舒逸
- 作品数：19 被引量：13H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市杰出青年科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- BCS1L基因新突变位点引发的新生儿发育迟缓与乳酸酸中毒
- 2023年
- 本研究旨在分析一家系两例发育迟缓、乳酸酸中毒新生儿的临床特征及基因变异特点,探讨基因变异与临床特征的关系。回顾性分析2019年5月和2021年12月于重庆医科大学附属儿童医院新生儿科病房就诊的两例发育迟缓、乳酸酸中毒新生儿的临床特征;利用全外显子测序检测患儿基因变异;对BCS1L蛋白进行同源建模,分析模型蛋白的结构和功能改变;分析基因变异与临床表型的相关性。结果显示,该家系两例患儿的主要临床特征为线粒体呼吸链复合体Ⅲ缺陷症表现,包括早产、发育迟缓、呼吸衰竭、乳酸酸中毒、胆汁淤积、肝功能异常、肾小管病变、凝血功能异常、贫血、低血糖、肌张力低下和早期死亡。全外显子测序发现BCS1L基因c.486_488delGGA(p.E163del)新型缺失变异和c.992C>T(p.T331I)新型错义变异,蛋白同源建模结构分析结果显示复合杂合变异对蛋白功能影响较大。综上,BCS1L基因新的变异位点c.992C>T(p.T331I)为“可能致病”变异,复合杂合变异与线粒体呼吸链复合体Ⅲ缺陷症疾病表型密切相关。
- 王明王冬娟舒逸朱丹余朝文何晓燕邹琳
- 关键词：发育迟缓乳酸酸中毒基因突变
- 利用CRISPR/Cas9构建G6PD基因c.1388G>A突变的HEK293/K562细胞株被引量：1
- 2019年
- 该文旨在利用CRISPR/Cas9构建G6PD基因c.1388G>A突变的HEK293/K562细胞株,为G6PD缺陷症及其修复研究提供细胞模型。针对G6PD基因c.1388G>A位点设计单链向导RNA(sg RNA)与突变同源臂,利用CRISPR/Cas9联合同源重组修复(HDR)构建G6PD基因c.1388G>A突变的HEK293细胞株与红白血病K562细胞株;qRT-PCR、Western blot检测G6PD基因表达;CCK8检测细胞增殖;G6PD/6PGD比值法检测G6PD酶活性;结晶紫染色与Annexin V-APC/7-AAD验证突变细胞株对氧化活性药物维生素K3与伯安喹的耐受情况。结果显示,成功构建CRISPR/Cas9双质粒载体系统;筛选单克隆细胞经测序鉴定显示,成功构建G6PD基因c.1388G>A突变的HEK293与K562细胞株,且无脱靶;进一步发现,c.1388G>A突变不影响HEK293与K562细胞G6PD基因mRNA转录与蛋白翻译,但细胞增殖减慢,G6PD酶活性下降;突变HEK293细胞对维生素K3与伯安喹的耐受力减弱,突变K562细胞对伯安喹耐受能力减弱。该研究成功构建G6PD基因c.1388G>A突变的HEK293与K562细胞株,为G6PD缺陷症及后期基因修复研究提供细胞模型。
- 张虹洋舒逸朱丹张佳邹琳张鹏辉
- 关键词：G6PD缺陷症
- 磷脂酶C通过抑制T-ALL细胞凋亡发挥促癌作用
- 2023年
- 目的:探讨磷脂酶C(PLC)家族各成员在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)进展中的作用。方法:泛PLC抑制剂U73122和Edelfosine处理T-ALL细胞,AnnexinV-PE/7-AAD双染法检测细胞凋亡。Cox回归和Kaplan-Meier法分析PLC蛋白对T-ALL患者无事件生存率(EFS)的影响。单因素方差分析PLC在各亚型T-ALL中的表达。构建PLCβ1、PLCγ1、PLCη1siRNA逆转录质粒,HEK-293T细胞包装逆转录病毒感染T-ALL细胞。利用RT-PCR和Westernblot检测基因表达。结果:4种T-ALL细胞系中,P12-ICH和CCRF-CEM对U73122和Edelfosine敏感,Jurkat和MOLT4对其耐药。TARGET-ALL数据库中,PLCβ1、PLCγ1、PLCη1高表达T-ALL患者预后不良,PLCβ1、PLCγ1、PLCη1在T-ALL各亚型中分布不均。在P12-ICH和CCRF-CEM中,PLCβ1、PLCγ1和PLCη1分别维持白血病细胞生存,而在MOLT4中,PLCβ1、PLCγ1和PLCη1对细胞生存无影响。结论:PLCβ1、PLCγ1和PLCη1能维持T-ALL细胞株体外生长,促进T-ALL恶性进展,是潜在的治疗靶点。
- 曾腊梅舒逸朱丹马德禹Filippus I Tshavuka张虹洋邹琳
- 关键词：磷脂酶C急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡预后
- 儿童重大疾病防控关键技术的研发与应用
- 邹琳田代印刘姗代继宏余朝文何晓燕符州包蕾舒逸刘之
- 项目组以肿瘤、肺疾病及遗传病儿童重大疾病为研究对象，研究其发病新机制、诊断新方法与治疗新靶点，推广应用至全国，提高患儿生存质量，取得如下创新性成果：
(一)针对肿瘤，以白血病和神经母细胞瘤(NB)为主要研究对象，研发2...
