路迎冬
- 作品数：25 被引量：163H指数：8
- 供职机构：中国中医科学院广安门医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Sleeping Beauty转座酶转基因小鼠模型的建立被引量：3
- 2013年
- 目的建立表达Sleeping Beauty(SB)转座酶转基因小鼠模型,为研究SB转座子在小鼠中的应用提供工具动物。方法利用人的泛素C启动子驱动SB转座酶基因的表达,利用显微注射方法建立C57BL/6J表达SB转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定首建鼠的基因型,Western Blot(WB)和免疫组织化学(IHC)检测SB转座酶基因在小鼠生殖腺睾丸中的表达情况,筛选睾丸中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结果通过显微注射方式产生了4只首建小鼠,其中3只能稳定传代,利用WB和IHC成功的筛选出一株在睾丸中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结论成功建立了睾丸组织中高表达SB转座酶转基因小鼠动物模型,为将SB转座子应用于建立基因修饰小鼠模型提供非常重要的工具动物。
- 路迎冬张旭马婧张连峰高虹马元武
- 关键词：SLEEPINGBEAUTY转座酶
- 芪术颗粒对肝窦内皮细胞的影响及机制研究
- 2022年
- 目的 探讨芪术颗粒含药血清对四氯化碳(CCl)诱导的肝纤维化模型大鼠肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSECs)失窗孔化及整合素αVβ3(integrin αVβ3,ITGαVβ3)-黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)-大鼠肉瘤(rat sarcoma,Ras)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases, MAPK)信号通路的影响与机制。方法 70只雄性Wistar大鼠,先取50只大鼠分为正常对照组、模型组及芪术颗粒高、中、低剂量组,每组10只,分别给予相应处理,制备含药血清和正常对照组血清。另20只雄性Wistar大鼠用于制备肝窦内皮细胞,其中14只大鼠采用CCl腹腔注射建立肝纤维化模型4周后,采用Masson与HE染色观察肝纤维化程度。另6只大鼠作为正常对照。分离LSECs,将LSECs分为阳性对照组、模型组、芪术低剂量组、芪术中剂量组、芪术高剂量组,其中模型组加入正常大鼠血清,其余组分别加入相应含药血清,常规培养48小时,进行相关指标检测。流式细胞仪检测大鼠肝窦内皮细胞中的血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)阳性细胞比例和肝窦内皮细胞1抗体(hepatic sinusoidal endothelial cells antibody,SE-1)阳性细胞比例;扫描电镜观察肝窦内皮细胞窗口情况;Western Blot法检测LSECs中CD31、SE-1、Ras、ITGαVβ3、FAK、MAPK、磷酸化黏着斑激酶(phosphorylation focal adhesion kinase,p-FAK)及磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylation mitogen-activated protein kinases,p-MAPK)蛋白表达情况。结果 (1)大鼠CCl腹腔注射造模后纤维增生显著,肝纤维化LSECs组的CD31阳性细胞比例和SE-1阳性细胞比例均显著升高。(2)模型组窗孔数少而稀疏,芪术颗粒干预后,扫描电镜观察LSECs窗孔数有所恢复,尤以芪术高剂量组明显。(3)与模型组比较,芪术各剂量组的SE-1、CD31、αVβ3表达量明显降低(P<0.05),其中芪术各剂量组的SE-1、CD31、αVβ3表达量随剂量的�
- 姜心航张荣刘绍能马继征丁佳媛刘慧敏张玲路迎冬
- 关键词：肝纤维化肝窦内皮细胞芪术颗粒窗孔动物实验细胞实验
- 芪术颗粒对肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞αvβ3-ILK/AKT信号通路的影响
- 目的:以芪术颗粒为研究对象,在明确其对肝纤维化有治疗作用的基础上,从整合素αvβ3-ILK/AKT信号转导通路的角度探讨芪术颗粒抗纤维化的机制。方法:正常组:不造模LSECs,加正常不含药血清;模型组:造模LSECs,加...
