周循
- 作品数：20 被引量：61H指数：5
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家中医药管理局中医药科学技术研究专项湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- mTOR通路调控肾间质成纤维细胞活化的机制被引量：5
- 2012年
- 目的探讨mTOR信号通路在肾间质成纤维细胞增生活化过程中的调控作用，并研究其抑制剂在抗肾纤维化治疗中的可行性。方法用8周龄雌性C57BL／6小鼠构建单侧输尿管结扎（UUO）肾间质纤维化动物模型（n=30），按数字随机法分为雷帕霉素组（n=15）及UUO组（n=15）。雷帕霉素组术前1d开始腹腔注射雷帕霉素（2mg·kg^-1·d^-1）至实验结束；UUO组注射生理盐水。分别于术后1、3、7、14d处死小鼠（n=3），留肾组织进行相关检测。同时，体外实验评估雷帕霉素对TGF—β诱导鼠成纤维细胞株（NIH3T3细胞）活化的干预作用。结果UUO小鼠肾组织中活化的肌成纤维细胞[α肌动蛋白（α-SMA）阳性】高表达mTOR通路下游效应因子pS6K。雷帕霉素显著抑制pS6K表达及肾间质中肌成纤维细胞的活化，改善肾小管间质损伤及纤维化程度。实时荧光定量PCR结果提示雷帕霉素组小鼠肾皮质组织中成纤维细胞特异蛋白1（FSPl）、转化生长因子B（TGF-β）、结缔组织因子（CTGF）及Ⅳ型胶原蛋白基因仅l（Co14A1）的mRNA水平显著下降。体外实验结果示TGF-β诱导小鼠成纤维细胞株（NIH3T3）的mTOR通路显著活化，并大量合成α—SMA。雷帕霉素能够明显抑制mTOR通路活性，降低细胞的纤维化活性。结论肾间质纤维化过程中成纤维细胞内的mTOR信号通路高度活化。抑制mTOR通路能够显著降低成纤维细胞的活性，改善肾间质纤维化程度。
- 陈国纯刘虹王畅周循刘伏友
- 关键词：纤维化成纤维细胞雷帕霉素
- 去甲斑蝥素抑制单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮-间充质转分化的实验研究被引量：7
- 2012年
- 目的:利用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型,观察去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对肾小管上皮细胞间质转分化的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)和UUO+NCTD治疗组(NCTD组),每组6只。采用单侧(左)输尿管结扎方法,建立梗阻性肾小管间质纤维化大鼠模型,Sham组只游离输尿管而不结扎。术后14d处死动物,取结扎侧肾脏,同时处死Sham组大鼠,取出肾组织。采用免疫组化、Western Blot及RT-PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cadherin)与转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的mRNA表达的变化。结果:免疫组化、Western Blot及RT-PCR均显示,与Sham组比较,UUO组肾组织α-SMA和TGF-β1的mRNA表达升高、E-cadherin蛋白和mRNA表达降低(P<0.05);NCTD能抑制UUO大鼠肾组织α-SMA和TGF-β1表达的上调,上调E-cadherin的表达(P<0.05)。结论:NCTD具有抑制UUO大鼠肾小管上皮-间充质转化的作用,该作用可能与抑制TGF-β1的过表达有关。
- 孙岩李瑛孙林刘健凌光辉刘映红周循刘伏友
- 关键词：去甲斑蝥素转化生长因子Β1
- 16年腹膜透析的基础和临床研究回顾被引量：11
- 2009年
- 总结16年以来中南大学湘雅二医院肾内科腹膜透析的基础与临床研究的经验与成果。在国内率先成功构建了腹膜透析及腹膜纤维化动物模型,分离、鉴定了腹膜间皮细胞;利用细胞、分子生物学方法,系统研究了腹膜透析液的生物相容性、腹膜间皮细胞透析损伤的分子机制与防治措施,观察了促纤维化细胞因子转化生长因子-β1(TGF-β1),结缔组织生长因子(CTGF)及过氧化物酶体增生物激活受体-γ(PPAR-γ)等在腹膜纤维化发病机制中的重要作用,并初步阐明了它们的基因表达调控机制。首次在腹膜透析研究领域中利用纳米载体介导TGF-β1-shRNA与pCTGF-shRNA质粒在腹膜细胞与组织中的表达。在临床研究方面,研究了腹膜透析置管定位新方法、腹膜透析溶质转运特点及其机制、腹膜透析治疗模式及其他并发症的防治。
- 刘伏友彭佑铭邹莎琳凌光辉聂静唐文彬周循段绍斌李军刘映红刘虹袁芳肖力卓莉陈俊香陈星成梅初朱健玲朱笑萍罗季安樊敏张浩孙林
- 关键词：腹膜透析腹膜纤维化生物相容性溶质转运
- miR-129-5p在腹膜间皮细胞转分化中的作用与机制被引量：1
- 2015年