- 关键词：
- 关键词：基因诊断
- N-三甲基赖氨酸对急性B淋巴细胞白血病细胞增殖的影响
- 苑俊涛舒逸王毅陈卉刘姗谭俊杰邹琳
- 白血病细胞中Beta-Arrestin1与EZH2分子结合研究
- 2015年
- 目的:检测急性淋巴细胞白血病细胞(acute lymphoblastic leukemia,ALL)CCRF-CEM和Raji细胞中Beta-抑制蛋白1(Beta-Arrestin1)与Zeste增强子同源物-2蛋白(enhancer of Zeste homolog 2,EZH2)是否存在结合。方法:白血病细胞中,Western blot检测Beta-Arrestin1与EZH2表达水平,激光共聚焦(Confocal)检测Beta-Arrestin1与EZH2在细胞中的位置与共定位;免疫共沉淀(CO-IP)检测Beta-Arrestin1与EZH2结合能力。结果:Beta-Arrestin1与EZH2在白血病K562、CCRF-CEM和Raji细胞中均有表达。激光共聚焦结果显示Beta-Arrestin1与EZH2均在K562、CCRF-CEM和Raji细胞内共定位,CO-IP结果显示在K562,CCRF-CEM和Raji细胞中Beta-Arrestin1与EZH2结合。结论:在CCRF-CEM和Raji中,Beta-Arrestin1可与EZH2结合。
- 王毅舒逸秦茹陈卉苑俊涛邹琳
- 造血干细胞Hdac3基因促进鼠淋巴细胞分化
- 2019年
- 目的建立造血干细胞特异性Hdac3条件性敲除小鼠模型,探讨Hdac3基因对小鼠造血发育的影响。方法 Hdac3^(fl/fl)小鼠与Mx1-Cre小鼠杂交获得Hdac3^(fl/fl)Mx1-Cre小鼠,PCR鉴定小鼠基因型。连续注射poly(I:C),诱导Cre表达,得到造血干细胞Hdac3敲除鼠Hdac3^(fl/fl)Mx1-Cre^+(CKO)及对照组小鼠Hdac3^(+/+)Mx1-Cre^+(WT),Q-PCR分析Hdac3 mRNA表达水平。流式细胞术检测小鼠外周血淋巴细胞数量及比例。HE染色观察小鼠胸腺、脾脏形态学改变。流式细胞术检测小鼠外周血CD3^+、B220^+细胞比例。克隆形成实验分析小鼠造血干/祖(LSK)细胞的分化能力。结果成功建立造血干细胞Hdac3^(fl/fl)Mx1-Cre^+(CKO)小鼠模型。与对照组相比,CKO小鼠外周血淋巴细胞绝对数量(P<0.001)及比例(P<0.01)均显著降低;细胞亚群分析显示,CKO小鼠外周血CD3^+淋巴细胞及B220^+淋巴细胞显著减少(P<0.01,P<0.001),CD11b^+髓系细胞比例显著增加(P<0.01)。HE染色结果显示,实验组鼠胸腺和脾淋巴细胞数减少。克隆形成实验显示,实验组小鼠粒系克隆数无差异,前B细胞样克隆缺失。结论造血干细胞中Hdac3基因促进造血干细胞向淋巴细胞分化。
- 吕文琼舒逸杨碧洁张航张佳张虹洋周永杰石毓君邹琳张鹏辉
- 关键词：造血干细胞分化淋巴细胞发育
- 儿童社区获得性肺炎严重程度与血清细胞因子相关性研究被引量：2
- 2022年
- 目的探讨社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)患儿血清细胞因子与肺炎严重程度及其他基础辅助检测指标的相关性。方法回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院2020年10月至2021年1月105例住院CAP患儿临床资料,并对整体样本及不同亚组内重症和非重症CAP组间血清细胞因子水平进行比较。结果重症组CAP组血清白细胞介素(IL)-6水平高于非重症组,但差异无统计学意义(14.98ng/L vs.4.2ng/L,P=0.581),而IL-2、IL-4、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)及IL-17A水平在2组患儿间差异无统计学意义。不同病程亚组内,病程<14d组,重症CAP患儿血清IL-6水平明显高于非重症患儿,但差异无统计学意义(34.97ng/L vs.4.04ng/L,P=0.169);而病程≥14d组,重症与非重症CAP患儿血清IL-6水平无明显差异。相关性分析结果显示,仅在重症CAP亚组和病程<14d亚组,IL-6水平与C反应蛋白(CRP)呈显著正相关(r=0.521,P=0.008和r=0.467,P=0.000)。结论血清IL-6水平可作为较短病程CAP患儿病情严重程度的临床辅助指标,而对病程迁延或慢性病程者其临床参考价值待商榷。