- 刘绍能张荣马继征丁佳媛刘慧敏张玲路迎冬
- 关键词：芪术颗粒肝纤维化
- 文献传递
- 芪术颗粒对肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞αvβ3-ILK/AKT信号通路的影响被引量：2
- 2019年
- 目的:探讨芪术颗粒对CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型肝窦内皮细胞(Liver sinus endothelial cells,LSECs)中整合素αvβ3-整合素连接激酶(Integrin-linked protein kinase,ILK)/蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)信号通路的影响。方法:腹腔注射10%CCl4橄榄油溶液建立大鼠肝纤维化模型,原代分离肝纤维化大鼠及正常大鼠LSECs。70只雄性Wistar大鼠随机分为6组,芪术颗粒低、中、高剂量组,分别给予芪术颗粒0.5倍、1倍、2倍剂量灌胃,阳性药组给予复方鳖甲软肝片灌胃,正常组及模型组给予三蒸水灌胃,每天分别灌胃2次,连续灌胃5次。制备含药血清及正常血清。将制备的正常血清加入到正常组大鼠分离出的LSECs,其余组将对应的血清加入肝纤维化大鼠分离出的LSECs,常规培养48 h,Western blot检测LSECs中整合素αvβ3-ILK/AKT信号通路的变化情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠LSECs中αvβ3、磷酸化ILK/ILK、磷酸化AKT/AKT蛋白表达均升高(P<0.01)。与模型组比较,阳性药组及芪术颗粒各剂量组大鼠LSECs中整合素αvβ3表达均降低(P<0.05,P<0.01),随芪术颗粒剂量的增大,αvβ3表达逐渐降低;磷酸化ILK/ILK、磷酸化AKT/AKT蛋白的表达均减少(P<0.01),尤以芪术颗粒高剂量组降低最明显。与阳性药组比较,芪术颗粒高剂量组LSECs整合素αvβ3、磷酸化ILK、磷酸化AKT蛋白表达均降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:芪术颗粒可通过抑制肝纤维化大鼠LSECs整合素αvβ3-ILK/AKT信号通路发挥其抗肝纤维化作用。
- 张荣刘绍能马继征丁佳媛刘慧敏张玲路迎冬
- 关键词：肝纤维化芪术颗粒细胞实验
- 冠心舒通胶囊干预NF-κB信号通路抗动脉粥样硬化的机制研究被引量：8
- 2021年
- 目的观察冠心舒通胶囊是否通过调控核转录因子-κB(NF-κB)信号通路,控制或延缓动脉粥样硬化的进展。方法选取16只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠为正常对照组,予普通饮食;选取48只6~8周龄雄性同系ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠,采用高脂饲料喂养,至12周建立动脉粥样硬化模型(杀死3只,油红O染色,脂质斑块形成,造模成功),造模成功小鼠随机分为3组:模型组、冠心舒通组、阿托伐他汀组,每组15只。冠心舒通组给予冠心舒通胶囊0.41 g/(kg·d)灌胃,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀钙片5 mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃。灌胃8周后,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;取主动脉,免疫组织化学染色法检测主动脉组织中NF-κB p65蛋白表达水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测主动脉组织中TNF-α蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组血清IL-6、TNF-α水平均升高(P<0.01),主动脉组织中NF-κB p65和TNF-α蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组相比,冠心舒通组和阿托伐他汀组血清IL-6、TNF-α水平均降低(P<0.01),主动脉组织中NF-κB p65蛋白和TNF-α蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论冠心舒通胶囊对ApoE-/-小鼠具有抗动脉粥样硬化的作用,其作用机制可能与其抑制NF-κB信号通路及相关炎性因子(IL-6、TNF-α)的表达,发挥抗炎、抗动脉硬化作用有关。
- 张丹丹孙玉婵路迎冬路迎冬曲艺崔向宁
- 关键词：动脉粥样硬化冠心舒通胶囊核转录因子-ΚB
- 芪术颗粒对肝纤维化模型大鼠肝窦内皮细胞vWF及Caveolin-1表达的影响被引量：7
- 2019年
- 目的观察芪术颗粒对肝纤维化模型大鼠肝组织内Ⅷ因子相关抗原(vWF)及陷窝蛋白-1(Caveolin-1)蛋白表达的影响。方法将24只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、芪术颗粒组、复方鳖甲软肝片组,每组6只。模型组、芪术颗粒组及复方鳖甲软肝片组腹腔注射40%CCl_4橄榄油溶液制备肝纤维化模型,同时,芪术颗粒组给予芪术颗粒1.25 g/(kg·d)、复方鳖甲软肝片组给予复方鳖甲软肝片0.625 g/(kg·d)灌胃;模型组给予等容积的无菌水灌胃。连续给药4周。正常组同等条件下饲养,不造模。用免疫组化法及Western blot法检测肝组织内vWF、Caveolin-1蛋白表达。结果 vWF、Caveolin-1表达于肝窦内皮细胞。与正常组比较,模型组肝组织内vWF、Caveolin-1蛋白表达明显增强;与模型组比较,芪术颗粒组、复方鳖甲软肝片组肝组织内vWF、Caveolin-1蛋白表达量相对较低(P<0.05)。结论芪术颗粒可下调vWF、Caveolin-1蛋白的表达。
