吴宗娣
- 作品数：24 被引量：102H指数：7
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 中期因子转录物及其蛋白在肝细胞癌中的定位与表达研究被引量：10
- 2002年
- 目的了解中期因子 (Midkine,MK)转录物及其蛋白产物在肝细胞癌 (hepatocellularcarci noma ,HCC)中的定位情况与表达特点。方法应用原位杂交、免疫组织化学染色等方法对 33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配对瘤旁肝组织进行了MKmRNA及蛋白的定位与表达研究。结果免疫组织化学结果与原位杂交结果具有一致性 (χ2 =0 5 0 0 ,P >0 0 5 )。MK在HCC组织中呈高表达。MKmRNA及蛋白的阳性信号聚集于HCC细胞质。在HCC细胞外组织中亦有MK表达 ,尤以血管密集处明显。HCCMK表达率与肝癌组织学类型、分级等临床病理学特点无相关性。结论HCC在mRNA和蛋白水平上表达MK增加 。
- 罗祥基殷正丰康晓燕吴宗娣张柏和吴孟超
- 关键词：生物因子原位杂交免疫组织化学肝细胞癌蛋白定位蛋白表达
- 甲胎蛋白变异体作为肝细胞癌预后指标的研究被引量：10
- 2001年
- 目的探讨AFP变异体作为HCC预后指标的意义,为临床应用提供依据.方法本研究涉及1991～1994年在我院第一次行肝癌根治性切除术的AFP阳性HCC患者129例,术前采用小豌豆凝集素亲和免疫电泳自显影法测定血清AFP变异体含量,术后随访至1999年,将相关资料进行归纳整理,分析血清AFP变异体含量与HCC复发率、生存率的关系,并进行统计学分析.结果 129例HCC患者1,3,5年累计复发率分别为32.6%,66.7%和86.8%.AFP变异体含量≥20%组(A组,83例)和AFP变异体含量＜20%组(B组,46例)的累计复发率分别为37.3%和23.9%(1年),73.5%和54.3%(3年),92.8%和76.1%(5年).A组累计复发率明显增高(P＜0.05).129例HCC患者1,3,5年生存率分别为88.4%,63.6%和41.1%.A组和B组累计生存率分别为84.3%和95.7%(1年),56.7%和76.1%(3年),32.5%和56.5%(5年).B组生存时间明显延长(P＜0.01).结论AFP变异体是恶性生物学的良好指标,作为一个独立的预后标志物,可在临床上用于预测HCC预后和复发.
- 殷正丰康晓燕钱海华吴宗娣虞紫茜吴孟超
- 关键词：甲胎蛋白肝细胞癌预后肝肿瘤
- 肝细胞癌高表达中期因子蛋白与肝内转移的关系被引量：16
- 2002年
- 目的 探讨中期因子 (midkine ,MK)蛋白在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)中的表达特点、水平及其与肝内侵袭、转移的可能关系。方法 应用免疫组织化学染色、Western印迹等方法 ,对 33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配对瘤旁肝组织进行了MK蛋白定位表达及表达水平的研究 ,并结合肝内有无卫星灶形成进行分析。结果 免疫组织化学结果与Western印迹结果具有一致性 (P >0 .0 5 )。在正常肝组织及良性肝病变组织中 ,MK无表达 ;而在HCC组织中 ,MK高表达。在癌旁肝硬化组织中 ,MK微量表达 ;而在肿瘤侵袭前沿区域 ,MK表达则增强。HCC中MK表达率与其组织学类型、组织分级、瘤体大小、包膜状况、AFP值之间差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但在有卫星灶形成的HCC中 ,MK蛋白表达率显著高于无卫星灶形成者 (P <0 .0 5 )。结论 HCC在蛋白水平上表达MK增加 ,并可能与肝内侵袭、转移有关。
