刘凯
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：华西医科大学更多>>
- 发文基金：四川省卫生厅科研基金华西医院留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 食管瘤高发区肿瘤遗传易感性的研究被引量：4
- 1998年
- 目的：探讨食管癌高发区肿瘤遗传易感性的遗传基础。方法：应用病例对照配对调查及细胞遗传学技术，对四川省盐亭县食管癌高发区患者遗传度、染色体畸变率（CAR）、脆性部位（fra）及SCE频率、染色体端粒联合率等进行检测。结果：遗传度为18．20％；CAR、fra及SCE检出率高发家族成员为11.94±5．92％、6．9％及7．56±1．41／细胞，低发家族成员为5．71±3．91％、3．5％及5．24±0．92／细胞，正常人为5．92±3．42％、3．20％及4．91±151／细胞。高发家族与低发家族、正常人比较有显著差异（CARP＜0．01，fraP＜0．05，SCEP＜0．05）。染色体端粒联合率食管癌组为14．38％、正常对照组为9．38％，两者间具有显著差异（P＜0．01）。染色体端粒联合率食管癌组为14．38％、正常对照组为9．38％，两者间具有显著差异（P＜0．01）。结论：食管癌是与遗传因素密切相关疾病，其遗传易感性的遗传基础是染色体不稳定性的增高。
- 周宏远梁谋刘凯肖林陶德明
- 关键词：食管癌肿瘤遗传易感性流行病学
- 食管癌高发家族成员脆性部位，SCE与DNaseI敏感区的相关研究被引量：1
- 1995年
- 采用延长培养时间的低浓度对酸诱导及Ｂｒｄｕ替代２～４个细胞周期的方法及染色体原位切口移位技术，对３０例高发家族成员，２４例低发家族成员及２０例正常人进行脆性部位、ＳＣＥ及ＤＮａｓｅＩ敏感区的观察分析。结果表明：高发家族的脆性部位和ＳＣＥ检出率（６．９０％；７．５６±１．４１）明显高于低发家族（３．５０％；５．２４±０．９２）及正常人（３．２０％；４．８６±１．５１）Ｐ＜０．０５。ＳＣＥ发生在１６个高发染色体位点上，多居于染色体Ｇ显带的浅带区并与脆性部位、癌基因位点及ＤＮａｓｅＩ敏感区有一定的相关性。
- 周宏远刘凯高秀坤肖林陶德明
- 关键词：食管癌脆性部位SCE
- 干扰人ATP1B1基因对胃腺癌SGC-7901细胞增殖和迁移能力的影响被引量：4
- 2009年
- 背景与目的:Na+-K+ATP酶B1亚基基因ATP1B1在高分化的肿瘤细胞中表达高,低分化的表达低,并且ATP1B1的表达与细胞紧密连接和上皮细胞的极性有关。因此,我们构建了特异性干扰ATP1B1 mRNA的短发夹RNA,以探讨干扰ATP1B1对人胃腺癌细胞株SGC-7901增殖和迁移能力的影响。方法:构建特异性干扰ATP1B1 mRNA的短发夹RNA质粒表达载体,转染SGC-7901细胞,G418筛选阳性克隆细胞,RT-PCR和real-timePCR法检测ATP1B1 mRNA的表达。通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,以及克隆形成实验、Transwell小室迁移实验等方法观察ATP1B1对细胞增殖和迁移的影响。结果:瞬间转染后24h,sh150,sh295,sh562,sh765干扰位点及shNC对SGC-7901细胞ATP1B1mRNA的抑制率分别为(60.87±4.38)%,(44.93±2.24)%,(49.28±2.02)%,(52.17±2.60)%,(3±0.15)%,4个位点对ATB1B1 mRNA均有抑制效应。150位点对ATB1B1基因的抑制效应强于其它3个位点,用作后续实验。G418筛选后,获得了具有稳定干扰ATP1B1 mRNA效应的细胞株shATP1B1-7901,RT-PCR初步分析,sh150位点对ATP1B1-7901细胞的ATP1B1 mRNA的抑制率为(85.72±5.22)%,与阴性对照组的(3.3±0.22)%相比,P<0.05;Real-timePCR检测结果显示,shATP1B1-7901细胞中ATP1β1 mRNA的抑制率为(87.53±3.23)%,高于阴性对照组shNC-7901的(4.17±0.33)%,P<0.05。