马克君
- 作品数：12 被引量：30H指数：3
- 供职机构：兰州大学第二医院更多>>
- 发文基金：甘肃省科技支撑计划中央高校基本科研业务费专项资金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰下调骨肉瘤Saos-2中MBP-1表达及增殖转移凋亡的影响
- 施鑫鹤耿哲施星臣马克君朱宏文任雯周雅丽李菲菲
- 该研究课题通过RNA干扰下调骨肉瘤Saos-2细胞中抑癌基因MBP-1的表达，已经成功获得了一些确定在骨肉瘤细胞增殖、转移与凋亡方面的实验结果。明确了MBP-1对肿瘤细胞的增殖、转移及凋亡等的影响。进一步揭示MBP-1在...
- 关键词：
- 关键词：骨肉瘤细胞增殖分子生物学
- 雌激素受体α(ESR1)基因PvuⅡ和XbaⅠ位点基因多态性与HBV慢性感染的相关性研究被引量：7
- 2018年
- 目的:探讨雌激素受体ESR1(Estrogen Receptor alpha gene)基因的PvuⅡ(rs2234693)和XbaⅠ (rs9340799)两个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)位点的基因多态性与乙型肝炎病毒HBV(Hepatitis B Virus)慢性感染的相关性,为控制HBV持续感染提供新的思路和科学依据。方法:选择107例慢性乙型病毒性肝炎患者为病例组及107例同期体检的健康人群为对照组,基于高分辨熔解曲线技术(High Resolution Melting,HRM)建立PCR-HRM分子诊断方法,检测其雌激素受体ESR1基因两个SNP位点rs2234693(T>C)和rs9340799(A>G)的基因多态性,并通过基因测序进一步验证,探讨上述两个SNP位点与HBV慢性感染的相关性。结果:病例组和健康对照组ESR1基因rs2234693(T>C)位点的基因型频率比较差异具有统计学意义(P<0.05),而两组间rs2234693位点等位基因频率比较差异没有统计学意义(P>0.05);病例组和健康对照组间ESR1基因rs9340799(A>G)位点的各基因型频率差异具有统计学意义(P<0.05),慢性乙肝病例组GG基因型明显升高,两组间rs9340799位点等位基因频率差异亦具有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示rs9340799位点的G基因可增加HBV慢性感染的发病风险,A基因可降低HBV慢性感染的发病风险。结论:雌激素受体基因ESR1的rs9340799 (A>G)位点的GG基因型和G等位基因可能是HBV感染慢性化的遗传易感基因,GG基因型与HBV的慢性感染具有一定的相关性。
- 任雯任雯王霞李平马克君
- 关键词：雌激素受体
- TNF-α及其受体基因多态性与类风湿性关节炎易感性和血清学指标相关性分析被引量：7
- 2012年
- 目的探讨TNF-α及其受体基因多态性与中国西北地区汉族人群类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)易感性及其血清学指标的相关性。方法利用高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)技术对452例RA患者和匹配的356例正常对照人群的TNF-α及其受体6个SNP位点(TNFA-857C>T、TNFA-863C>A、TNFA-308G>A、TNFA-238G>A、TNFR1-383A>C、TNFR2-exonT>G)的基因多态性进行病例-对照研究。此外,采用临床常规方法测定RA患者的抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)和类风湿因子(RF),分析其与6个SNP位点的相关性。结果 TNFA-308GA和-863CA基因型在RA病例组和正常对照组中频率分布差异有统计学意义(P=0.001,P=0.002),TNFA-238GA、TNFA-238AA及TNFR2-exonTG、TNFR2-exonGG基因型在两组间频率分布差异无统计学意义(P=0.701,P=0.999,P=0.825,P=0.330)。由TNFA 3个位点构成的单倍型-238G/-308A/-863C(GAC)、-238G/-308G/-863A(GGA)和-238G/-308G/-863C(GGC)在两组间的频率分布差异均有统计学意义(P=0.016,P=0.033,P=0.023)。TNF-α及其受体基因多态性与RA血清学指标(RF、anti-CCP)未见明显相关性。结论 TNFA-308GA和TNFA-863CA与中国西北地区汉族人群RA易感性相关;TNFA单倍型GAC、GGA和GGC与RA易感性相关;TNF-α及其受体基因多态性与RA患者血清学指标未见明显相关性。
