行HI和RT-PCR试验进行验证。结果表明:此种方法纯化病毒是可行的,不同代次不含外源病毒。
- 曹楠齐海涛孔维立王衡谭力凯张桂红
- 关键词：猪流感病毒纯化
- 广东地区猪源戊型肝炎病毒的检测和核苷酸序列分析被引量：2
- 2011年
- 为了检测广东地区部分猪场猪群中的猪源戊型肝炎病毒(HEV)RNA,试验利用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)并应用生物学软件将经扩增和测序得到的猪源HEV核苷酸序列与GenBank上的各个基因型HEV进行相似性比较分析。结果表明:5个样品中检测到HEV RNA,它们的相似性为85.1%～96.3%,与GenBank上基因Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型HEV序列的相似性分别为76.1%～80.5%、76.5%～79.4%、76.4%～80.2%、82.1%～97.7%。说明广东地区存在的猪源HEV可能属于在国内猪群中流行的基因Ⅳ型。
- 刘志刚曹宗喜张得玉秦宏阳张亮权孔维立吴欣伟于俊勇王文华于淼张桂红
- 关键词：基因亚型
- 广东地区猪源戊型肝炎病毒的检测和核苷酸序列分析
- 本研究利用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测了广东地区部分猪场猪群中的猪源戊型肝炎病毒(HEV)RNA,并应用生物学软件将经扩增和测序得到的猪源HEV核苷酸序列与GenBank上的各个基因型HEV进行相似性比...
- 刘志刚曹宗喜张得玉秦宏阳张亮权孔维立吴欣伟于俊勇王文华于淼张桂红
- 关键词：基因亚型
- 文献传递
- 猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型RT-PCR方法的建立
- 目的：是建立一种特异、敏感、快速的鉴定分型检测方法，为猪流感分子流行病学的调查奠定良好的基础。方法：对猪流感病毒A/swine/GD/170/06 (H1NT), A/swine/GD/164/06 (H3N2)和A/s...
- 齐海涛孔维立曹楠粟硕谭力凯黄震张桂红
- 关键词：猪流感病毒RT-PCR法
