吴玉良 作品数:9 被引量:162 H指数:6 供职机构: 浙江农业大学农业与生物技术学院生物化学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
差异显示法克隆水稻抗白叶枯病相关蛋白激酶基因 被引量:22 1998年 利用已知植物的蛋白激酶及抗病基因氨基酸序列,设计含激酶保守功能域的简并引物,运用mRNA差异显示技术显示经病原菌诱导的抗性品系及感病品系愈伤组织mRNA表达差异,并对差异片段分子克隆。 董海涛 吴玉良关键词:水稻 MRNA差异显示 白叶枯病菌 基因克隆 水稻株高基因eui的初步分子定位 被引量:44 1998年 A pair of near isogenic lines, 307T with eui gene, Zhenshan 97 with sdl gene, and its F, populationwere used to RFLP mapping of eui gene. Sixty three RFLP probes on chromosome 5 were screened, two markers,RG435 and RG493 were found to be linked with eui gene, genetic distance between eui and RFLP markers were calculated. 吴玉良 何祖华 董继新 李德葆 林鸿宣 庄杰云 陆军 郑康乐关键词:基因定位 株高基因 分子标记 水稻 松材线虫和拟松材线虫种间及种下群体的RAPD指纹分析 被引量:39 1998年 利用RAPD技术对松材线虫(Bursaphelenchusxylophilus)和拟松材线虫(B.mucrona-tus)的分离物基因组DNA进行了DNA片段的随机扩增,以确定种间及种内群体的亲缘关系和筛选具有种鉴定特征的分子标记.通过对40个10聚体随机引物的筛选,应用8个引物对两种线虫种间及种内分离物扩增片段的遗传分析显示:两种间群体RAPD扩增片段的共享度为40%~56%,而在松材线虫的不同分离物之间的共享度为60%~84%;其中有一个引物(P253)可在松材线虫和拟松材线虫种间产生具有种鉴定特征的特异性RAPD片段,在松材线虫的不同分离物中均可产生一约700bp的特异性片段,而在拟松材线虫中产生了两个分别约为1300bp和1900bp的特异性片段. 郑经武 许建平 吴玉良 李德葆关键词:松材线虫 拟松材线虫 RAPD标记 用PCR—差别筛选法分离和克隆水稻抗瘟性相关基因 被引量:2 1998年 以水稻抗瘟性近等基因系H7R和H7S为材料,采用PCR-差别筛选的方法分离和克隆水稻受稻瘟病菌诱导的抗性相关基因。第一轮筛选获得42个差异表达的cDNA克隆,经PCR扩增,转膜,反向Northern杂交后,得到了12个阳性cDNA克隆。本文对PCR-差别筛选的优缺点以及进一步的鉴定工作亦作了讨论。 吴玉良 董继新关键词:水稻 稻瘟病菌 分子克隆 RAPD方法鉴定水稻抗瘟性和eui基因相关的DNA片段 被引量:7 1995年 RAPD方法鉴定水稻抗瘟性和eui基因相关的DNA片段何祖华,吴玉良,程世军,凌建群,李德葆(浙江农业大学生物技术研究所分子生物学研究室,杭州310029)IdentificationofRAPDFragmentsRelatedtoRiceResis... 何祖华 吴玉良 程世军 凌建群 李德葆关键词:水稻 稻瘟病 RAPD 基因 受赤霉素诱导的水稻基因分离 被引量:2 1998年 受赤霉素诱导的水稻基因分离①董海涛吴玉良莫肖蓉董继新李德葆(浙江农业大学生物技术研究所,杭州310029IsolationofRiceGenesResponsetoGibberelinDongHaitaoWuYuliangMoXiaorongDong... 董海涛 吴玉良 莫肖蓉 董继新 李德葆关键词:水稻 赤霉素 基因分离 分子生物学新方法 被引量:5 1999年 何祖华 吴玉良 董继新 董海涛 李德葆关键词:MRNA差别显示 基因表达分析 水稻受稻瘟病菌诱导基因的分离和克隆 被引量:16 1997年 利用一对抗瘟性近等基因系(Near-isogenic lines, NILs)H7R(抗病)和H7S(感病),经稻瘟病菌小种早期诱导,提取RNA,进行mRNA差异显示(Differential display,DD)分析.在获得多个DD片段的基础上,经PCR重扩增、Sourthern杂交粗筛及Northern blotting进一步鉴定.阳性片段克隆于PGEM-T载体,经序列测定,国际联网查询,已获得两个受稻瘟病菌诱导的水稻新基因cDNA片段克隆. 在我国,Magnaporthe grisea是水稻稻瘟病的主要病害菌,由于生理小种的复杂性,抗病品种的抗性丧失已成为传统育种的一大难题.国际上对采用基因工程改良水稻的抗瘟性越来越重视并已成了各国竞争的热点.然而期望通过RFLP基因定位,并借助图谱克隆抗瘟性基因尚需多年的工作和大量的投入.此外,对于水稻与稻瘟病菌之间“基因对基因”的互作在分子水平上尚缺乏了解.本研究采用了本实验室完善的mRNA差异显示技术体系,在国际上首次用DD方法,鉴定和克隆受稻瘟病菌诱导的新的水稻抗瘟性和防卫反应候选基因. 何祖华 董海涛 程世军 吴玉良 董继新 李德葆关键词:水稻 稻瘟病菌 分子克隆 基因 无性系