顾志强
- 作品数:7 被引量:34H指数:3
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- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 李斯特菌溶血素基因的原核表达及其生物学特性
- 李斯特菌血素(LLO)是产单核细胞李斯特菌的主要毒力因子,利用PCR技术从血清型4b的产单核细胞李斯特菌菌株中扩增出编码LLO的hly基因,经克隆筛选和测序鉴定后,构建成该基因的原核表达载体pGEX6P-1-hly,经I...
- 殷月兰焦新安潘志明张晓明顾志强
- 关键词:李斯特菌溶血素原核表达生物学特性人兽共患病
- 文献传递
- 李斯特菌溶血素基因的原核表达及其生物学特性
- 李斯特菌溶血素(LLO)是产单核细胞李斯特菌的主要毒力因子,利用PCR技术从血清型4b的产单核细胞李斯特菌菌株中扩增出编码LLO的hly基因,经克隆筛选和测序鉴定后,构建成该基因的原核表达载体pGEX6P-1-hly,经...
- 殷月兰焦新安潘志明张晓明顾志强
- 关键词:产单核细胞李斯特菌原核表达
- 文献传递
- 产单核细胞李斯特菌actA基因在大肠杆菌中的表达及其单克隆抗体的研制被引量:10
- 2006年
- 利用PCR技术从血清型1/2a的产单核细胞李斯特菌Lm-4株中扩增出actA基因,经克隆筛选和测序鉴定后,构建成该基因的原核表达载体pGEX-6P-1-actA及pET-actA,转入E.coli后,IPTG诱导目的蛋白的表达。SDS-PAGE结果表明,actA基因在两种载体中均获得表达,融合蛋白的大小分别约为120kDa和97kDa。以纯化蛋白为材料进行了AetA单抗的研制,获得4株抗ActA的单克隆抗体杂交瘤细胞株,腹水单抗ELISA效价为1:5×10^4-1:1×10^5。选取单抗1A5进行Western blot分析,结果表明单抗1A5能和表达产物进行特异性反应,且与Lm-4多抗血清的Western blot结果一致。actA基因的原核表达及单抗的研制为研究ActA蛋白的生物学活性及其致病作用奠定了基础。
- 殷月兰董慧焦新安焦红梅顾志强袁舟张晨菊征超峰
- 关键词:产单核细胞李斯特菌单克隆抗体
- 李斯特菌溶血素基因的原核表达及其生物学特性被引量:19
- 2004年
- 李斯特菌溶血素 (LLO)是产单核细胞李斯特菌的主要毒力因子 ,利用PCR技术从血清型 4b的产单核细胞李斯特菌菌株中扩增出编码LLO的hly基因 ,经克隆筛选和测序鉴定后 ,构建成该基因的原核表达质粒pGEX6P 1 hly,SDS PAGE结果表明 :LLO与谷胱甘肽在大肠杆菌中已融合表达 ,融合蛋白的分子量为 82kD ;溶血实验证明融合蛋白具有较强的裂解真核细胞膜的作用 ,表明表达产物LLO具有生物活性 ,其溶血效价达 2 2 6× 10 4 HU mg ,这为进一步研究其致病与免疫机理。
- 殷月兰焦新安潘志明张晓明顾志强陈瑶
- 关键词:产单核细胞李斯特菌原核表达
- 减毒鼠伤寒沙门菌体内定位分析被引量:5
- 2008年
- 分析减毒鼠伤寒沙门菌口服感染后在小鼠体内定位的情况。将构建的红色荧光蛋白(RFP)原核质粒pYA33-DsRed,以电穿孔法转化减毒鼠伤寒沙门菌X4550,重组菌命名为X4550(33-DsRed)。重组菌分别感染巨噬细胞RAW264.7和骨髓源树突状细胞(BMDC),并用流式细胞术检测红色荧光细胞荧光强度。此外,以不同剂量重组菌口服免疫BALB/c小鼠,并于免疫后1d、2d、3d、5d、7d取小鼠脾、肝、肠系膜淋巴结(MLN)、派伊尔氏结(PP)、腹股沟淋巴结(ILN)细胞,检测各组织器官中的红色荧光阳性细胞百分率。重组菌对RAW264.7细胞和BMDC均具有良好的侵袭力。口服小鼠后,第1d,仅在MLN及PP中检测到RFP阳性细胞,其中PP中阳性细胞达到1.4%;第2d,在ILN中达到0.4%;第3d,各个组织器官中RFP阳性细胞均有上升趋势,此时在脾、肝中也检测到RFP阳性细胞。第5d,RFP阳性细胞均减少,第7d则未检测到任何RFP阳性细胞。减毒鼠伤寒沙门菌具有良好的侵袭力,其黏膜移行方式以及对免疫组织器官靶向定位性,在优化黏膜疫苗以及提高疫苗免疫效力等方面都具有重要作用。
- 张辉胡茂志顾志强焦新安耿士忠张晓明潘志明
- 关键词:减毒鼠伤寒沙门菌红色荧光蛋白黏膜免疫
- 产单核细胞李斯特菌actA基因的原核表达及其单克隆抗体的研制
- 本文利用PCR技术从血清型1/2a的产单核细胞李斯特菌Lm-4株中扩增出actA基因,经克隆筛选和测序鉴定后,构建成该基因的原核表达载体pGEX-6P-1-actA及pET-actA,转入终宿主菌E.coli后,IPTG...
- 殷月兰董慧焦新安焦红梅顾志强袁舟张晨菊征超峰
- 关键词:产单核细胞李斯特菌单克隆抗体原核表达
- 文献传递
- 产单核细胞李斯特菌actA基因的原核表达及其单克隆抗体的研制
- 本文利用PCR技术从血清型1/2a的产单核细胞李斯特菌Lm-4株中扩增出actA基因,经克隆筛选和测序鉴定后,构建成该基因的原核表达载体pGEX-6P-1-actA及pET-actA,转入终宿主菌E.coli后,IPTG...
- 殷月兰董慧焦新安焦红梅顾志强袁舟张晨菊征超峰
- 关键词:产单核细胞李斯特菌单克隆抗体
- 文献传递