于晓明
- 作品数：60 被引量：32H指数：4
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 一种检测猪初乳中抗PEDV特异性IgA抗体的夹心ELISA试剂盒
- 本发明提供一种检测猪初乳中抗PEDV特异性IgA抗体的夹心ELISA试剂盒，涉及生物检测试剂领域。分泌抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株10A4，保藏号为：CCTCC NO:C201779。本发明还提供所述杂交瘤...
- 张浩明杨利于晓明陈瑾郑其升侯继波
- 一种双功能口蹄疫免疫增强剂及其制备方法和应用
- 本发明公开O‑羧甲基‑N‑胍基壳聚糖，本发明还公开双功能免疫增强剂，双功能免疫增强剂含有O‑羧甲基‑N‑胍基壳聚糖10~500μg/mL、胞壁酰二肽10‑100μg/mL、磷酸三苯酯4~30mg/mL、透明质酸1‑6μg...
- 侯立婷秦竹陈瑾郑其升杜露平于晓明张元鹏侯继波
- 文献传递
- 一种介导FMDV血凝的蛋白、编码基因及其应用
- 本发明提供一种介导FMDV血凝的蛋白、编码基因及其应用，属于生物技术领域。所述介导FMDV血凝的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供所述蛋白的编码基因，携带该蛋白的编码基因的载体、重组菌，以及所述...
- 杨利程海卫张浩明郑其升陈瑾乔绪稳侯立婷杜露平秦竹李兰于晓明张元鹏王义伟
- 一种兽用疫苗的皮内免疫增强剂及其应用
- 本发明提供一种兽用疫苗的皮内免疫增强剂及其应用，涉及生物制药领域。所述兽用疫苗的皮内免疫增强剂，是含有硫酸软骨素、壳寡糖、全反式维甲酸脂质体和环二鸟苷酸的水溶液。所述皮内免疫增强剂的制备方法如下：将硫酸软骨素、壳寡糖、全...
- 于晓明郑其升陈瑾侯立婷乔绪稳张元鹏侯继波
- CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达
- 2023年
- 有研究证实,霍乱毒素(CT)A1亚基与葡萄球菌G蛋白的D肽偶联构建的融合蛋白CTA1-DD具有良好的佐剂效果。为了获得重组CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中的表达,将CTA1-DD基因连接到表达载体pHT43中,构建重组枯草杆菌表达载体pHT43-CTA1-DD。将重组载体转化到枯草芽胞杆菌WB600中,用IPTG诱导重组菌表达,发酵液离心后取上清液,通过SDS-PAGE和Western blot方法分析蛋白表达情况。发酵上清液经Ni-IDA琼脂糖树脂纯化,与流感病毒HA抗原混合后共同滴鼻免疫小鼠后采集小鼠血清和支气管肺泡灌洗液检测IgG和IgA的抗体水平。结果显示:重组CTA1-DD蛋白在枯草芽胞杆菌中能够分泌表达,在发酵罐中发酵36 h情况下蛋白表达量最高,目的蛋白大小在42 kDa左右,蛋白产量最高能到700μg/mL,Western blot检测目的蛋白正确表达。重组蛋白经过Ni-IDA琼脂亲和层析纯化后与HA抗原混和滴鼻免疫小鼠,ELISA结果显示CTA1-DD蛋白组针对HA抗原能够诱导更高的血清IgG和黏膜IgA抗体水平,说明枯草芽胞杆菌表达的CTA1-DD蛋白具有佐剂活性。试验结果为进一步研究CTA1-DD蛋白在黏膜佐剂的大规模生产应用奠定了基础。
- 张元鹏侯立婷杜露平于晓明李兰杨利张浩明王义伟乔绪稳程海卫秦竹陈瑾陈瑾
- 关键词：枯草芽胞杆菌黏膜免疫
- 靶向B细胞的口蹄疫GHloop多肽抗原的制备及免疫效力鉴定
- 2023年
- 本研究将葡萄球菌A蛋白人工合成类似物的二聚体(DD)与口蹄疫的GHloop串联,按照大肠杆菌偏好性密码子优化合成GHloop-DD,并评价其免疫原性。将GHloop-DD插入到原核表达载体pET-32a中,鉴定阳性后转入E.coli BL21进行诱导表达。利用SDS-PAGE与Western blot对目的基因表达产物的可溶性进行分析。利用镍亲和层析柱纯化目的蛋白;利用BCA试剂盒测定重组蛋白的浓度,将重组蛋白(2.5μg/只)与206佐剂乳化,制备疫苗,免疫5周龄小鼠,同时设商品化合成肽苗对照与空白对照。免疫后28 d采集试验小鼠血清,利用口蹄疫病毒多肽ELISA抗体检测试剂盒检测免疫小鼠血清的抗体水平;利用流式细胞仪测定淋巴结B细胞的数量及骨髓中长寿浆细胞的数量;利用荧光定量检测相关趋化因子的表达水平;利用细胞因子检测试剂盒检测脾脏淋巴细胞刺激后上清液中的细胞因子的水平。SDS-PAGE结果表明,GHloop-DD基因在大肠杆菌中以可溶形式获得高水平表达;Western blot结果显示,表达的重组蛋白能够与特异性抗体发生反应。免疫试验结果表明,GHloop-DD不但能够刺激免疫小鼠产生高水平的多肽特异性ELISA抗体,而且能够提高淋巴结B细胞的数目及相关趋化因子水平,使骨髓中长寿浆细胞的数量和脾脏淋巴细胞刺激后上清液中细胞因子的水平显著提高。以上结果表明,本研究制备的GHloop-DD具有良好的免疫原性,为口蹄疫多肽疫苗的研制提供了新的方向。
- 侯立婷张媛媛于晓明于晓明张元鹏杜露平乔绪稳张元鹏郑其升程海卫
- 关键词：体液免疫B细胞
- 基于连接肽的双特异纳米抗体及其编码基因和应用
- 本发明公开一种基于连接肽的双特异纳米抗体及其编码基因和其应用，所述基于连接肽的双特异纳米抗体是以新型连接肽将不同的特异性的纳米抗体的基因连接后获得目的基因片段进一步重组表达获得的目的蛋白，所制备的基于连接肽的双特异纳米抗...
