卢卓强
- 作品数：17 被引量：55H指数：5
- 供职机构：福建医科大学附属第一医院更多>>
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- 遗传相关的低高密度脂蛋白胆固醇血症与冠状动脉性心脏病的关系:荟萃分析
- 2016年
- 目的 以胆固醇酯转运蛋白（CETP）基因-629位点C/A变异为工具变量,通过孟德尔随机化荟萃分析探讨血浆高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）与冠状动脉性心脏病（冠心病）发病风险之间的潜在因果关系。方法检索PubMed和EMBASE数据库,收集2015年12月以前发表的关于CETP-629C/A多态性与冠心病及血脂水平相关性的所有前瞻性或回顾性研究,利用STATA软件对HDL-C与冠心病的相关性进行荟萃分析。结果 总共有12篇（包括15组研究群体：冠心病患者4894例,对照人群7462名）关于CETP-629C/A多态性与冠心病发病风险的巢式病例对照研究和9篇（包括19组研究群体,22 140名研究对象）关于CETP-629C/A多态性与血浆三酰甘油和（或）HDL-C水平相关性的文献纳入分析。总体分析表明,CETP-629C等位基因在等位基因模型、纯合子模型和显性模型下分别使患冠心病的风险增加3%（OR=1.03,95%CI 0.93~1.14,P=0.603）,12%（OR=1.12,95%CI0.95~1.32,P=0.186）和11%（OR=1.11,95%CI0.96~1.28,P=0.174）,但结果无统计学意义。亚组分析显示,在关于高加索人、心肌梗死患者、前瞻性或大规模的研究中,携带-629C等位基因增加罹患冠心病的风险（P〈0.05）。-629CC基因型人群[加权均数差（WMD）-3.48,P〈0.01]或携带-629C等位基因人群（WMD-3.01,P〈0.01）血浆中的HDL-C水平均显著降低。而不同基因型人群的血浆三酰甘油水平差别没有统计学意义;孟德尔随机化分析中,由遗传因素所致血浆中HDL-C水平下降1、5、10mg/dL（1mg/dL=0.026mmol/L）的因果关系优势比在高加索人中分别为1.11、1.67、2.79,心肌梗死患者中分别为1.07、1.43、2.03,前瞻性研究中分别为1.07、1.41、1.99,大规模研究中分别为1.07、1.38、1.90。结论 遗传相关的低HDL-C血症在高加索人群中作为冠心病的危险因素有临床意义。
- 卢卓强晋学庆龚晶婧蔡瀚林金秀
- 关键词：冠状动脉性心脏病三酰甘油高密度脂蛋白胆固醇胆固醇酯转运蛋白
- ACE2基因表达增加对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡的影响
- 2013年
- 目的探索在AngII干预下ACE2基因表达增加对人血管内皮细胞增殖、凋亡的影响。方法原代培养人脐静脉血管内皮细胞。用构建、包装好的慢病毒重组ACE2基因表达载体（Lentiviral—ACE2）以感染复数为10（MOI=10）感染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）。感染72h后，以AnglI（终浓度为10。mol／L）干预细胞，倒置相差显微镜观察各组HUVEC的形态学变化，AlamarBlue试剂检测各组HUVEC增殖功能，TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测各组HUVEC的凋亡。结果AngⅡ组与AngII＋Lentiviral—GFP组细胞生长状态差，生长缓慢，形态不规则并且有不同程度脱壁悬浮的细胞；而正常细胞对照组与AngII＋Lentiviral—ACE2组细胞生长状态良好，圆形、卵圆形，饱满，形态正常呈“铺路石”样生长，紧密贴壁，悬浮细胞少。