- 殷正丰罗祥基康晓燕吴宗娣钱海华吴孟超
- 关键词：肝肿瘤肝细胞癌中期因子蛋白免疫组织化学
- 识别肿瘤血管内皮细胞的嵌合性T细胞受体的构建与鉴定被引量：1
- 2002年
- 王率殷正丰崔贞福吴宗娣吴孟超
- 关键词：肿瘤血管内皮细胞基因重组
- 携带HSV－tk基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建被引量：2
- 1996年
- 构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子使之成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧＫ－ｔｋ质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因（ｐｇｋ）启动子调控的ＨＳＶ－ｔｋ片段，克隆到ｐＭＮＭ的ＰＬ位点上，构建成普通型ＰＭＮｐ－ｔｋ逆转录病毒载体；从ｐＧＥＭ．７Ｚ－ＡＦＰｅ质粒中游离人甲胎蛋白基因增强子核心序列，克隆到ｐＭＮｐ－ｔｋ的ｐｇｋ启动子上游，构建成人肝癌特异型ｐＭＮＡＰ－ｔｋ逆转录病毒载体。结论：该载体对肝癌特异性前药转换基因治疗有重要意义。
- 高军曹广文戚中田仇小芳吴宗娣杜平杨文国崔龙
- 关键词：基因治疗逆转录病毒载体HSV-TK
- 人白细胞介素2、β干扰素基因逆转录病毒载体的构建和在人肾细胞癌及其TIL中的表达
- 1995年
- 从ｐｃＤ－５．１质粒和ｐＳＰＧＮＨＩＦＮＢ１０质粒分别切下人白细胞介素２（ＨｕＩＬ－２）ｃＤＮＡ和人β干扰素（ＨｕＩＦＮ－β）ｃＤＮＡ，分别克隆到ｐＮＭＳＭ逆转录病毒载体多克隆位点，经酶切鉴定确定正确插入方向。经ＰＡ３１７包装细胞包装成重组病毒，测转染效率。用ＮＩＨ／３Ｔ３细胞测重组病毒感染效率。在８μｇ／ｍｌ鱼精蛋白存在的条件下分别感染人新鲜肾透明细胞癌体外建株细胞以及人肾细胞癌肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）。经Ｇ４１８选择阳性克隆后测上清表达ＨｕＩＬ－２及ＨｕＩＦＮ－β活性。结果ＨｕＩＬ－２和ＨｕＩＦＮ分别在转ＨｕＩＬ－２基因和ＨｕＩＦＮ－β基因肾细胞癌细胞的表达量达２５０Ｕ／１０６细胞·ｄ－１和６４００Ｕ／１０６细胞·ｄ－１，在经目的基因转染ＴＩＬ细胞中的表达量分别比未经目的基因转染的ＴＩＬ高２～３倍和４～８倍。ＴＩＬ生长状况未有明显改变，抗肿瘤活性未见明显增强。
- 曹广文侯建国李光辉杜平杨文国戚中田吴宗娣仇小芳廖国强夏广彬钱松溪郑家富马永江孔宪涛
- 关键词：白细胞介素Β干扰素肾肿瘤
- 腺病毒介导的VEGF启动子—胸苷激酶系统对骨肉瘤细胞的杀伤试验
- 2004年
- 目的 探讨腺病毒介导的VEGF启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV tk)系统 (AdVEGF tk)对体外培养的骨肉瘤细胞的选择性杀伤作用。方法 采用 2种重组腺病毒载体AdVEGF tk和AdCMV tk(CMV启动子调控tk基因表达 )体外感染低表达VEGF的成骨细胞系MC3T3 E1和高表达VEGF的骨肉瘤细胞系LM 8,并给予不同浓度的丙氧鸟苷 (GCV)处理 ,用MTT法检测感染细胞的增殖情况。结果 未感染病毒或感染空病毒的MC3T3 E1细胞和LM8细胞对GCV不敏感 ,感染AdCMV tk的MC3T3 E1细胞和LM 8细胞对GCV敏感。与感染空病毒的MC3T3 E1细胞相比 ,感染AdVEGF tk的MC3T3 E1细胞对GCV的敏感性轻度增加 ,用 5 0 μg/mlGCV处理时 ,30 %MC3T3 E1细胞被杀死 ;感染AdVEGF tk的LM8细胞对GCV的敏感性明显增加 ,用 5 0 μg/mlGCV处理时 ,95 %LM 8细胞被杀死 ,产生的细胞毒活性表现为剂量依赖性。结论 腺病毒介导的VEGF启动子 tk/GCV系统对高表达VEGF的骨肉瘤细胞具有杀伤作用。