- 彭单伊谭俊杰舒逸傅国罗征秀
- 关键词：社区获得性肺炎儿童细胞因子白细胞介素-6
- 儿童急性淋巴细胞白血病CD34^+CD38^-群细胞在NOD/SCID与NSG小鼠体内增殖能力的比较被引量：1
- 2013年
- 目的比较儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)CD34+CD38-细胞群在非肥胖糖尿病(non obese diabetic,NOD)/重症联合免疫缺陷(severe combined immunodeficient,SCID)小鼠与在NOD/SCID基础上敲除IL-2Rγ链的小鼠(NOD scid gamma,NSG)体内的复制能力。方法采用免疫磁珠法分选ALL患儿骨髓CD34+CD38-细胞(作为阳性细胞)及其他各群细胞(CD34+CD38+、CD34-CD38-、CD34-CD38+,作为阴性对照细胞),经尾静脉分别注射于NOD/SCID或NSG小鼠体内,104个/只,连续监测小鼠的发病情况并记录小鼠生存时间;进行小鼠外周血白血病细胞计数及外周血、骨髓血涂片检查;将濒死小鼠处死后,取肝、脾组织,进行病理学检查。结果 CD34+CD38-细胞注射入小鼠体内后,NOD/SCID小鼠的存活期为56~150 d,NSG小鼠的存活期为13~120 d;NOD/SCID小鼠外周血白细胞数量缓慢升高直至死亡或处死,NSG小鼠外周血白细胞数量从第7天开始升高,至75 d左右达高峰;NOD/SCID小鼠和NSG小鼠分别于注射CD34+CD38-细胞3周和2周后外周血涂片可见白血病细胞,NSG小鼠外周血涂片发现更多的蓝染幼稚细胞;NSG小鼠骨髓涂片中发现更多的圆形、外源整齐、蓝色深染的幼稚细胞;NSG小鼠脾脏组织中有明显的炎细胞团块,且组织疏松,NOD/SCID小鼠脾脏组织中未发现明显的炎细胞团块,且组织相对致密,两种小鼠的肝脏组织中均未发现明显的炎细胞团块和组织结构改变。结论 ALL CD34+C38-细胞在NOD/SCID小鼠及NSG小鼠体内均能增殖复制出白血病,NSG小鼠复制白血病的时间更短,恶性程度更高,且白血病的复制过程更接近人类白血病的病理过程。本实验为白血病发病机理的研究和临床用药的评价提供了更好的载体。
- 刘姗周晓燕周晓燕舒逸秦茹
- 关键词：急性淋巴细胞白血病NODSCID小鼠
- 利用胸腺类器官体外诱导小鼠T淋巴细胞分化
- 2021年
- 目的体外构建胸腺类器官,模拟胸腺组织三维结构,诱导多种来源小鼠造血干祖细胞(HSPC)向T细胞分化。方法构建表达小鼠Delta样经典缺刻基因配体1(DLL1)及绿色荧光蛋白(GFP)的逆转录病毒载体;通过逆转录病毒感染OP9小鼠骨髓间充质细胞,构建OP9-DLL1细胞系;实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测OP9-DLL1细胞DLL1的mRNA和蛋白表达,免疫荧光细胞化学染色检测OP9-DLL1细胞DLL1的表达和分布;提取C57BL/6小鼠E13.5胎肝HSPC及骨髓HSPC,分别与OP9-DLL1细胞按适当比例混合后离心压实,置于气-液交面培养;利用荧光显微镜观察胸腺类器官生长,流式细胞术检测T细胞表面CD3、CD4、CD8、CD25、CD44、CD45、CD117、T细胞受体β(TCRβ)表达,免疫荧光组织化学染色观察造血细胞在胸腺类器官的分布。结果成功构建表达小鼠DLL1及GFP的逆转录病毒载体,逆转录病毒感染OP9细胞后,通过GFP筛选获得OP9-DLL1细胞,OP9-DLL1细胞DLL1 mRNA和DLL1蛋白表达明显增加,DLL1蛋白表达于OP9-DLL1细胞膜。诱导培养40 d内,胸腺类器官状态良好且体积逐渐增大。胸腺类器官诱导T细胞程序性分化,HSPC分化为CD3+T细胞。结论通过OP9-DLL1细胞成功构建胸腺类器官,体外诱导多种来源小鼠HSPC向T细胞分化。
- 宫茂源傅国舒逸朱丹蒋婷婷王皓飚柳梓杨苏虹宇邹琳
- 关键词：T细胞分化体外
