吕卫东
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广州市科技攻关项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人源性抗bFGF单链抗体及双价抗体在毕赤酵母中的表达、纯化及鉴定
- 目的：为了提高人源性抗bFGF抗体的表达量，构建抗bFGF单链抗体ScFv、双价抗体Diabody的酵母表达载体，利用毕赤酵母表达系统表达人源性的抗bFGF ScFv及Diabody并研究其生物学活性。 方法：从噬菌体抗...
- 吕卫东
- 关键词：抗体片段毕赤酵母
- 文献传递
- 抑制肿瘤血管新生的复合肽VBP3局部刺激与全身过敏性实验被引量：2
- 2011年
- 目的:评价抑制肿瘤血管新生的复合肽VBP3的安全性。方法:同体左右侧自身对比法对3只家兔进行皮下注射的局部刺激实验。28只豚鼠随机分为4组:无菌生理盐水(PS)阴性对照组6只,牛血清白蛋白(BSA)阳性对照组6只,复合肽VBP3低剂量组6只,复合肽VBP3高剂量组6只,进行全身过敏实验;剩余4只豚鼠,牛血清白蛋白阳性对照组和复合肽VBP3高剂量组各2只,不经致敏直接心脏激发。结果:抑制肿瘤血管新生的复合肽VBP3对家兔皮下注射的局部刺激反应轻微;豚鼠实验仅复合肽VBP3高剂量组1只豚鼠出现弱阳性过敏反应,且很快缓解,其余豚鼠未见过敏症状。结论:抑制肿瘤血管新生的复合肽VBP3在本实验条件下安全。
- 康艳丽王宏向军俭王盼盼吕卫东邓宁
- 关键词：血管内皮细胞生长因子成纤维细胞生长因子2
- 抗人碱性成纤维细胞生长因子人源性scFv抗体及其应用
- 本发明公开了一种抗重组碱性成纤维细胞生长因子人源性scFv抗体及其应用。该人源性scFv抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。编码重链可变区的基因序...
- 邓宁吕卫东黄静怡王宏宋其芳
- 文献传递
- 人源性抗bFGF单链抗体表达载体的构建与酵母表达被引量：3
- 2012年
- 为了提高人源性抗bFGF抗体的表达量,从噬菌体抗体库筛选出的人源性抗bFGF抗体基因中亚克隆单链抗体(single chain fragment variable,ScFv)基因,并将其构建到酵母表达载体pPICZαA中。表达载体质粒经线性化后,电转化法转化至毕赤酵母GS115中,甲醇诱导表达。表达产物经镍离子亲和层析和阴离子交换层析纯化,并检测其生物学活性。酶切鉴定结果显示人源性的酵母表达载体构建成功。SDS-PAGE和Western blot结果显示,抗bFGF单链抗体获得了高效表达,表达量可达124mg/L,目的蛋白大小为36 kDa左右。通过两步纯化方案,目的蛋白的纯度可达95%以上。ELISA结果显示纯化的目的蛋白可与bFGF特异性结合。CCK8检测结果显示,纯化的抗bFGF单链抗体可剂量依赖性地抑制人肺腺癌细胞株A549的增殖。研究结果表明在毕赤酵母中可获得人源性抗bFGF单链抗体高效表达,表达产物具有很好的生物学活性。
- 吕卫东杜超超王宏姜浩武劳学军宋其芳邓宁
- 关键词：BFGF单链抗体
- 抗人碱性成纤维细胞生长因子人源性scFv抗体及其应用
- 本发明公开了一种抗重组碱性成纤维细胞生长因子人源性scFv抗体及其应用。该人源性scFv抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。编码重链可变区的基因序...
- 邓宁吕卫东黄静怡王宏宋其芳
- 小鼠B淋巴细胞活化刺激因子可溶性片段在毕赤酵母中的表达、纯化及其生物学活性的初步鉴定
- 2013年
- 目的在毕赤酵母中表达小鼠B淋巴细胞活化刺激因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF)可溶性片段(msBAFF),纯化后检测其生物学活性。方法采用RT-PCR法从BALB/c小鼠外周血单核细胞中扩增msBAFF基因,插入表达载体pPICZαA中,构建重组表达质粒pPICZαA-msBAFF,转化巴斯德毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达。表达的重组msBAFF蛋白经硫酸铵沉淀及Q Sepharose XL阴离子交换柱纯化后,分别单独及与anti-IgM共同作用于BALB/c小鼠脾脏B淋巴细胞,检测其对B淋巴细胞活力的影响。结果重组表达质粒pPICZαA-msBAFF经双酶切鉴定构建正确;表达的重组msBAFF蛋白相对分子质量约为20 000,诱导60 h表达量较高;经硫酸铵沉淀、透析除盐及Q Sepharose XL阴离子交换柱纯化,获得了较纯的msBAFF,BCA法测定纯化蛋白的产率为20 mg/L;重组BAFF蛋白具有促进小鼠B淋巴细胞活力的作用。结论成功在毕赤酵母中表达了重组msBAFF蛋白,纯化的重组蛋白具有良好的生物学活性,为进一步研究小鼠BAFF基因的功能及基于BAFF的佐剂与单克隆抗体的制备奠定了物质基础。
- 欧子强唐勇向军俭吕卫东林婷婷
- 关键词：小鼠毕赤酵母纯化
