- 镉中毒大鼠睾丸与肝脏金属硫蛋白表达的时相研究被引量：8
- 2002年
- 啮齿目动物睾丸对镉毒性较肝脏更敏感 .为阐明睾丸的镉毒性分子机制 ,比较了肝脏与睾丸金属硫蛋白(MT)表达的时相变化 .mRNA采用RT PCR技术分析并用光密度扫描定量 ;蛋白质定量用ELISA方法 .结果显示 ,睾丸中存在MT ,镉中毒后MT1与MT2mRNA明显升高 ,但MT没有相应增加 ;肝脏镉中毒后MTmRNA与MT均明显升高 .结果提示 :镉虽然能诱导睾丸MTmRNA的转录 ,但没有促进其MT的合成 。
- 任绪义周雍张建鹏冯伟华
- 关键词：镉中毒睾丸肝脏金属硫蛋白
- 急性镉中毒的肝脏损伤机制及金属硫蛋白的保护作用被引量：43
- 1998年
- 目的研究脂质过氧化和自由基在急性镉中毒性肝脏损伤中的作用及金属硫蛋白（ＭＴ）的保护作用。方法测定镉染毒后不同时间大鼠肝脏的ＭＴ和脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）的含量及抗氧化酶的活力，观察肝细胞超微结构的损伤，进行自由基（Ｈ２Ｏ２）的定位。结果大鼠急性染镉后ＭＤＡ高于对照组（Ｐ＜０．０５）；抗氧化酶活力在３小时显著受抑（Ｐ＜０．０５），６小时明显恢复；ＭＴ在３小时即有增加，６小时达正常组的６．７倍；肝细胞膜上Ｈ２Ｏ２的阳性沉积物３小时最严重，２４小时已消失，但此时细胞损伤最严重，４８小时肝细胞再生、修复。结论镉可引起肝脏脂质过氧化及自由基的大量产生，抑制抗氧化酶的活力，造成细胞的严重损伤。ＭＴ对肝脏抗氧化酶活力的恢复、脂质过氧化的减轻、自由基的清除及损伤的肝细胞的保护可能有重要作用。
- 金慧英胡惠民周雍周雍李法卿李素芹谭维国
- 关键词：急性镉中毒金属硫蛋白肝脏损伤
- 镉离子诱发的氧自由基对肝细胞损伤及钙离子分布的影响被引量：10
- 2000年
- 叶煦亭沙继宏周雍杨勇骥胡以平
- 关键词：肝细胞损伤镉离子氧自由基钙离子
- 镉暴露大鼠睾丸支持细胞金属硫蛋白表达的时相研究被引量：31
- 2003年
- 啮齿目动物的睾丸较肝脏对镉毒性更为敏感 .为阐明不同组织细胞的镉毒性分子机制 ,对镉暴露大鼠睾丸支持细胞与肝脏金属硫蛋白基因 (MT )的表达及镉蓄积进行了时相研究 .成年雄性SD大鼠低剂量镉(4 0 μmol/kg)皮下注射后 ,立即进行睾丸支持细胞和肝脏组织的分离 .采用RT PCR技术分析mRNA ,并用光密度扫描作半定量分析 ,蛋白质定量用ELISA方法 ,原子分光光度吸收法测定镉浓度 .结果显示 :镉暴露 1h后肝脏MTmRNA即有明显的诱导表达 ,3h达高峰 ;支持细胞也有明显的诱导表达 ,6h达高峰 .镉暴露后肝脏MT有明显的诱导表达 ,但睾丸支持细胞不但未见MT增加而且还稍有下降 .提示 :a 镉对MTmRNA的诱导表达具有时间依赖性和组织特异性 .b 镉虽然能诱导睾丸MT的转录 ,但没有促进其MT的合成 。
- 任绪义周雍张建鹏仲燕冯伟华焦炳华
- 关键词：金属硫蛋白睾丸支持细胞睾丸组织
- 镉诱导金属硫蛋白的纯化及其抗体制备被引量：8
- 1997年
- 目的：建立简便分离纯化镉诱导金属硫蛋白（ＣｄＭＴ）的方法，并制备抗ＣｄＭＴ抗血清。方法：采用加长ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５柱层析分离纯化由ＣｄＣｌ２诱导的大鼠肝组织ＣｄＭＴ，以此为抗原免疫家兔制得抗ＣｄＭＴ抗血清。结果：纯化的ＣｄＭＴ经ＳＤＳＰＡＧＥ测定相对分子质量及Ｃｄ含量测定与标准ＣｄＭＴ一致，氨基酸组分分析也与文献报道基本一致；获得的抗血清对大鼠ＣｄＭＴ具有特异性反应。结论：本法为一种简便高效的分离纯化ＣｄＭＴ的方法，抗ＣｄＭＴ抗血清的制备可为进一步建立敏感的ＥＬＩＳＡ和免疫组化方法进行组织内ＭＴ含量测定及定位，有利于深入研究Ｃｄ中毒机理和ＭＴ生物学功能。
- 金慧英周雍胡惠民冯伟华赵麟刘军华
- 关键词：金属硫蛋白镉中毒纯化抗体
- 一种改良的分离小分子蛋白质的电泳方法——Tricine-SDS-PAGE被引量：11
- 1999年
- 蔡在龙陈世敏冯伟华周雍毛积芳
- 关键词：蛋白质电泳
- 硕士研究生分子生物学实验教学探索
- 随着生物化学与分子生物学向生命科学的各个领域的纵深发展,系统地学习和掌握生物化学与分子生物学实验的基本理论和基本技术,对于硕士研究生越来越显得重要.2000年在学校领导的高度重视下,以我室为中心,建立了“分子生物学实验基...
