黄发灿
- 作品数：2 被引量：17H指数：2
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 抗乙型脑炎病毒单克隆抗体轻链可变区基因的分离和鉴别被引量：4
- 1993年
- 为了构建抗乙型脑炎病毒的人—鼠嵌合抗体,以分泌抗乙型脑炎病毒单克隆体的51-8杂交瘤细胞株为材料,以J_κ和V_κ为探针,从λEMBL-3为载体构建的基因文库中分离有功能性的轻链可变区基因。经3次复筛得到19个阳性噬菌斑。将阳性噬菌斑的DNA重组体和小鼠肝DNA分别用BamH I酶切后进行分析,在分析的8个重组体中,其中5个含有2.8kb片段,而肝DNA含有8.9kb、5.6kb、3.6kb及3.1kb4个片段,没有2.8kb片段。由于肝DNA的4个片段是未经重排的种系基因,因此可以推断重组体中的2.8kb片段是经过重排的轻链可变区基因。为了进一步鉴定,又从中选出3个含有2.8kb片段的重组噬菌斑,以V_κ和J_κ作探针分别进行点杂交,结果都为阳性,进一步说明了2.8kb片段是经过重排的轻链可变区基因。将这一2.8kb片段克隆到pUC19中,得一重组子,命名为pVLD24。利用pCR扩增技术从pVLD24中扩增出预期的334 bp轻链V基因。综合证实了所鉴别得到的功能性轻链可变区基因是完整的,并且用不同的限制性内切酶绘制了这一功能性基因的酶切图谱。
- 黄发灿黄华梁熊曦明桂进熊伟林晴宋海燕陈伯权
- 关键词：乙型脑炎病毒单克隆抗体轻链
- 枸杞转基因植株的再生被引量：13
- 1991年
- 本文报道一个快速简便的枸杞转化再生系统。宁夏枸杞的幼茎外植体,能被含非致瘤性Ti质粒载体的根癌农杆菌感染。在该载体双向启动子的一端连有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化植物细胞。把选择诱导培养基上形成的愈伤组织转到选择分化培养基后能很快分化出芽点,继而长成完整的小植株。对再生植株的NPT-Ⅱ酶活性检测及DNA分子杂交表明:外源基因已整合到枸杞细胞的核基因组上,并能在植株水平表达出相应的性状。
- 王慧中黄发灿李安生邵启全牛德水
- 关键词：枸杞转基因植株
