陆爱丽
- 作品数：31 被引量：139H指数：6
- 供职机构：北京大学基础医学院细胞生物学系更多>>
- 发文基金：“九五”国家科技攻关计划国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 以杆状病毒作为基因治疗载体的一种新方法
- 1999年
- 目的：报道一种新的基因治疗方法。方法：将人全长血小板生成素（ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ）基因克隆至ｐＢａｃＭａｍ２载体，与ＢａｃＶｅｃｔｏｒ３０００病毒ＤＮＡ共转染昆虫ｓｆ９细胞，经筛选后获得可在哺乳类动物细胞高效表达的昆虫病毒，以此为载体，将人ＴＰＯ基因导入小鼠体内。结果：获得可在哺乳类动物细胞高效表达的昆虫病毒株，动物实验外周血小板计数升高至正常的２～３倍，ＲＴＰＣＲ结果显示ＴＰＯ在小鼠组织中得到表达。结论：重组ｒｈＴＰＯ昆虫病毒是一种有效的基因治疗载体。
- 陆爱丽董东生董东生伏爽伏爽侯纬敏
- 关键词：血小板生成素基因治疗昆虫病毒杆状病毒
- 大鼠晶体上皮细胞Cu-ZnSOD的分子克隆表达和活性鉴定
- 1997年
- 不同来源的超氧化物歧化酶（SOD）的克隆已有报道，用RT－PCR方法我们成功地从大鼠晶体上皮细胞中克隆出了CU－ZnSODcDNA并利用pMal载体在大肠杆菌中高效表达出MBP－SOD融合蛋白可占菌体总蛋白40％左右，采用的蛋白纯化系统的亲和层析柱就是利用的MBP融合蛋白可被快速纯化而设计的，实验证明此方法可快捷、高效地表达有生物学活性的MBP—SOD融合蛋白。
- 董东生陆爱丽万效竹侯纬敏
- 关键词：超氧化物歧化酶上皮细胞晶体分子克隆
- 体外培养大鼠白内障模型晶状体的早期生化改变被引量：7
- 2000年
- 目的 进一步探讨白内障的发生机制。方法 采用器官培养方法 ,以不同浓度亚硒酸钠及半乳糖作用于晶状体 ,诱发大鼠晶状体形成白内障 ,在培养初期测定晶状体内非蛋白质巯基(nonproteinsulfhydryl,NP SH)、蛋白质巯基 (proteinsulfhydryl ,P SH)和不溶性蛋白质二硫键的含量 ,脂类过氧化水平 ,以及与谷胱甘肽代谢有关的谷胱甘肽过氧化物酶 (GSHperoxidase ,GSH PX)、谷胱甘肽还原酶 (GSHreductase ,GSSG R)及谷胱甘肽硫转移酶 (GSHStransferase ,GSH S)的活性。结果 培养初期 (10min)低浓度药物培养基中晶状体NP SH、P SH含量降低 ,二硫键含量呈升高趋势 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;GSH PX、GSH S活性升高 ,丙二醛 (malonaldehyde,MDA)具有升高趋势 ;GSSG R活性无明显变化。结论 亚硒酸钠及半乳糖可在体外诱发大鼠晶状体发生混浊 。
- 董东生陆爱丽刘莹贾维红侯纬敏
- 关键词：白内障晶体生物化学
- 用醋酸铵制备质粒DNA的简便方法
- 2002年
- 朱滨姜彬王璞陆爱丽
- 关键词：质粒DNA
- 紫外线对角膜内抗氧化酶mRNA表达的影响被引量：2
- 1999年
- 为了进一步从基因水平探讨紫外线的损伤机制，我们采用ＲＴＰＣＲ方法，用紫外线照射大鼠角膜，检测大鼠角膜内三种抗氧化酶：谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ），铜锌超氧化物歧化酶（Ｃｕ、ＺｎＳＯＤ），过氧化氢酶（ＣＡＴ）ｍＲＮＡ的表达。结果显示，照射早期，三种抗氧化酶ｍＲＮＡ表达均升高，ＧＳＨＰｘ和ＳＯＤ的表达高点为照射５ｍｉｎ，ＣＡＴ的表达高点为照射２ｍｉｎ；照射晚期，照射１５ｍｉｎ，三种酶的ｍＲＮＡ表达明显下降（Ｐ＜００５），照射后４８ｈ，三种抗氧化酶的表达基本恢复正常。由此可见，紫外线可影响大鼠角膜内抗氧化酶ｍＲＮＡ的表达，而且角膜有能力修复这种损伤。
- 刘莹董东生董东生侯纬敏
- 关键词：角膜损伤抗氧化酶MRNA
- 视网膜色素上皮细胞脱离体外培养条件后细胞保存液的研究
- 2007年
- 目的研究人视网膜色素上皮细胞(hRPE细胞)离体或脱离体外培养条件后,维持细胞活性、且延长细胞存活时间最适宜的液体。方法将5代以上hRPE细胞(本实验室保存)按常规冷冻、复苏培养于DMEM/F12培养基添加10%胎牛血清,EGF20μg/L和bFGF20μg/L条件下,至80%以上汇合,经胰蛋白酶消化,收集细胞、计数,置于6种不同保存液中(平衡盐液、Quinn’sadvantage medium、生理盐水、18氨基酸液、5%葡萄糖液和人工脑脊液),用Annexin V/FITC Kit染色,利用流式细胞术(FACS)检测细胞死亡或凋亡。采用2h至8h之间3个时间点,检测hRPE细胞在6种不同细胞保存液中的细胞状态。结果室温状态下,hRPE细胞30min内均发生坏死。4℃状态下,2h平衡盐液组凋亡率最低(0.9%);各组分别与平衡盐液组相比,显示人工脑脊液组与平衡盐液组之间存在显著差异;4h至8h,hRPE细胞凋亡率从26.74%上升至41.36%。各组总死亡率与凋亡率基本一致。结论4℃状态下,6种溶液中,平衡盐液是维持hRPE细胞脱离培养条件后保持细胞活性,且延长细胞存活时间最适宜的溶液。