- 周正明殷正丰王孟龙吴宗娣康晓燕杨惠光吴孟超
- 关键词：腺病毒介导骨肉瘤细胞杀伤试验
- 携带单纯疱疹病毒tk基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建(英文)被引量：1
- 1997年
- 目的构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体．方法用ＳａｌＩ酶切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧｋｔｋ质粒中用ＢａｍＨＩ酶游离带有磷酸甘油酸激酶基因（ｐｇｋ）启动子调控的ＨＳＶｔｋ片段，克隆到ｐＭＮＭ的ＰＬ位点上，构建成普通型ｐＭＮＰｔｋ逆转录病毒载体；从ｐＧＥＭ．７ＺＡＦＰｅ质粒中用ＥｃｏＲＩ酶游离人甲胎蛋白基因增强子核心序列，克隆到ｐＭＮＰｔｋ的ｐｇｋ启动子上游，构建成人肝癌特异型ｐＭＮＡＰｔｋ逆转录病毒载体．结果酶切鉴定ｐＭＮＰｔｋ和ｐＭＮＡＰｔｋ载体构建正确．结论该载体对肝癌特异性前药转换基因治疗有重要意义．
- 高军曹广文戚中田仇小芳吴宗娣杜平杨文国崔龙
- 关键词：逆转录病毒科甲胎蛋白类基因疗法
- 中期因子mRNA在原发性肝癌中的表达及其意义被引量：5
- 2002年
- 目的 探讨中期因子 (MK)mRNA在原发性肝细胞癌 (HCC)中的表达及其意义。方法 收集 33例人肝细胞癌组织、配对癌旁肝组织及 1 0例肝良性肿瘤组织、5例正常肝组织 ,采用TRIzol一步抽提法提取总RNA ,应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测MKmRNA的表达。结果 2 8例肝细胞癌可见MKmRNA表达 ,阳性率为 84.8% ,而配对的癌旁组织中仅见 3例表达 ,正常肝脏和肝脏良性肿瘤组织无 1例阳性。统计学分析表明 ,肝细胞癌MKmRNA表达率与其他各组的差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) ,但肝细胞癌MKmRNA表达与其组织学类型、病理分级、瘤体大小、包膜状况及其甲胎蛋白 (AFP)值之间差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论 肝细胞癌在mR NA水平上表达MK增加 ,检测MK表达情况可作为HCC的辅助诊断指标之一 。
- 罗祥基殷正丰吴宗娣康晓燕钱海华吴孟超
- 关键词：MRNA原发性肝癌肿瘤标志物
- 逆转录病毒介导的人肝癌特异性HSV－tk／ACV的体外抗肝癌作用被引量：2
- 1996年
- 目的：建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果：构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体，经过ＰＡ３１７细胞包装及病毒滴度测定后，感染肝癌ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交方法证明ＨＳＶ－ｔｋ基因在ＡＦＰ高分泌的ＨｅｐＧ２细胞中得到特异转录，以阿昔洛韦（ＡＣＶ）为前药攻击转基因的肝癌细胞显示对ＨｅｐＧ２有相对选择性杀伤作用。结论：该ＡＦＰｅ／ＨＳＶ－ｔｋ／前药转换疗法为肝癌特异性基因治疗提供了有价值的资料。
- 高军曹广文戚中田吴宗娣杜平仇小芳崔龙杨文国
- 关键词：胸苷激酶甲胎蛋白增强子