- 程海卫杨利郑其升陈瑾杜露平侯立婷于晓明乔绪稳张元鹏秦竹李兰王义伟张浩明
- 含免疫增强剂CVC1302口蹄疫灭活疫苗缩短免疫应答窗口期机制的研究被引量：1
- 2021年
- 为探究免疫增强剂CVC1302缩短口蹄疫灭活疫苗(KV)免疫应答窗口期的机制,本研究将灭活的O型口蹄疫病毒(FMDV)与CVC1302按照1.50配比后,与ISA206佐剂乳化制备疫苗(KV-CVC1302);将灭活的FMDV与ISA206佐剂乳化制备疫苗(KV),将上述疫苗分别免疫6周龄BALB/c雌性小鼠。免疫后7 d、28 d、56 d、90 d、120 d、150 d和180 d采血分离血清,利用O型FMD液相阻断ELISA(LBP ELISA)试剂盒检测各组小鼠血清FMDV特异性抗体水平。免疫后1 d,取注射位点肌肉,分别利用qPCR和ELISA检测其中细胞趋化因子的转录及表达水平。免疫后1 d、3 d、5 d和7 d分别采集注射位点肌肉及腹股沟淋巴结,制备单个淋巴细胞,利用流式细胞仪检测注射位点肌肉和腹股沟淋巴结的抗原递呈细胞(APC)[树突状细胞(DC)、巨噬细胞(Mph)、单核细胞(Mo)]的数量;免疫后1 d,利用流式细胞仪检测注射位点肌肉中DC的活化情况。结果显示,KV-CVC1302组小鼠FMDV特异性抗体水平、注射位点趋化因子转录及表达水平均显著高于KV组(p<0.01、p<0.001);且注射位点APC的数量及DC的活化水平也显著提高(p<0.001),该组小鼠腹股沟淋巴结APC的数量也明显高于KV组(p<0.05、p<0.01或p<0.001)。综上结果表明,CVC1302通过增强KV于注射位点诱导产生趋化因子的能力,募集大量的APC,进而对FMDV进行有效的捕获加工和递呈,转运至腹股沟淋巴结,诱导B细胞的形成,并分泌高水平抗体,从而缩短免疫应答窗口期。本研究首次证实CVC1302是在疫苗诱导免疫应答的启动阶段发挥作用,其通过募集活化的APC捕获更为有效的抗原以激活免疫系统,缩短了免疫应答窗口期,为后续研制新型免疫增强剂提供了新思路。
- 杜露平章晨昕侯立婷侯立婷郑其升于晓明
- 关键词：免疫增强剂O型口蹄疫病毒
- 用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用
- 本发明提供用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用，涉及到疫苗制造领域。该复合免疫增强剂，含有羧甲基茯苓多糖、透明质酸和α‑GC。本发明还提供所述复合免疫增强剂在猪伪狂犬灭活疫苗中的应用。本发明复合免疫增强剂，能够提...
- 于晓明陈瑾侯立婷张元鹏郑其升侯继波
- 一种猪流行性腹泻病毒、灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种猪流行性腹泻病毒、灭活疫苗及其制备方法，属于生物工程领域。猪流行性腹泻病毒NJ株，其保藏登记号为：CGMCC NO.13283。本发明提供该毒株在制备猪流行性腹泻疫苗中的应用、制备该毒株病毒液的方法及获得的...
- 陈瑾郑其升于晓明侯立婷侯继波
