谷雪
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 沉默ATF5对卵巢癌裸鼠成瘤的影响
- 2014年
- 目的研究沉默人转录激活因子5(ATF5)后对卵巢癌SKOV-3细胞体外增殖、凋亡及体内成瘤的影响,探讨人类卵巢癌基因治疗的新途径。方法将慢病毒携带的小干扰RNA感染卵巢癌SKOV-3细胞(实验组),空载体转染的卵巢癌SKOV-3细胞(空载体对照组)和卵巢癌SKOV-3细胞(空白对照组)进行对照,对比观察细胞的生长状态;MTT法检测细胞的增殖生长情况;罗氏凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况;分别于裸鼠皮下接种3组卵巢癌SKOV-3细胞,观察各组裸鼠的存活状态、种植瘤生长情况;RT-PCR检测瘤组织中ATF5mRNA的表达;Western-Blot方法检测瘤组织中ATF5蛋白的表达;苏木素-伊红染色(HE染色)观察瘤组织生物学形态变化。结果经转染ATF5基因的小干扰RNA后,在相同培养时间内3组细胞的增殖和生物学形态没有明显差异,但实验组细胞凋亡数量较其他两组明显增多。皮下接种成瘤后,3组裸鼠的成瘤率没有明显区别,实验组与空载体对照组和空白对照组相比,肿瘤成瘤时间晚,生长缓慢;移植瘤ATF5mRNA表达及蛋白表达降低;细胞分裂象明显减少,凋亡现象明显。结论沉默ATF5对人上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤生长有抑制作用,这可能成为卵巢癌基因治疗的新靶点。
- 谷雪丁朝霞胡明王斌陈爱平钱冬萌
- 关键词：卵巢肿瘤RNA干扰
- 慢病毒介导的ATF5基因沉默及其对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤增殖的影响
- 2014年
- 目的观察慢病毒介导的人转录激活因子5(ATF5)基因沉默效果,及其对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤增殖的影响。方法建立荷人卵巢癌裸鼠模型30只,随机分为实验组、阴性对照组、空白对照组各10只,分别瘤内注射ATF5-siRNA慢病毒、空载慢病毒、PBS。观察移植瘤生长情况,绘制移植瘤生长曲线。4周后处死裸鼠,取出移植瘤组织并称重,计算实验组抑瘤率。采用RT-PCR和Western blot方法检测各组ATF5 mRNA和蛋白相对水平,TUNEL法检测各组移植瘤组织凋亡指数(AI)。结果实验组移植瘤生长速度明显小于阴性对照组和空白对照组,其抑瘤率为49.60%。实验组ATF5 mRNA及蛋白相对表达量、AI分别为0.40±0.09、0.46±0.05、34.63%±1.91%,阴性对照组分别为0.67±0.07、0.72±0.03、6.04%±0.19%,空白对照组分别为0.80±0.07、0.82±0.05、5.07%±0.20%;实验组与阴性对照组、空白对照组比较,P均<0.01;空白对照组与阴性对照组比较,P>0.05。结论慢病毒介导的ATF5-siRNA能抑制荷人卵巢癌裸鼠移植瘤中ATF5基因的表达,并明显抑制移植瘤的生长、促进其凋亡。
- 盖雪飞谷雪丁朝霞胡明王斌陈爱平钱冬萌
- 关键词：慢病毒载体裸鼠