- 郭心灵尤崇革王丽萍马克君周雅丽施鑫鹤李菲菲郜莉娜
- 关键词：类风湿性关节炎疾病易感性血清学
- 高分辨熔解技术检测类风湿关节炎患者IL-1β和IL-1Ra基因多态性
- 2012年
- 目的探讨IL-1β和IL-1Ra基因多态性与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)易感性及其血清学指标的关系。方法应用高分辨率熔解(high resolution melting,HRM)技术对452例RA患者和360例对照进行IL-1β和IL-1Ra基因多态性的病例-对照研究,并分析IL-1β和IL-1Ra基因多态性与血清学指标的相关性。等位基因频率比较采用SPSS软件,单倍型构建采用在线SHEsis软件。结果成功建立了IL-1B-511、-31、+3954和IL-1RN(rs4251961)4个位点的PCR-HRM检测方法。结果显示在女性中,IL-1B+3954位点等位基因频率在病例组和对照组之间存在有统计学差异(χ2=5.0,P=0.03),IL-1B-31位点等位基因频率和单倍型IL-1B-511*T/IL-1B-31*C/IL-1B+3954*C/IL-1RN*T(TCCT)在抗-MCV阳性组和阴性组之间存在统计学差异(χ2=5.0,P=0.02;χ2=5.3,P=0.02),单倍型IL-1B-511*T/IL-1B-31*C/IL-1B+3954*C/IL-1RN*C(TCCC)在RF、抗CCP和抗MCV 3个指标均为阳性和3指标非全阳性的2组之间存在统计学差异(χ2=5.1,P=0.02)。结论 PCR-HRM技术是一种值得推广的常规化基因分型新方法。IL-1B+3954*C与女性RA易感性相关,IL-1B-31*C和单倍型TCCT与女性抗MCV阳性相关,单倍型TCCC与女性血清学指标全阳性相关。
- 李菲菲尤崇革王丽萍呼志斌马克君周雅丽施鑫鹤郜莉娜
- 关键词：白细胞介素-1Β白细胞介素-1受体拮抗剂类风湿关节炎基因多态性
- RNA干扰下调MBP-1对骨肉瘤Saos-2细胞生物学的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨c-myc启动子结合蛋白1(MBP-1)基因沉默对人骨肉瘤Saos-2细胞生长的影响。方法实验分为3组:正常对照组(未转染骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染错义序列组)和沉默组(转染MBP-1 sh RNA组)。设计2条MBP-1基因的RNA干扰片段及1条阴性对照si RNA,并与p SIREN-retro Q质粒连接。将重组p SIREN-retro Q质粒通过Lipofectamine 2000脂质体转染骨肉瘤Saos-2细胞。实时PCR和Western blot分别检测MBP-1表达。CCK-8法对MBP-1沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长进行检测。Western blot检测对照组和沉默组cyclin D1和cyclin E的表达。结果通过PCR扩增及测序,说明已成功构建MBP-1沉默及对照重组p SIREN-retro Q质粒。实时PCR结果显示,沉默组MBP-1 m RNA相对表达量与对照组相比显著下调(P<0.05)。Western blot结果显示,沉默组MBP-1蛋白表达量与对照组相比也显著下调。CCK-8法结果表明,沉默组细胞在48、72和96 h时增殖能力均比对照组显著升高(P<0.05)。沉默组cyclin D1和cyclin E的表达显著高于对照组(P<0.05)。结论 MBP-1基因沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长被明显促进,为寻找骨肉瘤基因治疗新靶点打下基础。
- 施鑫鹤耿晢施星臣马克君朱宏文任雯周雅丽
- 关键词：RNA干扰
- 宝肾方胶囊制备工艺优化被引量：3
- 2019年
- 目的优化宝肾方胶囊的水煎提取制备工艺。方法以浸膏得率、大黄素含量和黄芪多糖含量为指标,采用L9(34)正交试验优选宝肾方胶囊最佳水煎提取制备工艺。结果水煎提取制备工艺影响因素的影响强度依次为提取次数(C)>提取时间(B)>加水倍数(A),最佳制备工艺条件为加16倍量的纯化水,水煎提取4次,每次2 h。结论优选的制备工艺操作简单,合理可行。
- 秦龙李平马克君马克君
- 关键词：大黄素黄芪多糖正交试验
- 肿瘤药物基因组学临床应用研究进展
- 目的：综述药物基因组学在肿瘤药物治疗中的临床应用进展.方法：对近年来肿瘤药物临床应用过程中的药物基因组学研究进行系统检索,并分析、归纳和总结.结果：肿瘤药物基因组学是药物基因组学的重中之重,发现了许多影响化疗药物药效和毒...