AngII组较正常细胞对照组、Ang1I＋Lentiviral—ACE2组AlamarBlue被还原率明显降低（P〈O．05）。Ang11组的凋亡指数为（0．1165±0．0181），与正常细胞对照组凋亡指数（0．0373±0．0113）和AngⅡ＋Lentiviral—ACE2组凋亡指数（0．0540±0．0061）相比差异有统计学意义（P〈0．05）。AngII组与AngⅡ＋Lentiviral—GFP相比、正常细胞对照组与AngII＋Lentiviral—ACE2组相比，AlamarBlue被还原率和凋亡指数差异无统计学意义。结论AngⅡ具有促进人脐静脉内皮细胞增殖能力下降和凋亡增加的作用。ACE2表达增~IIII抑制AngⅡ诱导的人脐静脉内皮细朐增殖活件降低和凋亡增加．对人脐静脉内皮细胞具有保护作用。
- 王前胜刘东亮董艳彩晋学庆卢卓强
- 关键词：血管紧张素转化酶2人脐静脉内皮细胞增殖凋亡
- 血管紧张素转换酶2基因转染抑制平滑肌细胞增殖被引量：7
- 2011年
- 目的通过血管紧张素转换酶2（ACE2）基因转染大鼠血管平滑肌细胞（VSMC），观察其对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）促VSMC增殖的影响。方法将大鼠VSMC分为正常细胞组、AngⅡ组、空载体＋AngⅡ组及pm—ACE2＋AngⅡ组，通过CCK8细胞计数试剂盒和流式细胞仪检测各组细胞周期，观察ACE2基因转染对AngⅡ促VSMC增殖效应的影响。结果与正常细胞组相比，AngII组细胞计数明显增高，pm—ACE2＋AngⅡ组与AngII组相比显著降低（0．535±0．004比0．866±0．026，P〈0．05）；同时，AngⅡ组在G0／G1期细胞的百分率明显降低（58．80％±2．00％，P〈0．05），S期的则显著增高（35．90％±1．00％，P〈0．05），与AngⅡ组相比，pmACE2＋AngⅡ组在Go／G，期的百分率明显升高（63．90％±1．40％，P〈0．05），S期则显著降低（27．80％±0．46％，P〈0．05）。结论ACE2基因转染能抑制Ang1I的促VSMC异常增殖效应。
- 晋学庆卢卓强林旭
- 关键词：基因血管
- 血管内皮损伤程度决定动脉硬化斑块的稳定性 缺血再灌注动脉硬化模型的建立被引量：10
- 2013年
- 目的利用大鼠颈动脉设计一种缺血再灌注的动脉硬化模型，以观察动脉硬化的病理过程及其机制。方法SD大鼠30只，分为正常对照组（对照组）、假手术组和颈总动脉缺血再灌注损伤（IRI）组，每组10只。采用夹闭颈总动脉的方法造成缺血再灌注损伤。4周后苏木精伊红（HE）染色检测新生内膜面积／中膜面积（I／M）值，免疫组织化学法检测新生内膜中血小板内皮细胞黏附分子（CD31）的表达。结果（1）IRI组大鼠血管内膜增生明显，I／M值高于对照组和假手术组（1．328±0．301比0．011±0．004和0．017±0．008，P均〈0．01）。（2）IRI组大鼠血管新生内膜由小到大，从覆盖局部到整个管腔。小的新生内膜相对稳定，而大的新生内膜，病变覆盖整个管腔，呈环状的病变发生自发性断裂，表现不稳定，断裂的新生内膜导致血栓形成。（3）免疫组织化学结果显示，表面覆盖有完整内皮细胞的斑块表现稳定，没有内皮细胞层覆盖的大的斑块表现不稳定。结论大鼠颈动脉缺血再灌注可以形成稳定的动脉硬化模型。血管表面内皮细胞的不完整是动脉硬化斑块破裂的决定因素之一。
- 晋学庆吴旭玮卢卓强龚晶婧王华军许昌声
- 关键词：动脉硬化再灌注损伤
- 小鼠ACE2基因真核表达载体的构建及其对血管平滑肌细胞增殖的影响
- 目的本研究拟构建小鼠ACE2基因的真核表达载体,并观察ACE2基因转染大鼠血管平滑肌细胞/(VSMC/)后对AngⅡ促VSMC异常增殖效应的影响,初步探讨产生该影响的可能机制。
方法1.通过RT-PCR从小鼠...