MTT法细胞增殖实验中,第三天后,shATP1B1-7901细胞的增殖率大于阴性对照组和空白对照组,经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义。流式细胞术结果显示,shATP1B1-7901的S期和G2/M期细胞比例增加,大于阴性对照组和空白对照组,P<0.05,差异有统计学意义,阴性对照组和空白对照组的周期分布差异无统计学意义。shATP1B1-7901稳定株细胞的克隆形成率为(68.50±2.65)%,大于阴性对照组的(50.00±2.53)%及空白对照组的(52.50±2.11)%,P<0.05。shATP1B1-7901稳定株细胞的迁移率(2.80±0.02)%,大于阴性对照组的(1.15±0.05)%和空白对照组的(1.25±0.02)%,P<0.05�
- 刘凯张洁任婧婧王修杰杨洪亮林苹
- 关键词：胃肿瘤腺癌细胞RNA干扰细胞增殖细胞迁移
- ATP1B1协同阿霉素抑制乳腺癌细胞MCF-7生长及逆转耐药的作用被引量：1
- 2009年
- 背景与目的:Na+-K+ATP酶(Na+-K+泵)是细胞能量转换的重要系统,可能与肿瘤转移有关,其B1亚基基因ATP1B1在高分化的肿瘤细胞中表达高,低分化细胞中表达低。本实验研究ATP1B1协同阿霉素(ADM)在人乳腺癌细胞株MCF-7和其耐药株MCF-7/ADM中的作用以及其逆转耐药效应的影响。方法:将重组质粒PEGFP-ATP1B1转染到MCF-7和MCF-7/ADM细胞,MTT法检测质粒及其B1亚基因沉默后ADM抑瘤效应,荧光显微镜和流式细胞术分析细胞内药物荧光强度,定磷法检测ATP酶活性,RT-PCR和real-time PCR检测MDR1 mRNA的表达,Western blot法检测P-gp蛋白的表达。结果:转染PEGFP-ATP1B1的MCF-7和MCF-7/ADM细胞对ADM的敏感性相对阴性对照ADM-C3组(pEGFP-C3空载体转染)和空白对照ADM-RPMI-1640组均明显增加,且ADM各浓度梯度ADM-ATP1B1组与ADM-RPMI-1640组比较差异有统计学意义(P<0.05);而B1亚基沉默后阴性对照组ADM-shNC,相对实验组ADM-shATP1B1和空白对照ADM-RPMI-1640组细胞对ADM的敏感性明显偏高。荧光显微镜下观察ADM-ATP1B1组MCF-7和MCF-7/ADM细胞ADM红色荧光均高于对照组。流式细胞术显示,ADM-ATP1B1组MCF-7细胞中ADM平均荧光强度较对照组高(P<0.05),ADM-ATP1B1组MCF-7/ADM细胞中ADM平均荧光强度高于对照组(P<0.05)。MCF-7和MCF-7/ADM细胞的ADM-ATP1B1组ATP酶活性均高于ADM-RPMI-1640组(P<0.05),而ADM-C3组与ADM-RPMI-1640组相比差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR和real-time PCR检测结果显示,MCF-7/ADM细胞ADM-ATP1B1组MDR1 mRNA相对表达水平与两对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。Western blot显示P-gp蛋白的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ATP1B1对ADM抑制乳腺癌细胞生长具有协同作用,并可逆转耐药细胞MCF-7/ADM对ADM的耐药效应,其机理与MDR1基因无明显的相关性,可能是通过与Na+-K+ATP酶相关的一种新途径而发挥作用的。
- 齐彦宇刘凯张洁李凯任婧婧林苹
- 关键词：NA^+-K^+阿霉素乳腺肿瘤MCF-7细胞逆转耐药
