吴燕峰
- 作品数：165 被引量：681H指数：12
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 间充质干细胞对脐血CIK/NK细胞CD69表达及培养体系中T调节细胞量比的影响被引量：3
- 2009年
- 本研究通过Transwell细胞隔离培养体系探讨骨髓源间充质干细胞(MSC)对脐血(CB)来源细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)/自然杀伤细胞(NK)CD69的表达以及对培养体系中CD4+CD25+T调节(Treg)细胞量比的影响。利用聚碳酯膜孔径0.4μm的Transwell隔离细胞培养系统将实验组分为隔离培养(Transwell)组和直接混合(mix-ture)培养组;将MSC和CIK/NK细胞按1:20、1:50和1:100的比例分别在Transwell组和mixture组中进行隔离和直接混合培养,每组6个重复孔;培养48小时后通过流式细胞术检测各组CIK/NK细胞上CD69的表达以及培养体系中CD4+CD25+细胞量比的变化。结果显示:加入MSC的实验各组CB-CIK细胞和NK细胞上表达的CD69比例均显著低于对照组(p值均<0.001).Transwell组中的CIK和NK细胞上表达的CD69,在MSC的高浓度组(1:20组)均显著低于低浓度组(1:50组和1:100组),其中CIK细胞组间的p值分别为0.046、0.020;NK细胞组间的p值均为0.000。mixture组中不同比例组间CIK细胞上表达的CD69无显著性差异,而NK细胞上CD69的表达在MSC的高浓度组(1:20组)均显著低于低浓度组(1:50组和1:100组)。加入MSC的CB-CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞的量比不论在Transwell还是mixture组中均显著高于对照组(p值均<0.01);在Transwell组中,CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞的量比在1:20组、1:50组均显著高于1:100组;在mixture各组中,CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+T调节细胞的量比均有显著性差异。MSC的高浓度组(1:20组),CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞量比在mixture组显著高于Transwell组;而在MSC的低浓度组(1:50组和1:100组),2组体系中的CD4+CD25+细胞量比无显著性差异。结论:MSC能以直接接触或间接作用的方式抑制异基因CIK/NK细胞的活化,这可能与MSC能上调培养体系中的CD4+CD25+Treg细胞量比有关,且这种作用与MSC的数量呈浓度依赖关系。
- 黎阳魏菁吴燕峰王潇娉黄科林永潮黄绍良方建培
- 关键词：骨髓源间充质干细胞细胞因子诱导杀伤细胞NK细胞CD69
- 一例异基因外周血干细胞移植致Ⅳ度肠道aGVHD的临床研究被引量：4
- 2001年
- 对 1例异基因外周血干细胞移植 (allo PBSCT)治疗重型 β地中海贫血 (TM )患儿合并Ⅳ度肠道aGVHD的诊断和治疗进行分析和探讨。预处理方案为白消安 (18mg/kg) ,环磷酰胺 (2 0 0mg/kg) ,噻替派 (6mg/kg) ,马抗胸腺细胞球蛋白 (110mg/kg)。输注的NC为 10 .6× 10 8/kg(受体体重 ,下同 ) ,CD34+ CD38- 11.7× 10 6 /kg。PBSCT + 14天WBC为 1.4× 10 9/L ,ANC为 0 .66×10 9/L ,植入证据为“供者型” ,但WBC在 1.4 - 2 .5× 10 9/L ,呈“再障”骨髓象 ,于 + 39天予输注供体细胞后 ,逐渐恢复正常造血。患儿 + 11天发生了皮肤Ⅱ度aGVHD ,在其好转时 + 33天出现腹泻 ,于 + 39天第二次输注供体细胞后明显加重 ,持续 2个月 ,最终按肠道aGVHD治疗有效。本例表明在皮肤aGVHD好转后仍可发生严重的肠道aGVHD ;allo PBSCT时对于顽固性腹泻的患儿 ,如植入证据明确 ,但外周血象和骨髓象呈抑制状态时 ,应考虑肠道aGVHD。
- 陈纯方建培黄绍良包蓉吴燕峰
- 关键词：异基因外周血干细胞移植急性移植物抗宿主病肠道移植物抗宿主病重型Β地中海贫血ALLO-PBSCT
