邱信芳
- 作品数:149 被引量:383H指数:10
- 供职机构:复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程自然科学总论更多>>
- 内含子对人凝血因子Ⅸ活体表达的增强作用
- 1997年
- 为了研究内含子在活体水平对凝血因子Ⅸ的表达增强作用,首先采用lacZ为报告基因,建立了阳离子脂质体SA介导的活体基因转移方法。将带有凝血因子Ⅸ(hFⅨ)cDNA的质粒pCMVIX和带有hFⅨcDNA及其内含子的小基因(minigene)的质粒pCMVi'Ⅸ用SA脂质体包裹,分别经尾静脉注射到Balb/c鼠体内,pCMVIX注射后未在血浆中检测到hFⅨ蛋白;而pCMVi'Ⅸ注射后在Balb/c鼠血浆中检测到hFⅨ蛋白,最高达到10.1ng/ml,持续28天。pCMVi'Ⅸ经二次注射,FⅨ表达水平最高达到43.9ng/ml,持续40天后仍可检测到hFⅨ基因的表达,结果表明,内含子在活体水平对凝血因子Ⅸ的表达有显著的增强作用。
- 邱晓云邢永娜卢大儒周彩虹邱信芳薛京伦
- 关键词:阳离子脂质体内含子凝血因子遗传学
- 人凝血因子ⅨcDNA在C2C12成肌细胞及C3H小鼠中的高效表达被引量:6
- 1997年
- 以小鼠C2C12成肌细胞对象开展血友病B基因治疗研究,除已有的XLIX,LNCIX和G1NaIX反转录病毒载体外,又首次将微小MCK增强子顺序构建到hCMV启动子上游,共同控制FIXcDNA的转录,用带有上述4种载体的病毒悬液分别感染C2C12细胞后,ELIS检测结果发现。
- 王宏伟李朝霞包赟卢大儒邱信芳薛京伦
- 关键词:成肌细胞CDNA基因治疗血友病
- 腺病毒载体介导胸苷激酶基因/ACV对大鼠脑胶质瘤的离体和活体杀伤作用
- 1998年
- 建立缺陷型重组腺病毒载体介导的胸苷激酶基因治疗系统(Adtk/ACV),进行离休和活体治疗大鼠C6脑胶质瘤研究.将质粒pAdtk与pJM17共转染腺病毒包装细胞──293细胞,同源重组后制备纯化的Adtk并以PCR证实;Adtk对离休C6细胞的杀伤作用随着Adtk滴度和ACV剂量增加而增强,并有旁观者效应,而未转染C6细胞和AdLacZ转染C6细胞均未被杀伤;扫描电镜下见Adtk/ACV处理的细胞呈明显病理改变;ACV可有效杀伤Adtk/C6细胞.在大鼠脑立体定向仪引导下于右额叶接种2×106个C6细胞,分别于第3,6,8和10天原位注射Adtk,同时腹腔注射ACV(100mg/(kg·d-1)),3d组、6d组、8d组大鼠成活期在90d以上,组织学检查未发现肿瘤细胞.10d组成活期(28.5±4.6)d,而C6未治疗组和AdLacZ/ACV治疗组成活期分别为(1.8±3.1)d和(14.0±2.2)d.本文建立的Adtk/ACV在离体和活体水平对大鼠C6脑胶质瘤有强烈的杀伤作用,效果确实,应用方便,ACV价格便宜,有潜在临床应用价值.
- 薛京伦王琪卢大儒邱信芳
- 关键词:腺病毒载体胸苷激酶基因
- 人凝血Ⅸ因子乳腺生物反应器的研制被引量:12
- 1998年
- 为了建立人凝血Ⅸ因子乳腺生物反应器,以MCK增强子,β-actin启动于控制hFIX小基因(minigene)表达顺序,反向插入G1Na框架,构建复制缺陷反转录病毒载体,并制备重组反转录病毒颗粒;以CMV启动子,hFIXcDNA和腺病毒框架构建腺病毒载体pAdCMVhFIX,与质粒pJM17共转染包装细胞制备合hFIX基因的重组腺病毒颗粒.两种病毒颗粒分别通过直接转染活体奶山羊乳腺组织,建立了hFIX蛋白的乳腺表达系统和快速检测系统.另外,利用小鼠MAR(matrixattachmentregion)元件,牛β-Casein基因,人凝血Ⅸ因子小基因和cDNA构建了乳腺组织特异性表达载体.以Stearylamine(SA)阳离子脂质体介导、尾静脉注射的方法转染哺乳期雌性小鼠的活体组织,建立Ⅸ因子表达的快速检测系统,并研究了β-casein基因,hFIX基因intron1对hFIX基因在乳腺组织中表达调控的作用.在此基础上将筛选得到的pMCIXm表达载体通过显微注射技术注人小鼠和奶山羊受精卵细胞,制备6只转基因小鼠和5只转基因奶山羊.其中在2只转基因小鼠和1头奶山羊乳汁中测得hFIX蛋白的表达并具有凝血活性.