- 孟书聪张君张小燕陆爱丽
- 关键词：视网膜色素上皮细胞细胞凋亡流式细胞术
- 含重组人血小板生成素基因的小鼠成纤维细胞的克隆筛选与鉴定被引量：4
- 1999年
- 获取稳定表达重组人血小板生成素的ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞克隆，为开展成纤维细胞介导的ＴＰＯ基因治疗研究提供细胞学基础。方法：以重组人ＴＰＯｃＤＮＡ为目的基因，构建真核细胞表达重组体ｐｃＤＮＡ３／ＴＰＯ，脂质体将其转染于ＮＩＨ３Ｔ３细胞，经Ｇ４１８筛选，获得稳定表达重组人ＴＰＯ的细胞克隆，应用ＰＣＲ，ＲＴ－ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹等技术鉴定目的基因的导入及表达。
- 韩安平陆爱丽王申五侯纬敏王德炳
- 关键词：血小板生成素成纤维细胞基因表达克隆
- 白细胞介素-1β诱导大鼠视网膜单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达的研究
- 2001年
- 目的 探讨白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）对大鼠视网膜单核细胞趋化蛋白（ＭＣＰ）－１ｍＲＮＡ表达的诱导作用。方法 ２４只ＳＤ大鼠，右眼为实验眼，左眼为对照眼。实验眼玻璃体内注入ＩＬ－１β ２５０ Ｕ／５μｌ，对照眼注入等量生理盐水（ＰＳＳ）。注射后４，２４ｈ取视网膜组织，提取总ＲＮＡ应用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测视网膜ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达。结果 眼内ＩＬ－１β注射后４ｈ实验眼视网膜ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达水平较对照眼明显增加；２４ｈ实验眼视网膜ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ水平与对照眼相近。结论 视网膜ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ可被眼内ＩＬ－１β诱导表达，ＭＣＰ－１可能在ＩＬ－１β诱发的眼内炎症反应中发挥作用。
- 刘武董东生陆爱丽李凌峰
- 关键词：白细胞介素-1Β单核细胞趋化蛋白-1视网膜MRNA
- 人造血干细胞因子的克隆、表达及活性测定
- 造血干细胞因子是一个新近发现的细胞因子,它作用于最早阶段的造血细胞,对早期粒系、淋巴系、红系和巨噬细胞系均有刺激生长的作用,并且表现出对其他造血生长因子较强的协同作用.本文应用RT-PCR技术从入骨髓中得到含有25个氨基...
- 陆爱丽王新娟扬中州黄佳鹏侯纬敏
- 关键词：造血干细胞
- 文献传递
- 紫外线对大鼠晶状体抗氧化酶mRNA表达水平的影响被引量：4
- 1999年
- 为探讨紫外线对晶状体的损伤机制，用ＲＴ－ＰＣＲ方法（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，反转录聚合酶链反应），研究经紫外线照射后大鼠晶状体抗氧化相关酶，包括铜锌－超氧化物歧化酶（ｃｏｐｐｅｒ－ｚｉｎｃ－ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，Ｃｕ－Ｚｎ－ＳＯＤ），谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕ－ｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＳＨ－Ｐｘ）和过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ）等ｍＲＮＡ的表达．结果显示，短时间的照射（２～５ｍｉｎ），抗氧化相关酶的ｍＲＮＡ表达水平有增高表现，随后其ｍＲＮＡ表达水平开始下降，１５ｍｉｎ时抗氧化相关酶ｍＲＮＡ的表达下降更为明显，与对照组相比有非常显著性差异（Ｐ＜０．００１）．照射后２４ｈ，抗氧化相关酶的ｍＲＮＡ表达有不同程度的恢复；照射后４８ｈ，其ｍＲＮＡ表达水平基本恢复，与对照组相比没有显著性差异．
- 陆爱丽刘莹董东生侯纬敏张昌颖
- 关键词：RT-PCRMRNA晶状体抗氧化酶
