鲁芳
- 作品数：48 被引量：67H指数：4
- 供职机构：四川省人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 一个中国Bardet-Biedle综合症家系与BBS5位点连锁被引量：3
- 2008年
- [目的]对一个中国Bardet-Biedl综合症(Bardet-Biedl Syndrome,BBS)家系进行已知12个BBS位点/基因的基因型遗传连锁分析,找出与之连锁的位点。[方法]对中国四川省的一个Bardet-Biedl综合症家系进行临床检查并对其进行抽血提取DNA,然后用荧光标记的微卫星标记(STR遗传标记物)进行12个BBS位点的遗传连锁分析。[结果]经临床的检查后,本Bardet-Biedl综合症家系有1男性患有Bardet-Biedl综合症,临床症状包括视网膜营养不良(视网膜色素变性),多指,智力低下和肥胖,缺乏第二性征,患者睾丸和生殖器小。基因型分析和纯合子遗传连锁分析发现该家系的致病基因位点与BBS5完全连锁,而与其他已知的11个BBS位点/基因无连锁。[结论]发现了一个中国Bardet-Biedl综合症家系,经基因型分析和纯合子遗传连锁分析,发现该家系的疾病基因连锁在BBS5位点。现在正对该家系的BBS5基因进行序列分析。
- 刘兵杨洋林婴张本鲁芳杜琼刘晓琦尹一兵杨正林
- 检测老年黄斑变性疾病的试剂盒
- 本发明提供了检测老年黄斑变性疾病的试剂盒，可用于早期监控和检测AMD高危人群，实施早期预防和治疗，减少其视力损害。本发明试剂盒以LOC387715基因与HTRA1基因间缺失/插入变异(位于HTRA1基因上游4340碱基处...
- 杨正林张康鲁芳林婴
- 文献传递
- 显性视网膜色素变性家系已知连锁位点的筛查
- 2009年
- 目的用连锁分析法对1个中国人显性视网膜色素变性家系进行已知位点的筛查，寻找其致病基因。方法随机选取已知致病基因上下约5cM（JB）范围内的27对微卫星标记，确立单倍型，用两点法计算最大优势对数（Lodscore）值。结果所选微卫星标记与该家系表型间最大Lod值小于1。结论基本排除由已知常染色体显性遗传视网膜色素变性的候选基因导致该家系的病变。
- 刘伟鲁芳乔利峰沙智全刘小琦马誓唐新常晋霞杨正林叶彬
- 关键词：视网膜色素变性常染色体显性微卫星标记
- 一种检测病理性近视的筛查试剂盒
- 本发明公开了一种检测病理性近视的试剂盒，包括任选的用于检测BAI3基因rs2073135变异、CCDC149基因rs4697489变异、rs248014变异、rs1105191变异、rs1943049变异或/和TNC基因...
- 杨正林石毅鲁芳张丁丁刘小琦林婴杨季云
- 文献传递
- 亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中OprD基因突变研究
- 目的:研究铜绿假单胞菌外膜孔蛋白OprD基因突变在亚胺培南耐药机制中的作用。
方法:对来自临床样本的34株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌用PCR方法直接扩增OprD基因，扩增产物纯化后进行DNA双向序列分析，测得序列...
- 颜英俊喻华周忠华鲁芳刘华乔宁黄文芳
- 关键词：铜绿假单胞菌亚胺培南
- 文献传递
- 重组肝细胞生长因子质粒的构建及其在成骨细胞中的表达
- 2007年
- 目的构建人肝细胞生长因子(hHGF)真核表达质粒,探讨重组质粒对体外培养胎兔成骨细胞增殖分化的影响,为转基因治疗骨科疾病提供实验基础。方法RT-PCR扩增人肝脏中hHGF全长cDNA片段,克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中,用脂质体法将pcDNA3.1(+)-hHGF质粒转染成骨细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,用免疫荧光染色检测hHGF基因在成骨细胞内的表达;MTT法和FCM检测pcDNA3.1(+)-hHGF转染后对细胞增殖和细胞周期的影响;采用RT-PCR和ELISA方法检测hHGF在成骨细胞中的表达。NPP法检测碱性磷酸酶合成情况。结果成功构建hHGF真核表达质粒,免疫组化和RT-PCR检测显示转染成骨细胞后细胞内hHGFmRNA呈现高水平表达;MTT法和FCM检测显示重组质粒转染后能促进成骨细胞的增殖,S期细胞比例增多;ELISA法检测到hHGF在细胞中有分泌性表达。转染重组质粒的成骨细胞合成碱性磷酸酶能力显著提高。结论成骨细胞经基因转染后可以表达hHGF,外源性hHGF基因能够刺激成骨细胞增殖、分化及成骨活性。
