刘志刚
- 作品数:6 被引量:17H指数:3
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家高技术研究发展计划广州市科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪源戊型肝炎病毒ORF2部分基因的原核表达及其鉴定被引量:2
- 2012年
- 本试验旨在表达猪源戊型肝炎病毒(sHEV)ORF2部分基因片段,纯化表达产物并进行抗原性分析。以sHEV的cDNA为模板,PCR扩增ORF2基因片段,构建重组质粒pET32a-dORF2,转化表达菌BL21,IPTG诱导,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting进行检测。试验结果表明,获得60ku的目的蛋白,该蛋白具有良好的抗原性,主要以可溶性形式存在。
- 欧阳昀张亮权刘志刚齐海涛徐廷川张民泽张超逸张桂红
- 关键词:戊型肝炎病毒ORF2基因重组质粒原核表达
- 检测猪戊型肝炎病毒的荧光定量PCR方法的建立被引量:4
- 2011年
- 根据GenBank中猪戊型肝炎病毒的ORF2核苷酸序列的保守区域设计合成一对特异性引物,建立了一套SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测猪源戊型肝炎病毒(swHEV)的方法,并评价了该方法的灵敏度、稳定性和特异性,同时与常规的RT-nPCR进行对比分析。结果表明,建立标准曲线的相关系数为0.998,斜率为-3.039,Ct值变异系数(CV)在0.17%~1.41%之间,有良好的稳定性。同时在检测猪群常见病中显示出很好的特异性,并且比RT-nPCR更灵敏,适合于swHEV的检测。
- 张亮权欧阳昀刘志刚曹宗喜闫明菲王文华郭泗虎张桂红
- 关键词:猪戊型肝炎病毒荧光定量PCR
- 猪流感疫苗研究进展被引量:6
- 2009年
- 猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性高度传染性疾病,可引起病猪高热、食欲不振、呼吸困难、孕猪流产、延迟出栏等,同时该病常继发其他细菌病感染,严重危害养猪业的发展。由于该病具有重要的公共卫生意义,因此研制安全有效的疫苗尤其重要。目前对猪流感疫苗的研究热点主要集中在表位疫苗和利用反向遗传构建弱毒疫苗。论文针对国内外猪流感疫苗的研究情况做了系统描述,包括灭活疫苗、弱毒疫苗、DNA疫苗、载体疫苗等,旨在为新型疫苗的研制提供参考。
- 孔维立刘志刚亓文宝焦培荣张桂红
- 关键词:猪流感表位疫苗DNA疫苗载体疫苗
- 广东地区猪源戊型肝炎病毒的检测和核苷酸序列分析被引量:2
- 2011年
- 为了检测广东地区部分猪场猪群中的猪源戊型肝炎病毒(HEV)RNA,试验利用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)并应用生物学软件将经扩增和测序得到的猪源HEV核苷酸序列与GenBank上的各个基因型HEV进行相似性比较分析。结果表明:5个样品中检测到HEV RNA,它们的相似性为85.1%~96.3%,与GenBank上基因Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型HEV序列的相似性分别为76.1%~80.5%、76.5%~79.4%、76.4%~80.2%、82.1%~97.7%。说明广东地区存在的猪源HEV可能属于在国内猪群中流行的基因Ⅳ型。
- 刘志刚曹宗喜张得玉秦宏阳张亮权孔维立吴欣伟于俊勇王文华于淼张桂红
- 关键词:基因亚型
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒广州株的分离鉴定与全基因序列分析被引量:3
- 2011年
- 为了给研制基因工程疫苗选取毒株奠定基础,研究在2008年采集广东省某猪场疑似猪高热症病料1份,通过RT-PCR检测、Marc-145细胞传代,证实分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒,命名为PRRSV-GZ株,经过扩增基因序列并测序,绘制遗传进化树,结果表明:PRRSV-GZ株属于美洲缺失型毒株。
- 王文华秦宏阳曹宗喜于俊勇吴欣伟于淼孔维力刘志刚张桂红
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 广东地区猪源戊型肝炎病毒的检测和核苷酸序列分析
- 本研究利用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测了广东地区部分猪场猪群中的猪源戊型肝炎病毒(HEV)RNA,并应用生物学软件将经扩增和测序得到的猪源HEV核苷酸序列与GenBank上的各个基因型HEV进行相似性比...
- 刘志刚曹宗喜张得玉秦宏阳张亮权孔维立吴欣伟于俊勇王文华于淼张桂红
- 关键词:基因亚型
- 文献传递