- 刘绍能刘慧敏周海艳丁佳媛张玲路迎冬马继征
- 关键词：肝纤维化芪术颗粒
- 基于肠道微生态角度探讨从脾胃论治在新型冠状病毒肺炎中的应用被引量：21
- 2020年
- 肠道菌群微生态失衡导致肠源性内毒素以及肠道菌群移位引起的炎性介质的释放,直接或间接促进新型冠状病毒肺炎炎症风暴的发生发展。《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》推荐用微生态调节剂维持肠道微生态平衡,预防继发细菌感染。中医认为该病病位主要在肺,波及脾胃,从脾胃论治中药可以增加肠道优势菌群比例,抑制有害菌过度繁殖,起到改善肠道菌群失衡作用,对冠状病毒感染或肺炎患者的病情预后起到正面促进作用,这为新冠肺炎治疗提供了新的思路和方法。
- 路迎冬尚唱辛来运崔向宁
- 关键词：新型冠状病毒肺炎从脾胃论治
- 温胆宁心颗粒对心肌梗死合并抑郁大鼠BDNF/TrkB/PI3K/Akt信号通路的影响研究
- 2024年
- 目的:本研究观察温胆宁心颗粒(WDNX)对心肌梗死合并抑郁症大鼠BDNF/TrkB/PI3K/Akt信号通路的影响,探讨其可能的作用机制。方法:通过皮下多点注射异丙肾上腺素和慢性不可预见性轻度应激方法制备心肌梗死合并抑郁症模型大鼠,给予WDNX干预28 d后,经胸心脏超声检测心功能变化;根据糖水偏好和旷场实验评估大鼠抑郁状态;采用苏木素-伊红和尼氏染色观察心肌、脑组织病理变化及神经元损伤;最后通过免疫组化和Western blotting技术检测BDNF/TrkB/PI3K/Akt通路的表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)显著降低(P<0.01),心肌组织可见大量纤维水肿,胞质疏松,组织边缘可见心肌纤维溶解,伴有少量淋巴细胞浸润;脑组织有明显弥散型损伤,间质肿胀,炎症细胞聚集,形态不规则;尼氏染色观察,模型组神经元数量显著减少,形态不规则,排列松散紊乱,细胞间隙增大,还导致尼氏体形态的固缩,出现病理改变;模型大鼠糖水偏好度、中央区活动时间和中央穿越次数明显降低(P<0.01);与模型组比较,WDNX组LVEF、LVFS显著升高(P<0.01),心肌纤维水肿、胞质疏松、炎症浸润、细胞空洞变性及纤维溶解程度均有改善,脑组织神经元形态较为规则,排列较整齐紧密,神经元数量相对增多,还可恢复尼氏体形态;WDNX组大鼠糖水偏好度、中央区活动时间和中央穿越次数明显增加(P<0.05)。免疫组化染色结果:与空白组比较,模型组大鼠心肌和脑组织(海马、皮层和下丘脑)BDNF蛋白表达明显降低(P<0.01),心肌TrkB、PI3K和Akt蛋白表达均明显降低(P<0.01);与模型组比较,WDNX组心肌和脑组织(海马、皮层和下丘脑)BDNF蛋白表达明显升高(P<0.05),心肌TrkB、PI3K和Akt蛋白表达均明显升高(P<0.01);Western blotting检测结果:与空白组比较,模型组大鼠心肌BDNF、TrkB、PI3K和Akt蛋白表达均明显降低(P<0.01);�
- 吕李飞朱婷婷陈琛沈子涣丁帆王玉玲焦林珂路迎冬崔向宁
- 关键词：脑源性神经营养因子
- 利用CRISPR/Cas9敲除大鼠胰岛素受体底物1(Irs1)基因被引量：18
- 2014年
- 目的为研究胰岛素受体底物1(Irs1)基因与代谢病之间的关系,我们利用CRISPR/Cas9系统敲除大鼠Irs1基因,为研究代谢病提供基因敲除大鼠。方法针对Irs1第一外显子,设计CRISPR/Cas9作用靶点,构建sgRNA表达质粒。利用T7 RNA聚合酶体外转录sgRNA和Cas9。将Cas9 mRNA和sgRNA混合物注射入SD大鼠的受精卵中,实现靶基因敲除。用T7EN1实验初步检测靶基因的修饰情况,再经过测序分析确定突变。结果获得了5个在Irs1基因突变的首建鼠,突变效率为83%。结论得到了稳定遗传的Irs1基因敲除大鼠。
- 马元武马婧路迎冬陈炜张旭于磊张连峰
- 关键词：基因敲除CRISPR
- 心脏组织特异性表达Neuregulin-2转基因小鼠的建立及心脏功能分析被引量：1
- 2014年
- 目的神经调节蛋白2(neuregulin-2,NRG2)可促进神经系统发育,基因缺失表现早期生长延迟,NRG2在心脏中也有表达,但其在心脏发育尤其是病理刺激时对心脏结构及功能的影响尚未见报道。本文目的是建立心脏组织特异性表达NRG2转基因小鼠,分析其在正常及压力负荷刺激时对心脏结构及功能的影响。方法将人NRG2基因插入到心脏特异性启动子α-MHC下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立NRG2转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型,western blot鉴定NRG2蛋白在心脏中的表达并筛选高表达的转基因品系,主动脉缩窄术(transverse aortic constriction,TAC)制备压力负荷诱导的心肌肥厚小鼠模型。利用超声影像分析和病理学观察小鼠心脏结构和功能改变。结果建立了心脏组织特异性高表达NRG2转基因小鼠品系。与同窝阴性转基因小鼠相比,转基因小鼠左心室舒张末期后壁厚度(LVPWD)明显增加,3月龄时可达15.6%(P<0.05),经压力负荷刺激后,NRG2转基因手术小鼠心室壁增厚程度显著下降,心室腔增大,同时心肌排列紊乱程度和纤维化程度明显比NTG手术小鼠严重。结论在压力负荷下,转基因表达NRG2缩短了肥厚过程,同时加速了心衰进程。
- 路迎冬鲍丹刘宁张旭马元武吕丹张连峰
- 关键词：转基因心室重构
