高元吉
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国科学院北京基因组研究所更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Split内含肽高效介导转录激活因子的胞内融合被引量：2
- 2008年
- Split内含肽可以通过反式剪接作用介导两个蛋白片段的共价连接.基于这一原理,利用来自于Synechocystis sp.strain PCC6803的天然split内含肽DnaEs作为蛋白剪接元件,通过其反式剪接作用介导了四环素阻遏蛋白(TetR)与1-型单纯疱疹病毒(HSV)的转录活化域(VP16)的共价连接,形成融合蛋白TV.应用RT-PCR技术以及荧光显微镜成像技术分别在mRNA转录水平与蛋白表达水平上研究了DnaEs的剪接活性,结果证明在细胞内DnaEs可以介导融合蛋白TV的产生.同时也对融合蛋白TV的转录活性进行了研究,并将其与通过重组DNA表达得到的同种蛋白的转录活性进行了比较,发现DnaEs介导的融合蛋白与基因重组得到的同种蛋白转录活性相似.此外,还研究了四环素类似物Dox对TV转录活性的调控,结果表明Dox可以明显抑制其转录活性.DnaEs介导转录激活因子融合,并启动下游报告基因表达的实验方法,为深入开展DnaEs的应用研究提供了重要实验依据.
- 高元吉赵传科尹琪王慧曾新王少鹏于文文栗世铀
- 关键词：转录激活因子
- 内含肽介导的报告基因系统在检测GPCRs与β-arrestin相互作用中的探索性应用研究
- G蛋白偶联受体(GPCRs)活化后，G蛋白偶联受体激酶使其磷酸化以及β-arrestin结合引发脱敏内化过程是绝大多数GPCRs所共有的途径，因此以GPCRs-β-arrestin相互作用为基础建立的GPCRs药物筛选模...
- 高元吉
- 关键词：内含肽
