刘智
- 作品数：20 被引量：141H指数：8
- 供职机构：华中科技大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划高等学校骨干教师资助计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 霍乱弧菌生物被膜发育与环境调控被引量：4
- 2017年
- 生物被膜状态的霍乱弧菌具有极强的环境适应性和超高的感染性,生物被膜的发育调控研究对霍乱弧菌的宿主感染和环境适应非常重要。本文综述了近年来霍乱弧菌生物被膜研究结果,包括霍乱弧菌生物被膜的组成、发育和环境调控,尤其着重阐述了各种环境因子对霍乱弧菌生物被膜发育的影响,包括细菌自体信号分子、自然环境因子和宿主信号分子。
- 王全民马遥刘丽钧朱军刘智
- 关键词：生物被膜霍乱弧菌环境因子
- 紫杉醇合成代谢过程中关键酶基因的表达调控研究
- 余龙江刘智杨秦
- 文献传递
- 实时PCR分析△^5脱饱和酶在花生四烯酸合成中的作用被引量：4
- 2006年
- 花生四烯酸是人体的必需脂肪酸，具有独特的生物活性。△^5脱饱和酶是花生四烯酸生物合成途径中催化二高-γ-亚麻酸脱饱和为花生四烯酸的酶。通过实时定量PCR技术，检测了△^5脱饱和酶在不同花生四烯酸产量的高山被孢霉（Mortierella alpina）菌株M10、M6和M23中的mRNA表达水平，以及在高产花生四烯酸菌株M6培养过程中的mRNA表达水平的动态变化。发现岔脱饱和酶基因的mRNA表达水平与花生四烯酸的产生之间存在明显的线性关系，表明△^5脱饱和酶在高山被孢霉花生四烯酸合成途径中起到了非常重要的作用。
- 肖靓刘智朱敏余龙江朱路周蓬蓬
- 关键词：花生四烯酸实时PCR高山被孢霉
- 中国红豆杉中主要紫杉烷类物质的分布研究被引量：30
- 2005年
- 对中国红豆杉[Taxus chinensis(Pilg.)Rehd.]中的紫杉烷类化合物紫杉醇及两种重要前体巴卡亭III(B III)和10-脱乙酰巴卡亭III(10-DAB)的分布进行了研究.结果表明,紫杉醇的含量在同一棵树中的分布依主干皮、根皮、侧枝树皮、种子、须根、嫩枝、叶的次序递减,并发现侧枝茎中紫杉醇在横截面方向呈梯度分布,且紫杉醇含量最高部位是在次生木质层.10-DAB和B III在叶中含量最高,在须根中含量最低,叶子中10-DAB的含量达0.02%～0.03%,高于B III的含量.在2～3 a生的小树枝、叶中未检测到紫杉烷类物质,提示其合成可能与植株发育有关.紫杉醇在30 a 树龄的当年生嫩叶中春季高于秋季,而10-DAB在当年生和多年生的叶中积累都较多,且秋季比春季含量高.
- 赵春芳余龙江刘智孙友平李文兵
- 关键词：中国红豆杉紫杉烷紫杉醇
- 基于定量PCR技术探讨紫杉醇生物合成的限速步骤被引量：8
- 2005年
- 次生代谢产物生物合成受到发育和诱导的调控,本实验研究了组织分化和诱导处理对紫杉醇生物合成的影响,并采用定量PCR技术分析了紫杉醇生物合成不同阶段关键酶基因的动态表达特征.结果表明,紫杉醇主要分布在中国红豆杉(T axus ch inensis)树皮和根皮组织中,针叶内含量很少,催化紫杉醇功能官能团连接的关键酶基因也主要定位在树皮和根皮组织中;茉莉酸甲酯(M J)和真菌诱导子F 5分别提高了中国红豆杉悬浮培养细胞HG-1紫杉醇得率8倍和10倍,同时有效诱导紫杉醇生物合成基因的表达,发现催化紫杉醇侧链连接的基因与紫杉醇生物合成呈正相关.结果表明,紫杉醇生物合成的限速步骤是催化功能官能团连接的步骤.