- 目的探讨miR-129—5p（microRNA-129—5p）对腹膜间皮细胞上皮．间充质转分化（EMT）的调节作用及可能的分子机制。方法通过新开管腹膜透析（PD）和PD6个月以上两组患者腹透流出液分离培养腹膜间皮细胞，采用Taqman探针实时荧光定量PCR法检测其中miR-129-5p的表达差异。5μg/L TGF—β1刺激腹膜间皮细胞株（HPMCs）0～72h，观察TGF—β1对HPMCs细胞miR-129—5p表达的影响；预转染miR-129-5p前体（pre-miR-129—5p）使HPMCs中miR-129—5p过表达，再给予5μg/L TGF—β1刺激48h，采用实时荧光定量PCR、Western印迹和细胞免疫荧光等方法，观察过表达miR-129-5p对TGF—β1诱导的HPMCs EMT相关蛋白和基因表达的影响。同时，观察5μg/L TGF-β1作用不同时间（0—72h）对HPMCsSmad作用蛋白1（SIP1，miR-129-5p生物预测下游因子）表达的影响以及过表达miR-129—5p对其mRNA和蛋白水平的调节作用。结果PD6个月以上组患者透出液分离培养的腹膜间皮细胞中miR-129—5p的表达显著低于新开管组（P〈0．01）；5μg／L外源性TGF-β1刺激，可使HPMCs的miR-129-5p表达明显降低，呈时间依赖性，pre—miR-129—5p预转染可明显恢复TGF-β1诱导的上皮标志物E—cadherin mRNA和蛋白的表达，并抑制TGF-β1引起的间充质标志物Vimentin mRNA和蛋白的高表达（均P〈0．01）。另外，TGF-β1可呈时间依赖性增加SIP1的mRNA和蛋白表达（均P〈0．01），而pre-miR-129—5p可明显抑制TGF-β1诱导的SIP1蛋白表达（P〈0．01），对其mRNA表达无明显影响（P〉0．05）。结论miR-129—5p可能参与PD状态下腹膜间皮细胞EMT，并可能通过转录后调控SIP1参与该过程，以miR-129-5p／SIP1为靶点，可望为PD腹膜纤维化防治提供一种新途径。
- 周循刘伏友罗盈唐丹阳石坤孙林肖力
- 关键词：腹膜透析细胞转分化
- microRNA-129-5p通过调节SIP1参与TGF-β1诱导的人腹膜间皮细胞转分化
- 周循刘伏友彭佑铭孙林凌光辉刘虹刘映红朱雪婧肖力
- MicroRNA-302c通过结缔组织生长因子调控腹膜透析相关腹膜纤维化被引量：21
- 2019年
- 目的通过观察microRNA-302c(miR-302c)对腹膜间皮细胞结缔组织生长因子(connect tissue growth factor,CTGF)表达及上皮细胞-间充质细胞转分化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)的影响,探讨miR-302c对腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)相关腹膜纤维化的作用及机制。方法收集PD患者腹膜透析流出液中腹膜间皮细胞,检测miR-302c、CTGF、EMT及纤维化相关指标的表达,并分析其相关性;体外培养人腹膜间皮细胞株,通过转染慢病毒过表达miR-302c,检测腹膜间皮细胞CTGF、EMT及纤维化相关指标的变化。结果 PD患者腹膜透析流出液中miR-302c水平降低(F=443.165,P<0.001),与波形蛋白(Vimentin)(r=-0.887,P=0.001)和CTGF(r=-0.840,P=0.002)水平呈负相关,与紧密连接蛋白-1(Zo-1)水平呈正相关(r=0.873,P=0.001)。过表达miR-302c抑制转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人腹膜间皮细胞株E-钙黏蛋白(E-cadherin)(F=13.910,P=0.043)表达下调,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)(F=11.833,P=0.026)及Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)(F=10.673,P=0.031)表达上调,同时也抑制了TGF-β1诱导的CTGF表达上调(F=8.340,P=0.044)。结论 miR-302c可能通过CTGF调控PD过程中腹膜间皮细胞EMT及纤维化。
- 李勰家周循孙林刘伏友肖力刘虹张磊
- 关键词：腹膜透析腹膜纤维化结缔组织生长因子
- microRNA302c通过调节CTGF参与TGF-β1诱导的人腹膜间皮细胞EMT
- 袁新科肖平孙林肖力周循刘伏友
- microRNA与肾脏疾病
- 2009年
- 1993年，Lee等^[1]在秀丽新小杆线虫（Caenorhabditis elegan）中发现了第一个可时序调控胚胎后期发育的基因lin-4，2000年Reinhart等^[2]又在该线虫中发现第二个异时性开关基因let～7。2001年10月《science》报道了三个实验室分别从线虫、果蝇和人体内找到的几十个类似于lin-4的小RNA基因，称之为microRNA。
- 周循凌光辉刘伏友
- 关键词：RNA
- SARA的表达与糖尿病肾病病理类型及临床表型相关性分析
- 朱志永刘伏友凌光辉周循唐文彬许向青
- 腹膜透析引流液离心法和大网膜消化法原代培养人腹膜间皮细胞
- 2010年
- [目的]建立和改善两种人腹膜间皮原代细胞培养的方法.[方法]分别采用离心法从腹膜透析（PD）引流液中及胰蛋白酶-EDTA消化法从人的腹膜组织中分离培养人腹膜间皮细胞（HPMC）,并分别对两种原代培养的HPMC采用相差倒置显微镜和免疫组化染色对培养的细胞进行鉴定.[结果]①两种方法均在体外原代培养成活,在相差倒置显微镜下观察细胞均呈典型的铺路石样外观,免疫组化显示两种方法培养的HPMC胞浆角蛋白、波形蛋白表达阳性,提示为腹膜间皮细胞.②经大网膜消化法获得的HPMC可传至第四代,保持原有铺路石样外观,PD引流液离心法获得的HPMC传代后生长缓慢,长期接受PD后HPMC可呈现成纤维细胞样改变.[结论]成功应用离心法和消化法进行HPMC原代培养,有助于PD研究体外实验的开展.
- 张柯周循张浩邹莎琳凌光辉孙林刘伏友
- 关键词：腹膜透析离心法间质细胞