- 骨髓间充质干细胞对异基因脐血来源CIK/NK细胞的细胞周期和凋亡率的影响
- ＜正＞目的:通过Transwell隔离细胞培养体系了解骨髓间充质干细胞（BMMSC）对脐血（CB）来源细胞因子诱导杀伤（CIK）细胞/自然杀伤（NK）细胞的细胞周期和调亡率的影响。
- 方建培黎阳吴燕峰王潇娉郭海霞周敦华黄绍良魏菁
- 文献传递
- 非血缘供者脐血移植治疗14例儿童白血病的临床研究被引量：2
- 2005年
- 周敦华黄绍良方建培黄科黎阳陈纯徐宏贵吴燕峰包蓉
- 关键词：供者儿童白血病非血缘脐血移植
- 广东地区汉族人群中人类白细胞抗原基因位点的分布频率及其意义被引量：3
- 2004年
- 目的:研究广东地区汉族人群人类白细胞抗原Cw座位(humanleukocyteantigen-Cw,HLA-Cw)基因位点的分布频率,并初步探讨其与临床移植的关系。方法:用聚合酶链反应-序列特异引物(polymerasechainreaction-se-quence-specificprimers,PCR-SSP)方法对103例广东地区汉族人群HLA-Cw位点的基因频率分布进行了研究。结果:广东地区汉族人群的HLA-Cw位点以HLA-Cw01,Cw03,Cw07分布频率较高,广东地区汉族人群的HLA-Cw基因分型和日本及非洲差别较大。除Cw*01外,中国南方的广东地区汉族人群的HLA-Cw基因分型和北方的天津汉族人群也有明显差别。Cw*07在各国及中国不同地区人群中的频率均较高。结论:广东地区汉族人群的HLA-Cw基因分型和其他国家和中国北方地区人群有明显的差别。
- 包蓉吴燕峰黄绍良
- 关键词：基因频率聚合酶链反应造血干细胞移植
- 自制磷酸钙胶原复合材料与诱导的成骨细胞生物相容性被引量：2
- 2008年
- 目的自制一种磷酸钙胶原复合材料，使之在组织工程材料中作为骨缺损修复和种子细胞的载体。方法将磷酸钙和磷酸氢钙与Ⅰ型胶原按35％：35％：30％的质量比例混合，采用真空冻干技术制备成海绵状复合材料，半透膜透析。体外分离培养、成骨诱导扩增兔骨髓间充质干细胞（BMSC），第1、3、5周连续检测诱导培养液上清中的碱性磷酸酶（ALP）含量；茜素红矿化染色进行成骨分化鉴定。接种具有成骨细胞表型的BMSC存透析过的复合材料上并培养，病理切片检测细胞生长状况。结果BMSC体外诱导培养后，第1、3、5周培养液上清中的ALP分泌量逐渐增加（P〈0．05），茜素红矿化染色呈强阳性。病理切片示诱导后的BMSC在磷酸钙胶原复合材料中生长良好。结论自制的磷酸钙胶原复合材料与诱导后的BMSC生物相容性良好，在骨缺损修复中可以作为种子细胞的良好载体。
- 栗国梁史德刚黄忠琴吴燕峰彭加友许灼新
- 关键词：磷酸钙胶原复合材料成骨细胞
- FcγRIIIa基因多态性对利妥昔单克隆抗体介导的NK细胞杀伤Raji细胞作用的影响被引量：2
- 2010年
- 由于FcγRIIIa的基因多态性可导致NK细胞上Fcγ受体(Fcgamma receptor,FcγR)与抗肿瘤单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)Fc段结合的亲和力不同,NK细胞以抗体依赖细胞介导的细胞毒性(antibody-depend-ent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)对肿瘤细胞的杀伤能力也不同。本研究通过CFSE-PI双荧光染色法检测不同FcγRIIIa基因型的NK细胞对Raji细胞的ADCC效应强度,确定不同FcγRIIIa基因型的NK细胞所介导的AD-CC效应差异。用nest-PCR测定FcγRIIIa表型,用CFSE-PI双荧光染色法染色靶细胞(Raji细胞),用流式细胞术检测NK细胞上CD3-CD56+及FcγRIIIa的表达以及Raji细胞上CD20的表达,计算细胞毒性。结果表明:FcγRIIIa-158V/V基因型的NK细胞ADCC细胞毒性指数为(69.05±2.38)%,FcγRIIIa-158V/F基因型的NK细胞ADCC细胞毒性指数为(39.63±3.86)%,与V/V基因型相比,V/F基因型的NK细胞对Raji细胞的ADCC效应明显较弱,差异具有统计学意义(t=12.950,p=0.000)。结论:FcγRIIIa基因多态性可影响利妥昔单克隆抗体介导的NK细胞对Raji细胞的体外ADCC效应,以FcγRIIIa-158V/V基因型的NK细胞ADCC效应较FcγRIIIa-158V/F基因型的NK细胞ADCC效应强。