- 刘智余龙江赵春芳向福杨秦
- 关键词：紫杉醇生物合成定量PCR中国红豆杉
- 濒危植物岩黄连叶片中基因组DNA的提取及分析被引量：7
- 2006年
- 目的获取高质量的岩黄连基因组DNA。方法用改进的SDS-CTAB法从岩黄连叶片中提取基因组DNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法、PCR检测其质量,并与传统的CTAB法比较。结果通过改进的SDS-CTAB法提取的DNA优于CTAB法提取的DNA,电泳条带清晰,纯度高,能较好的进行PCR。结论改进的SDS-CTAB法适合岩黄连基因组DNA的提取。
- 程华周蓬蓬余龙江胡琼月朱路刘智敖明章
- 关键词：岩黄连基因组DNA
- 红豆杉细胞非甲羟戊酸途径关键酶基因dxr的克隆与分析被引量：16
- 2004年
- 近几年的研究表明 ,非甲羟戊酸途径可能是紫杉醇合成的主要途径 ,通过对各种不同来源的非甲羟戊酸途径关键酶 5_磷酸脱氧木酮糖还原异构酶 (DXR)基因同源区域进行比较 ,设计出简并引物 ,利用RT_PCR技术从中国红豆杉 (Taxuschinensis)悬浮细胞中扩增出 5 35bp的基因片段。同源序列比对发现 ,推断的蛋白质序列与Arabi dopsisthaliana (Q9XFS9)、Menthaxpiperita (Q9XES0 )、Synechococcuselongatus (Q8DK30 )、Synechocystissp .PCC 6 80 3(Q5 5 6 6 3)、Nostocsp .PCC 71 2 0 (Q8YP4 9)、Synechococcusleopoliensis (Q9RKT1 )的一致性分别达到 95 %、94 %、80 %、78%、78%和 73%。结合蛋白质保守区、特征区以及进化树分析 ,证实该基因确为dxr基因 。
- 郑清平余龙江刘智李默怡向福杨秦
- 关键词：RT-PCR
- 日本血吸虫DNA多价疫苗pVIVO_2SjFABP-23的构建及其保护性免疫被引量：12
- 2006年
- 目的构建日本血吸虫多价DNA疫苗pVIVO2SjFABP-23,并观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法根据Sj FABP和Sj23的基因序列合成两对特异性引物,利用重组PCR技术将日本血吸虫Sj FABP和Sj23的基因片段进行拼接,得到融合基因SjFABP-23,再将该片段重组于p GEM-T载体中,进行PCR扩增及DNA序列测定。然后经双酶切将目的片段SjFABP-23克隆到pVIVO2的一个多克隆位点上转化E.coliGT 110获得重组质粒pVIVO2SjFABP-23,免疫小鼠进行免疫保护性实验。结果PCR扩增出一条大小约为1.1Kb的目的片段。免疫小鼠获得52.14%减虫率(P<0.01)和60.93%的减卵率(P<0.01),且均高于单价疫苗pVIVO2Sj23(P<0.05)。结论PCR成功扩增SjFABP-23的基因片段,血吸虫DNA多价疫苗pVI-VO2SjFABP-23构建成功,该疫苗在小鼠抗血吸虫感染中具有比单价疫苗pVIVO2Sj23更好的免疫保护作用。
- 李春艳余龙江刘智朱路朱晓华胡媛石佑恩
- 关键词：日本血吸虫脂肪酸结合蛋白多价DNA疫苗免疫保护
- 高山被孢霉Δ5脱饱和酶基因的分离与验证被引量：6
- 2005年
- 花生四烯酸(arachidonicacid)是人体的必需脂肪酸,具有独特的生物活性。Δ5脱饱和酶是花生四烯酸生物合成途径上的关键酶,以二高-γ-亚麻酸为底物,催化其第5位碳脱氢形成花生四烯酸。从花生四烯酸高产菌株高山被孢霉M6(Mortierellaalpina)中通过RT-PCR分离了可能的编码Δ5脱饱和酶完整的cDNA,其大小为1366bp,编码446个氨基酸。推导出的蛋白质含有Δ5脂酰脱饱和酶中保守的特征性结构域,包括该蛋白质N端典型的细胞色素b5结构域,以及3个保守的组氨酸盒。为验证该蛋白质的功能,将该基因片段克隆到穿梭表达载体pPIC9K中,获得的重组载体pPIC9K-D5通过电转化法转化到巴斯德毕赤酵母GS115中,利用G418耐受度筛选出高拷贝数的酵母转化子,在加入外源底物二高-γ-亚麻酸时,利用甲醇诱导酵母转化子表达外源基因。酵母转化子的油脂的气相色谱图谱中出现了一个花生四烯酸的特征峰,进一步对该峰进行气质联谱(GC-MS)分析,证实该峰是花生四烯酸。研究结果表明,从高山被孢霉M6中分离出Δ5脱饱和酶基因。
- 朱敏刘智余龙江朱路程华
- 关键词：花生四烯酸高山被孢霉
- 茉莉酸甲酯诱导下红豆杉细胞产生紫杉烷类物质群代谢轮廓分析被引量：9
- 2005年
- 红豆杉细胞培养物经甲醇提取和固相萃取粗分离,进行反相高效液相色谱分析,获得了约含13个与紫杉醇极性相关的化合物色谱图,通过质谱联用和对照品参照,归属了这些化合物组成。进一步利用茉莉酸甲酯(MJ)诱导细胞,比较这些组分在诱导前后的相对色谱峰面积变化,结果表明,所有紫杉烷组分的浓度在诱导后都提高,其中以taxchinin M及其结构类似物提高最显著,紫杉醇,B-Ⅲ和B-Ⅵ等比C14位取代的taxuyunnanine C及其衍生物的浓度增加幅度要大,提示MJ对紫杉醇合成中非有效乙酰化旁路代谢有促进作用,而对C14位取代物生成的旁路促进作用不明显。本文为紫杉醇的生物合成研究提供了新的思路和方法。
- 赵春芳余龙江刘智栗茂腾周蓬蓬李丽琴
- 关键词：紫杉烷
