赵建华
- 作品数:8 被引量:4H指数:1
- 供职机构:浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金:浙江省重点科技创新团队项目浙江省科技厅公益技术研究农业项目国家自然科学基金更多>>
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- 共转化水稻植株T-DNA共整合结构的分子分析被引量:1
- 2013年
- 为研究共转化水稻的T-DNA共整合结构,本研究利用分别含有HPT、GFP和mCherry基因的T—DNA载体共转化水稻,从共转化植株获得了22个由两种T—DNA共整合形成的串联结构和25个关于相同T—DNA的多拷贝结构。序列分析结果表明,相邻T-DNA通过LRRL、RLLR和LRLR模式相互连接,由RB参与形成的T-DNA连接区均发生RB序列的完全缺失,在LB参与的T-DNA连接区,LB发生不同数目的碱基缺失或其3'末端的1个C碱基发生C→T颠换,因而使T-DNA连接区表现多种变异类型。此外,伴随着RB或LB边界的完全缺失,其边界内侧序列也缺失1-643bp。在共转化水稻植株的T-DNA连接区不存在拟南芥相关报道所述的填充DNA序列。研究结果为深入解析禾谷类植物T—DNA共整合的分子机理奠定了重要基础。
- 赵建华李亚丽刘中来瞿绍洪
- 关键词:共转化转基因水稻
- 一种转化水稻抗病基因并获得无选择标记转基因后代的方法
- 本发明涉及一种转化水稻抗病基因并获得无选择标记转基因后代的方法,首先,将绿色荧光蛋白(GFP)与潮霉素磷酸转移酶(HPT)克隆于标记基因载体,目的基因置于另一T-DNA载体,携带标记基因载体的农杆菌菌株与携带目的基因载体...
- 瞿绍洪李军王歆赵建华何海燕刘中来
- 一种转座因子载体及获得其无选择标记转基因后代的方法
- 本发明涉及一种转座因子载体及获得其无选择标记转基因后代的方法,该载体通过以下步骤构建:1)将绿色荧光蛋白基因(GFP)、红色荧光蛋白基因(mCherry)潮霉素抗性选择标记基因(HPT)、来源于玉米的Ac转座酶基因(Ac...
- 瞿绍洪李莘潘龙玉毕冬玲李利华田旭丹王岚岚龙文莉许赵蒙刘中来赵建华邹小维高晓庆杨海河曲海艳
- 文献传递
- 控制水稻纹枯病抗性的OsSBR1基因及其RNA干扰片段的应用
- 本发明涉及一种控制水稻纹枯病抗性的OsSBR1基因及其RNA干扰片段的应用,这种OsSBR1基因,在水稻中处于抑制表达条件下,具有对水稻纹枯病菌的抗病性。本发明利用RNAi转基因技术,获得的OsSBR1抗纹枯病水稻基因,...
- 瞿绍洪袁正杰毕冬玲邹小维高晓庆徐国娟马晨燕何海燕张玉杨海河曲海艳赵建华
- 文献传递
- 利用共转化方法创制携带Pi9抗稻瘟病基因的无选择标记转基因水稻被引量:1
- 2020年
- 水稻稻瘟病是由子囊菌(Magnaporthe oryzae)引起的水稻灾害性病害。培育抗病品种是防治稻瘟病最经济有效的措施之一。水稻Pi9抗稻瘟病基因来源于小粒野生稻并已被克隆和应用于转基因育种。为了提高无选择标记转基因植株的选择效率,将绿色荧光蛋白(GFP)用作可视遗传标记,对双菌株共转化系统进行改良:目的基因载体携带Pi9抗稻瘟病基因;标记基因载体用潮霉素磷酸转移酶(HPT)作为植物转化选择标记,用GFP作为负选择标记,筛除标记基因分离植株。两种载体的农杆菌转化株混合,分别与水稻品种‘浙恢414’、‘浙粳22’、‘浙11B’、‘日本晴’、‘空育131’和‘粤泰B’的愈伤组织共培养,然后从5%~38.3%的起始愈伤组织筛选获得了转化愈伤组织(HPT+GFP+)。对T0植株进行Pi9基因PCR检测,11.8%~77.8%的T0植株为共转化植株(HPT+GFP+Pi9+)。对共转化植株T1代进行绿色荧光检测,筛选阴性植株(GFP-),再通过PCR筛选Pi9+植株。根据13个T1群体的研究结果,61%的共转化植株在T1代分离出无选择标记转基因植株(HPT-GFP-Pi9+)。转Pi9的无选择标记植株和后代株系对水稻稻瘟病呈抗病反应。因此,本研究通过GFP标记提高了双菌株共转化系统的选择效率,转Pi9的无选择标记水稻株系为水稻抗稻瘟病育种提供了有用的遗传资源。
- 潘龙玉李军王歆刘中来赵建华刘雄伦戴良英毛雪琴瞿绍洪
- 关键词:共转化
- 一种转座因子载体及其转基因后代的筛选方法
- 本发明涉及一种产生无选择标记转基因植物的转座因子载体及其转基因后代的筛选方法,该载体通过以下步骤构建:1)将绿色荧光蛋白基因(GFP)、潮霉素抗性选择标记基因(HPT)、来源于玉米的Ac转座酶基因(AcTPase)和Ds...
- 瞿绍洪赵建华李军周洁汪得凯陶跃之
- 文献传递
- 一种转化水稻抗病基因并获得无选择标记转基因后代的方法
- 本发明涉及一种转化水稻抗病基因并获得无选择标记转基因后代的方法,首先,将绿色荧光蛋白(GFP)与潮霉素磷酸转移酶(HPT)克隆于标记基因载体,目的基因置于另一T-DNA载体,携带标记基因载体的农杆菌菌株与携带目的基因载体...
- 瞿绍洪李军王歆赵建华何海燕刘中来
- 文献传递
- 剔除转基因植物中选择标记的研究进展被引量:2
- 2012年
- 目前无选择标记技术已经成为基因工程中安全转基因研究方面的一个重要内容,转基因植物中标记基因的去除,一方面有利于消除公众对转基因的恐惧心理,另一方面有利于科学家向已转化植物中重复转入外源目标基因。文章对近几年出现的几种无选择标记技术作一综述,并对该技术的发展进行了展望。
- 何海燕周洁李亚丽赵建华刘中来
- 关键词:转基因植物无选择标记位点特异性重组