- 邱信芳张克忠卢大儒薛京伦
- 关键词:乳腺生物反应器转基因动物
- 工业毒理学与人类健康
- 1997年
- 第2届国际环境和工业毒理学会议于1996年12月9~13日在泰国曼谷召开。会议的目的是加强多学科合作,共同面对化学物质广泛应用给全球环境和人类健康带来的问题。"研究与应用"是会议的中心议题,突出强调基础研究与具体应用的联系。会议集中展示了毒理学所有分支学科的最新信息,发表论文219篇。会前还举行了"室内空气质量与健康"专题报告会,专家们就发展毒理学的人力资源和毒理学在可持续发展中的作用等问题进行了讨论。
- 邱信芳薛京伦印木泉
- 关键词:毒理学空气质量
- 单纯疱疾病毒胸苷激酶基因的脑肿瘤基因治疗研究
- 1998年
- 单纯疱疾病毒胸苷激酶基因(HerpesSimplexVirus-ThymidineKinase,HSV-tk),配合核苷酸类似物(NAS)GCV或ACV的基因治疗是目前肿瘤基因治疗领域中一种较有希望的治疗方法.反转录病毒和腺病毒介导的HSV-tk/NAS肿瘤基因治疗系统的建立,并运用该系统进行脑胶质瘤、垂体瘤、黑色素瘤的基因治疗离体细胞和动物试验,取得了显著的肿瘤杀伤作用,特别是腺病毒介导的脑胶质瘤基因治疗动物试验效果很显著,能够完全消除肿瘤.同时,还建立了反转录病毒以及腺病毒HSV-tk基因治疗的安全性检测体系,为基因治疗的临床试验提供了安全性保证.
- 卢大儒王琪周彩红邱信芳薛京伦
- 关键词:HSV-TK脑肿瘤反转录病毒腺病毒基因治疗
- 乳汁中分泌有活性的人凝血因子Ⅸ的转基因羊的研制被引量:32
- 1998年
- 黄淑帧陈美珏黄英张克忠李华卢大儒陆建英陈云弟邱信芳薛京伦曾溢滔
- 关键词:乳汁转基因羊血友病B
- 人X染色体单拷贝序列的分离及鉴定的研究被引量:1
- 1993年
- 本研究以人/鼠(CHO-K1)细胞总DNA为探针对人X染色体DNA文库进行了3轮筛选,单拷贝顺序的检出率为1.45%。其中DXFD52,71,73,75分别与一组含人X染色体及不含人X染色体的人/鼠杂种细胞DNA进行Southern杂交分析,确定DXFD52,71,73,75含人X染色体专性DNA顺序。采用染色体原位杂交的方法,将DXFD52精确定位于Xq12-q13。并对其进行了部分DNA顺序分析,结果证实DXFD52是人基因组中至今未被分离到的一个单拷贝DNA片段。继而对DXFD52进行限制性酶切图谱分析,并以其为探针在中国重庆地区正常人群中(随机个体38例、3个正常家系成员11例)进行了RFLP研究,发现该探针具有识别Hind Ⅲ,Bgl Ⅱ,Hinf Ⅰ的RFLP。
- 谭骏朱锡华纪贤文梁红陈小义王燕邱信芳薛京伦秦世真张冬梅
- 关键词:DNAX染色体
- 血友病B基因治疗载体系统研究
- 血友病B是一种由于人凝血因子IX(hFIX)缺陷导致的严重出血性遗传疾病。理论上,只有基因治疗可望从根本上治疗血友病B。重组载体构建是血友病B基因治疗的关键,也是研究人hFIX表达调控的基础。在载体构建方面先后构建了40
- 薛京伦邱信芳卢大儒
- 关键词:血友病B基因治疗遗传疾病
- 腺病毒IGF-1反义脑肿瘤基因治疗研究
- 脑胶质瘤是脑肿瘤中最常见的恶性肿瘤,占原发性脑肿瘤的30%。由于手术治疗、化疗和放疗难以彻底根治肿瘤,术后易复发,治疗后五年生存率仅5.5%。基因治疗是现代医学与分子生物学相结合而产生的一种新的治疗方法,可望给肿瘤患者带...
- 卢大儒王琪邱信芳薛京伦
- 文献传递