- 周雅丽李平马克君
- 关键词：肿瘤药物基因组学合理用药药效学毒性反应
- 荧光染料 SYTO13用于高分辨熔解曲线技术 SNP 基因分型的评价被引量：3
- 2017年
- 目的：评价荧光染料SYTO13在高分辨熔解曲线技术（ HRM）检测单核苷酸多态性（ SNP）位点的基因分型能力和临床适用性。方法实验性能验证。选择经测序确认rs3125734 C＞T （Ⅰ类SNP ）、rs255758 A＞C（Ⅱ类SNP）和rs688C＞T三个位点基因型的样本36例，以商业化HRM染料LCGreen Plus为对照，进行SYTO13对Ⅰ类和Ⅱ类SNP以及rs688C＞T位点的长片段扩增（107 bp）与短片段扩增（52 bp）基因分型能力的评价。基因分型能力以野生型与纯合突变型的Tm差值ΔTm表示，独立样本t检验比较野生型和纯合突变型的Tm均值，两种染料之间检测能力的比较分析采用配对t检验。临床适用性以随机选取已测序分型的35例样本进行批量均相检测来评价。结果SYTO13能够清楚直观地对Ⅰ类和Ⅱ类SNP进行基因分型（ΔTmclas Ⅰ＝0．36±0．05，tclas Ⅰ＝14．827， Pclas Ⅰ＝0．000；ΔTmclas Ⅱ＝0．42±0．110，tclas Ⅱ＝9．539，Pclas Ⅱ＝0．000）。均相检测时SYTO13对Ⅰ类SNP的基因分型直观性更好（ΔTmSYTO13＝0．39±0．027），而对短片段扩增产物基因分型效果不佳。临床适用性评价结果显示SYTO13对长片段扩增的Ⅰ类和Ⅱ类SNP除个别离群样本外均能准确基因分型，离群样本经复查后也能准确分型。结论 SYTO13可作为HRM染料准确地对长片段扩增的Ⅰ类和Ⅱ类SNP位点进行基因分型，适合于临床常规应用。（中华检验医学杂志，2017，40：88－94）
- 王倩闫雯沈明辉马克君郜莉娜尤崇革
- 关键词：基因分型技术荧光染料高分辨率熔解曲线
- 基于高分辨熔解技术进行单核苷酸多态性基因分型的方法学评价被引量：8
- 2012年
- 目的评价高分辨熔解(HRM)技术进行单核苷酸多态性(SNP)基因分型的检验性能。方法以SNP位点rs1205C>T和rs4353A>G为例,采用盲法对361例已分型确认样本进行PCR-HRM检测评价其特异性和灵敏度;通过重复试验评价其重复性和再现性。稳健性评价主要考察DNA模板量和扩增循环数对PCR-HRM检测的影响。结果 PCR-HRM法检测361例标本的rs1205C>T和rs4353A>G两个SNP位点,结果除5例样本的熔解曲线发生飘移接受复查外,其余标本均一次直接基因分型;所有标本的最终分型结果完全正确即灵敏度和特异性达到100%。两个位点的10次批内和3次批间重复试验均显示PCR-HRM法的重复性和再现性良好。rs1205C>T和rs4353A>G的野生型与纯合突变型样本熔解峰Tm值的变异系数分别为0.7%与0.8%和0.6%与0.5%;统计学分析显示每个位点的两种纯合型样本Tm值之间均存在显著性差异(P<0.001),即可明确区分不同纯合基因型。DNA模板量的变化(10ng、20ng、50ng和100ng)和扩增循环数的波动(38、40和42次)均对PCR-HRM法正确基因分型影响不大。结论基于小片段扩增子对rs1205C>T和rs4353A>G两个SNP位点进行常规化PCR-HRM法基因分型在方法学上是可靠的,值得推广;同时这一评估模式也适于其他分子诊断方法的评价。
- 尤崇革李玉民马克君施鑫鹤郜莉娜李菲菲
- 关键词：基因分型单核苷酸多态性
- 脑膜瘤MLH1启动子甲基化水平及临床意义被引量：1
- 2015年
- 目的探讨脑膜瘤mut L同源基因1（MLH1）启动子甲基化水平与脑膜瘤侵袭性的相关性。方法从我院标本库随机选取64例脑膜瘤石蜡包埋组织标本,其中侵袭性脑膜瘤26例,非侵袭性脑膜瘤38例。应用逆转录-PCR检测MLH1 m RNA表达水平,应用特异高分辨率熔解（MS-HRM）曲线检测不同侵袭性脑膜瘤MLH1启动子甲基化水平。结果侵袭性脑膜瘤MLH1m RNA含量比非侵袭性脑膜瘤显著降低（P〈0.05）。MS-HRM曲线分析显示,侵袭性脑膜瘤MLH1启动子区高度甲基化水平为0-1%所占比例（7.7%,2/26）显著低于非侵袭性脑膜瘤（55.3%,21/38;P〈0.05）。结论 MLH1启动子区甲基化可能下调MLH1的表达,进而调控脑膜瘤侵袭性行为。
- 袁国强周旺宁魏乃礼王晓清马克君苏愚粱文涛潘亚文
- 关键词：脑膜瘤侵袭性启动子甲基化