- 卢卓强
- 关键词：ACE2血管平滑肌细胞
- 文献传递
- 慢病毒重组ACE2基因表达载体的构建及其感染人脐静脉内皮细胞的研究被引量：2
- 2010年
- 目的构建携带血管紧张素转换酶2（ACE2）基因的慢病毒表达载体，观察其感染人脐静脉内皮细胞后ACE2基因的转录及表达水平。方法采用PCR技术从含有ACE2基因的质粒克隆模板pc—DNA3．1-hygro（＋）一mACE2上钓取ACE2基因，并将ACE2基因重组到慢病毒载体表达质粒pGC—FU中，构建重组慢病毒载体表达质粒pGC—FU—ACE2，通过酶切、测序验证ACE2基因后，将pGC—FU—ACE2质粒和包装质粒pHelper1．0、pHelper2．0共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞，获得携带ACE2基因的重组慢病毒Lentiviral—ACE2；然后感染人脐静脉内皮细胞，通过RT—PCR、Western—blot检测ACE2基因的转录和蛋白表达水平。结果成功构建携带ACE2基因的慢病毒表达载体Lentiviral—ACE2，并获得大量高纯度的慢病毒浓缩液。目的基因ACE2能被重组慢病毒高效地导入人脐静脉血管内皮细胞，并能高水平表达。结论慢病毒表达载体Lentiviral—ACE2成功构建并能高效率感染人脐静脉内皮细胞，为研究ACE2对血管内皮细胞的影响和更深入地探索ACE2基因的功能奠定了基础。
- 王前胜晋学庆卢卓强
- 关键词：血管紧张素转化酶2慢病毒表达载体人脐静脉内皮细胞
- ACE2小干扰RNA对平滑肌细胞AT1受体蛋白表达及其下游信号通路的影响被引量：4
- 2020年
- 目的研究ACE2 siRNA干预SD大鼠平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)后,探讨ACE2对血管紧张素Ⅱ1型受体(AngⅡtype 1 receptor,ATlR)蛋白表达、ERK1/2、STAT3蛋白磷酸化水平的影响。方法(1)用脂质体法将含有ACE2基因的质粒DNA及si-ACE2转染到各对应干预组VSMCs;(2)Western blot检测各组细胞ACE2、AT1R蛋白表达水平以及p-ERK1/2、p-STAT3蛋白的磷酸化水平。结果(1)对比空白对照组、GFP组、脂质体组,si-ACE2组、AngⅡ组ACE2蛋白表达明显降低,而AT1R蛋白表达和p-ERK1/2、p-STAT3蛋白磷酸化水平明显增加(P<0.05);(2)分别对比AngⅡ组和AngⅡ+ACE2组,AngⅡ+si-ACE2组和AngⅡ+ACE2+si-ACE2相应的ACE2蛋白表达均降低,而AT1R蛋白表达、p-ERK1/2、p-STAT3蛋白磷酸化水平均增加(P<0.05)。结论ACE2 siRNA和AngⅡ均能抑制ACE2蛋白的表达,且两者对ACE2起协同抑制作用;ACE2蛋白表达的减少能上调AT1受体蛋白表达,同时提高其下游信号通路ERK1/2、STAT3蛋白磷酸化水平。
- 龚晶婧李荣通卢卓强许昌声王华军晋学庆
- 关键词：血管紧张素转换酶2信号转导和转录激活因子3小干扰RNA
- 血管紧张素转换酶2基因转染抑制大鼠平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体表达及下游转录激活子3信号通路被引量：6
- 2012年
- 目的利用构建的血管紧张素转化酶（ACE）2慢病毒表达载体转染平滑肌细胞，探讨ACE2对血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）表达的影响。方法培养平滑肌细胞，并进行分组及干预：（1）空白对照组：仅加入无血清培养基。（2）慢病毒重组绿色荧光蛋白表达空载体（Lentiviral—GFP，GFP）组：加入感染复数（MOI）为10的Lentiviral—GFP空载体。（3）血管紧张素（Ang）Ⅱ组：加入终浓度为10^-2mol／L的AngU。（4）AngU＋慢病毒重组ACE2表达载体（Lentiviral—ACE2，ACE2）组：同时加入浓度为10^-2mol／L的AngII和MOI为10的Lentiviral—ACE2。（5）AngⅡ＋厄贝沙坦组：同时加入终浓度为10^-7mob/L的AngⅡ和厄贝沙坦。（6）AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组：同时加入终浓度为10。mol／L的AngⅡ和厄贝沙坦以及MOI为10的Lentiviral—ACE2。（7）ACE2组：仅加入MOI为10的Lentiviral—ACE2。将上述干预细胞提取RNA后运用实时PCR检测细胞ATlRmRNA的表达，Westernblot技术分别检测细胞ATlR蛋白表达，以及下游信号通路信号转导子和转录激活子3（STAT3）蛋白磷酸化水平。运用CCK-8试剂盒检测上述干预组的细胞增殖水平。