- 屈钰华黎阳吴燕峰方建培黄绍良黄燕魏菁
- 关键词：FCΓRIIIA利妥昔单抗
- 人嗅鞘细胞与骨髓间充质干细胞体外共培养的实验研究
- 2013年
- [目的]通过体外共培养观察人嗅鞘细胞(OECs)对骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖分化的影响。[方法]取5个月以上引产胎儿嗅球及骨髓,分离培养及鉴定OECs及MSCs,携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的腺相关病毒转染标记0ECs,双苯亚甲胺荧光染料标记MSCs,将两种细胞按1:1比例进行共培养,MSCs单独培养组为阴性对照组,免疫细胞化学方法检测MSCs表达巢蛋白(nestin)、神经元特异性核蛋白(NeuN)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF-M)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)情况。[结果]MOI值为1×106时0ECs表达GFP阳性率为84.89%,对细胞生长活性无明显影响。共培养时两种细胞生长良好,共培养7 d未见形态学改变,经复方丹参注射液诱导后部分MSCs呈现神经元样改变,表达nestin、NSE、NeuN、NF-M、GFAP特异性标志,且共培养组的分化率明显高于单独MSCs培养组,有显著性差异。[结论]OECs可通过分泌可溶性物质及细胞之间的相互作用启动MSCs分化程序,提高MSCs向神经细胞分化率。
- 史玉朋沈慧勇叶俊强吴燕峰唐勇曹瑞治林绵辉王磊李国松
- 关键词：嗅鞘细胞骨髓间充质干细胞绿色荧光蛋白共培养
- DFU对骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察选择性环氧合酶-2抑制剂DFU对人骨肉瘤细胞株MG-63增殖和侵袭能力的影响及其对Ang-2基因表达的调控。方法体外培养骨肉瘤细胞株MG-63，免疫荧光法检测Ang-2在MG-63细胞中的表达，应用噻唑蓝（MTT）比色法和形态学检测研究不同浓度DFU对骨肉瘤细胞株MG-63的生长抑制作用，Boyden小室体外侵袭实验检测其对骨肉瘤细胞侵袭能力的影响，RT—PCR法分析DFU对骨肉瘤细胞株MG-63中Ang-2基因表达的影响。结果免疫荧光染色结果显示Ang-2在骨肉瘤细胞株MG-63中呈阳性染色，MTT法和形态学检测提示DFU可抑制骨肉瘤细胞株MG-63的增殖，并具有剂量依赖性，在DFU浓度为200μmol／L时，对细胞生长有明显的抑制作用。Boyden小室体外侵袭实验显示DFU可降低骨肉瘤细胞的侵袭能力，在DFU浓度为200μmol／L时，作用最显著。逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分析显示经DFU作用后的骨肉瘤细胞株MG-63表达Ang-2较用药前明显下降。结论DFU对骨肉瘤细胞株MG-63的增殖有抑制作用，其可能通过抑制Ang-2的表达，降低其侵袭能力。
- 吴燕峰梁新军唐勇黄霖杨睿王鹏沈慧勇
- 关键词：骨肉瘤ANG-2
- 异体输血缓解强直性脊柱炎的髋关节疼痛被引量：1
- 2014年
- 背景:疼痛一直为强直性脊柱炎的主要临床表现,目前治疗多以口服非类固醇抗炎药为主,效果有限且毒副作用大,目前尚没有一种经济、有效治疗强直性脊柱炎疼痛症状的方案。目的:探讨强直性脊柱炎患者术后关节疼痛缓解与异体输血的相互关系及其机制。方法:回顾分析了88例因强直性脊柱炎驼背行单节段后凸截骨矫形合并髋关节疼痛患者的临床资料,对比术中新鲜异体全血输注、自体与异体全血混合输注、自体全血回输3组患者髋关节疼痛目测类比评分、白细胞计数、淋巴细胞计数及免疫球蛋白浓度的变化,并利用流式细胞技术分析外周血中与自身免疫性疾病密切相关的Th17及Treg细胞亚群的数量与比例变化。结果与结论:新鲜异体全血输注、自体与异体全血混合输注者术后髋关节疼痛症状明显改善,其白细胞数量、淋巴细胞数量及免疫球蛋白浓度无明显变化,但流式细胞技术检测显示强直性脊柱炎患者外周血中与自身免疫性疾病密切相关的Th17/Treg比例明显升高。结果可见异体全血输注可能通过纠正Th17/Treg平衡进而改善患者的免疫状态,减轻其关节疼痛。
- 张鑫王鹏吴燕峰杨睿黄霖唐勇李玉希高梁斌沈慧勇
- 关键词：植入物强直性脊柱炎异体输血髋关节疼痛TH17TREG