- 张建鹏冯伟华周雍杨生生刘军华
- 文献传递
- 镉诱导大鼠睾丸三种类型细胞和肝脏金属硫蛋白基因表达的研究被引量：20
- 2003年
- 目的 :啮齿类动物睾丸较肝脏对镉毒性更敏感。通过对镉诱导早期大鼠睾丸三种类型细胞 (支持细胞、间质细胞和生精细胞 )与肝脏金属硫蛋白 (MT)及其亚型 MT1、MT2表达的研究 ,阐明大鼠睾丸对镉毒性较肝脏更敏感的分子机制。方法 :采用半定量 RT- PCR、EL ISA、原子分光光度吸收法 ,观察镉处理后不同时相大鼠睾丸三种类型细胞与肝脏 MT基因表达的变化。结果 :睾丸组织中存在 MT。同时还发现 0 h对照组大鼠镉处理后肝脏 MT m RNA增加并保持较高的基础水平 ,3h达峰值后下降 ;而睾丸支持细胞和间质细胞则在 6 h达高峰。镉中毒大鼠睾丸支持细胞和肝脏 MT1m RNA的变化幅度要低于MT2 m RNA,而在间质细胞中则相反。此外 ,生精细胞 MT1m RNA在镉处理后 0～ 3h减少 ,然后增加 ,而 MT2 m RNA的变化则相反 ,而且它们的诱导变化幅度较其他细胞低。镉暴露后肝脏 MT m RNA和 MT均升高 ,但在睾丸三种类型细胞中 MT的表达并没有增加。 结论 :镉诱导后 MT m RNA的表达具有细胞和时间依赖性 ;镉虽然能诱导睾丸 MT m RNA的转录但没有促进其 MT的合成 。
- 张建鹏仲燕任绪义周雍冯伟华焦炳华
- 关键词：镉睾丸支持细胞睾丸间质细胞生精细胞
- 急性镉中毒大鼠睾丸氧化损伤机制的研究被引量：12
- 2002年
- 目的 :探究急性镉中毒睾丸氧化损伤的特点以及睾丸对镉敏感的可能机制。 方法 :通过观察 MDA、还原态 GSH、SOD、CAT、GSHpx、MT等指标系统研究大鼠肝、睾丸两器官的细胞抗氧化体系在急性镉暴露后的时间变化规律。结果 :急性镉中毒使肝、睾丸两器官均发生严重的氧化损伤 ,细胞的抗氧化能力明显降低。但两者的变化规律不同 :肝脏在 6 h组 MT大量表达 (达正常值的 6 .7倍 )后 ,上述损伤逐渐减轻 ;而睾丸 MT表达的氧化损伤尽管在前 3h并不严重 ,但此后不断加剧。结论 :急性镉中毒时睾丸与肝氧化损伤规律明显不同 ,MT在睾丸中不能被诱导表达是睾丸对镉极其敏感的原因之一。
- 周雍金慧英冯伟华胡惠民郑尊印木泉
- 关键词：镉中毒金属硫蛋白睾丸损伤
- 急性镉中毒大鼠肝脏金属硫蛋白的免疫电镜定位被引量：3
- 1999年
- 目的：研究急性镉中毒大鼠肝细胞中金属硫蛋白（ＭＴ）在超微结构水平的分布。方法：制备羊抗兔ＩｇＧ－１０ｎｍ胶体金，结合自制的兔抗大鼠ＭＴ抗血清，在灌注固定的急性镉中毒大鼠肝中，进行ＭＴ的包埋后免疫胶体金电镜定位观察。结果：镉暴露６ｈ大鼠肝细胞中有大量胶体金颗粒分布于胞质与细胞核内，而正常组肝细胞中胶体金颗粒数量很少。结论：急性镉中毒６ｈ的大鼠肝细胞中证实已有大量ＭＴ诱导产生，并游离分布于胞质与细胞核内；常规灌注固定结合包埋后免疫胶体金技术同样可以有效捕捉小分子量、易流失的ＭＴ蛋白分子。
- 周雍金慧英胡惠民于秉学魏尧梅郑尊
- 关键词：急性镉中毒金属硫蛋白肝细胞