- 党洪胜李伟沈彬杨静周宗科裴福兴鲁芳彭文珍
- 关键词：肝细胞生长因子成骨细胞基因转染
- PER1与RACK1蛋白作用位点分析被引量：3
- 2007年
- 目的筛选人下丘脑视交叉上核(SCN)区域内与PERIOD1(PER1)相互作用的新蛋白,研究RACK1与PER1的作用特点,明确其结合的关键结构域。方法采用酵母双杂交方法,筛选得到人SCN区域内与PER1-PAS结构域相互作用的新蛋白,并构建5种表达不同长度RACK1片段的酵母文库质粒与PER1诱饵质粒共转染酵母AH109进行杂交,通过营养缺陷筛选、报告基因检测获得阳性克隆,并采用体外转录、免疫共沉淀实验证实阳性克隆蛋白间的相互作用。结果酵母双杂交筛选得到人SCN区域内表达RACK1蛋白的克隆,重组RACK1表达质粒与PER-PAS诱饵质粒进行酵母双杂交筛选后得到三个阳性克隆:RACK1(WD1-7)、RACK1(WD4-7)和RACK1(WD5-7),β-半乳糖苷酶测试阳性证实报告基因表达,免疫共沉淀结果显示阳性克隆与PER1蛋白间存在相互作用。结论RACK1与PER1存在直接相互作用,RACK1含有7个WD40结构域,本研究发现与PER1结合的最小区域位于、、三个WD40结构域,提示其碳端序列为其结合的关键部位。
- 鲁芳胡丽娟刘德松汪宇辉刘彦友甘露薛建新万朝敏王正荣
- 关键词：近日节律蛋白相互作用RACK1酵母双杂交
- 穿膜肽mCLOCK’s DNA-BIND作为药物载体的生物安全性初步评价
- 2007年
- 目的研究一种新的来源于节律蛋白mCLOCK's DNA结合域的穿膜肽mCLOCK's DNA-BIND(CDB)作为药物携带载体的生物安全性。方法化学合成穿膜肽CDB。体外采用Phorbol12-Myristate13-acetate(PMA)诱导NIH3T3细胞的近日节律。于诱导后不同时间点,CDB与小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞共孵育,RT-PCR检测其对近日节律核心分子mPeriod1(mPer1)基因表达的影响。此外,培养的NIH3T3直接与CDB共孵育12h和24h后,MTT法检测其对细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对细胞周期和凋亡的作用。结果CDB没有明显影响PMA诱导的mPer1节律基因表达。此外,CDB不干扰NIH3T3细胞增殖及生长周期,亦无明显的诱导凋亡作用。结论CDB对细胞近日节律、细胞增殖、生长周期及细胞凋亡均无明显毒副效应,可望作为一种安全有效药物载体,并具有广泛的临床应用前景。
- 甘露薛建新刘延友汪宇辉鲁芳王正荣
- 关键词：近日节律穿膜肽CLOCK基因细胞周期
- clock基因干扰质粒的构建及干扰效率测定
- 2009年
- 目的:构建clock基因的干扰质粒,为深入研究clock基因在信号转导通路中的作用提供有效手段。方法:采用M-folder生物软件选择2个clock基因干扰位点,并根据3个干扰片段及一个阴性对照片段,定向克隆到pGenesil-1干扰载体并测序验证。将干扰质粒及对照质粒分别转染至NIH3T3细胞,并通过检测RT-PCR产物量以获得干扰效率。结果:RT-PCR产物检测结果显示干扰质粒pGenesil-1/clock-Ⅱ干扰效率最高,其clock表达量降低了74%,而pGenesil-1/clock-Ⅰ干扰组clock表达量只降低了2%。结论:成功构建了对clock基因具有显著干扰效率的pGenesil-1/clock-Ⅱ干扰质粒,为进一步研究clock基因的功能奠定了基础。
- 付天明鲁芳刘延友汪宇辉江舟甘露薛建新邹晏王正荣
- 关键词：时间生物学生物节律干扰质粒RNA干扰RT-PCRCLOCK基因
- 检测老年黄斑变性疾病的试剂盒
- 本发明提供了检测老年黄斑变性疾病的试剂盒，可用于早期监控和检测AMD高危人群，实施早期预防和治疗，减少其视力损害。本发明试剂盒以HTRA1基因512G→A突变及其相关位点/基因为目标，与AMD的关联度高，协同CHF基因突...
- 杨正林张康鲁芳
- 文献传递