结果（1）AnglI＋ACE2组和AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组的ATIRmRNA表达均低于AngⅡ组（分别为0．39±0．02和0．24±0．01比I．80±0．08，P分别〈0．05和0．01）。（2）AngⅡ＋ACE2组和AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组的ATIR蛋白表达均低于AngⅡ组（分别为0．83±0．07和0．52±0．07比1．10±0．13，P分别〈0．05和0．01）。（3）AngⅡ＋ACE2组和AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组的STAT3蛋白磷酸化水平均低于AngⅡ组（分别为0．09±0．01和0．02±0．01比0．50±0．10，P分别〈0．05和0．01）。（4）AnglI＋ACE2组和An如＋ACE2＋厄贝沙坦组的细胞增殖水平均低于Angll组（分别为0．84±0．08和0．77±0．10比1．16±0．11，P分别〈0．05和0．01）。结论ACE2通过抑制ATIR和下�
- 龚晶婧卢卓强曹金龙许昌声王华军晋学庆
- 关键词：肽基二肽酶ASTAT3转录因子
- 小鼠血管紧张素转化酶2基因表达型载体的构建及体外表达被引量：3
- 2010年
- 背景:通过转基因疗法使血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme,ACE2)过度表达来治疗心血管病是当前ACE2研究的趋势,而构建含ACE2基因的载体则能为该研究方法提供工具。目的:构建含小鼠血管紧张素转化酶2基因的真核表达载体,并验证其蛋白的表达。方法:采用RT-PCR的方法从C57小鼠肾脏扩增出ACE2基因全长cDNA序列,并通过酶切连接和转化等分子生物学方法将其定向克隆至载体pcDNA3.1/Hygro(+)上,构建小鼠ACE2基因的真核表达载体pm-ACE2,并通过酶切及测序鉴定。通过脂质体转染法将所构建的pm-ACE2转染COS7细胞,并利用Western blot检测COS7细胞中ACE2蛋白的表达。结果与结论:通过测序并与GeneBank上的小鼠血管紧张素转化酶2序列(NM_027286.3)比对,证实实验成功克隆小鼠ACE2基因全长cDNA至载体pcDNA3.1/Hygro(+)上,测序结果提示存在3处同义突变;所构建的pm-ACE2在真核细胞中具有ACE2蛋白的表达。结果提示实验成功构建了小鼠ACE2基因真核表达载体,此载体具有表达ACE2蛋白的功能。
- 卢卓强晋学庆
- 关键词：COS7细胞真核细胞基因表达
- 血管紧张素转换酶2基因转染抑制大鼠颈总动脉缺血再灌注损伤后内膜新生被引量：3
- 2013年
- 目的 探讨慢病毒重组血管紧张素转换酶（LV-ACE）2基因过表达对于大鼠颈总动脉缺血再灌注损伤（IRI）后内膜新生的影响和相关机制。 方法 将SD大鼠分为正常对照组、假手术组、IRI后1、2、4周亚组，每组10只，采用夹闭颈总动脉方法制造动脉硬化模型，HE染色观察各组新生内膜面积/中膜面积（I/M）值；另选SD大鼠50只，分为5组：对照组、IRI组、IRI＋慢病毒重组绿色荧光蛋白（LV-GFP）组（GFP组）、IRI＋LV-ACE2组（ACE2组）和IRI＋紫杉醇组（紫杉醇组），每组10只，夹闭法后利用LV-ACE2干预，并用LV-GFP、紫杉醇等作为对照。HE染色观察各组I/M值，免疫组织化学方法观察各组新生内膜中ACE2、平滑肌细胞α-肌动蛋白（α-SM-actin）、血小板内皮细胞黏附分子（CD31）、血管紧张素1型受体（AT1R）、细胞外信号调节激酶磷酸化（P-ERK1/2）表达变化。 结果 （1）IRI后，HE染色观察损伤组的1、2、4周亚组I/M值（分别为0.364±0.032、0.789±0.120和1.517±0.151）均高于正常组（0.011±0.004，P均〈0.01）。（2）LV-ACE2等干预后，HE染色观察ACE2组I/M值低于IRI组（0.71±0.17比1.53±0.16，P〈0.01）；免疫组织化学观察ACE2组ACE2表达积分吸光度（IA）值与IRI组比较，差异无统计学意义（1294±283比1080±252，P=0.63），ACE2组CD31表达血管密度低于IRI组［（12.40±4.21）个/mm2比（96.20±17.79）个/mm2，P〈0.01］，ACE2组α-SM-actin、AT1R、P-ERK1/2表达IA值均低于IRI组（分别为5 843±839比12 648±1 760，1 219±175比4 861±545，1 040±215 比2 938±286, P均〈0.01） 结论 大鼠颈总动脉IRI后4周能够形成稳定的内膜新生，ACE2能明显抑制IRI后内膜新生、新生内膜中平滑肌细胞增殖及新生血管生成，其机制可能与ACE2抑制AT1R、P-ERK1/2的表达有关。
- 吴旭玮卢卓强龚晶婧王华军许昌声晋学庆
- 关键词：肽基二肽酶A血管内膜再灌注损伤
