胡双纲
- 作品数:12 被引量:27H指数:2
- 供职机构:上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市基础研究重大(重点)项目上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人OCTN2基因片段的克隆及其GST融合蛋白的原核表达
- 2009年
- 目的从人附睾组织中克隆OCTN2基因,构建PGEX-2T-OCTN2载体,原核表达人OCTN2重组蛋白。方法应用RT-PCR方法从人附睾组织中克隆OCTN2,利用ECoRⅠ和BamHⅠ酶切位点把OCTN2克隆到PGEX-2T载体,酶切和测序鉴定后,大量诱导重组蛋白并回收。结果从人附睾组织中克隆到人OCTN2的基因片段,构建了PGEX-2T-OCTN2载体,表达了预期相对分子质量的融合蛋白并大量回收。结论成功克隆OCTN2,表达并大量回收其融合蛋白,为制备人OCTN2特异性抗体、进一步研究附睾肉碱转运机制奠定了前期基础。
- 龚东明李铮郑敏朱晓斌平萍刘玉林张伟胡双纲王益鑫
- 关键词:重组蛋白质类附睾肉碱
- 反复IVF失败患者卵泡液代谢组学的检测分析被引量:9
- 2012年
- 目的:探讨与卵子发育潜能相关的代谢物质。方法:运用气相色谱-质谱仪(GC-MS)回顾性分析13例反复IVF失败(RIF组)和15例同期第1次行IVF-ET成功妊娠患者(对照组)的卵泡液代谢组学。结果:用偏最小二乘法分析样本主成分,结果显示RIF组和对照组的主成分积分值集中分布于2个不同区域,且反复IVF失败组较对照组有11种氨基酸含量显著升高,而二元羧酸、胆固醇及部分有机酸含量显著降低。结论:升高的缬氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、脯氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸,和降低的二元羧酸、胆固醇可能成为预测卵子发育潜能的代谢标志物。
- 夏兰赵晓明孙赟洪燕郑菊芬向祖琼姚宁赵磊文郭毅胡双纲
- 关键词:卵泡液代谢组学胚胎发育潜能
- 雄激素/雄激素受体对小鼠附睾Caveolin-1表达调控机制的研究被引量:2
- 2013年
- 目的:探讨雄激素和雄激素受体(AR)对小鼠附睾Caveolin-1表达的调控机制。方法:通过搜索前期染色体免疫共沉淀-测序(ChIP-seq)实验得到的小鼠附睾AR结合位点的数据库,寻找Caveolin-1基因相关联的AR结合位点。分别取正常小鼠、睾丸阉割小鼠以及睾丸阉割后补充外源雄激素的小鼠的附睾组织,一方面,抽提总RNA,利用逆转录PCR以及逆转录荧光定量PCR检测Caveolin-1基因的mRNA表达水平;另一方面,利用AR抗体进行染色体免疫共沉淀(ChIP),采用ChIP-PCR以及ChIP-qPCR的方法,检测Caveolin-1基因相关联的AR结合位点在体内与AR的结合情况。结果:从小鼠附睾AR结合位点的数据库中找到两个Caveolin-1相关联的AR结合位点,均位于第二内含子区域。睾丸阉割后,Caveolin-1基因的表达显著升高(P<0.05),表达量是对照组的(1.8±0.17)倍;两个AR结合位点的富集倍数分别由正常状态下的(13.5±1.47)倍和(10.5±1.03)倍降至(1.05±0.17)倍和(1.4±0.14)倍(P<0.01)。补充雄激素后,Caveolin-1基因的表达又降至正常水平(P<0.05),为正常对照组的(1.03±0.06)倍。两个AR结合位点的富集倍数则分别升至(16.4±2.6)倍和(10.0±0.92)倍(P<0.01)。结论:Caveolin-1在小鼠附睾内是AR的一个直接靶基因,其表达受雄激素的负调控。该研究为理解雄激素/AR在小鼠附睾内的调控网络提供了新的视角。
- 胡双纲姚广新孙赟
- 关键词:雄激素雄激素受体CAVEOLIN-1
- 雄激素通过雄激素受体途径调控小鼠附睾Fkbp5基因的表达被引量:1
- 2016年
- 目的初步研究小鼠附睾Fkbp5(FK506 binding protein 5)基因对雄激素的响应性以及相关的分子机制。方法建立小鼠去势以及雄激素补充模型。采用RT-PCR以及RT-qPCR,检测正常小鼠、去势小鼠以及去势后补充外源雄激素的小鼠附睾中Fkbp5基因的mRNA表达水平。搜索染色体免疫共沉淀-测序(chromatin immunoprecipitation-sequencing,ChIP-seq)数据建立的小鼠附睾全基因组雄激素受体(androgen receptor,AR)结合位点的数据库,寻找与Fkbp5基因相关联的AR结合位点。利用AR抗体进行染色体免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP),采用ChIP-PCR以及ChIP-qPCR的方法,检测Fkbp5基因相关联的AR结合位点在体内与AR的结合情况。结果去势后,Fkbp5基因的表达显著降低(P<0.05);补加雄激素后,Fkbp5基因的表达又升至正常水平(P<0.05)。从小鼠附睾AR结合位点的数据库中鉴定到14个Fkbp5相关联的AR结合位点。ChIP-PCR结果显示,在正常生理状态下,这14个结合位点均与AR结合。ChIP-qPCR结果显示,去势后,这14个AR结合位点的富集倍数均显著下降(P<0.05);而补加雄激素后,这些AR结合位点的富集倍数又显著上升至生理水平(P<0.05)。结论 Fkbp5在小鼠附睾内的表达受雄激素的正调控,并且是AR的一个直接靶基因。该研究首次证实了Fkbp5的启动子以及上游增强子区域存在雄激素响应元件,为探究雄激素/AR对Fkbp5的调控机制提供了新的视角。
- 徐迎陈沁胡双纲
- 关键词:雄激素雄激素受体
- 种子到胚胎的奇妙旅程
- 2024年
- 当准妈妈体内孕育着小生命时,整个家庭都充满着期待与喜悦。但孕育的过程并不总是一帆风顺:有的夫妻备孕不太顺利,不知要去何处寻求帮助;有的准妈妈在孕期遇到一些不适,却又不知该不该治疗,要如何治疗;让新手准妈妈更为担心的是,生产时是否会疼痛,是否能顺利……。
- 吴婷胡双纲
- 关键词:准妈妈
- 胚胎植入前遗传学诊断及筛查中7-细胞来源与9-细胞来源囊胚胚胎正常率和临床妊娠率的比较被引量:2
- 2018年
- 目的研究在胚胎植入前遗传学诊断及筛查(PGD/PGS)中7-细胞来源与9-细胞来源囊胚的胚胎正常率和临床妊娠率,探讨胚胎体外培养第3日时的最适分裂速度。方法回顾性分析2014年4月1日—2015年12月31日期间207例PGD/PGS治疗周期的临床资料。比较7-细胞来源与9-细胞来源囊胚的胚胎正常率和临床妊娠率。结果 7-细胞来源与9-细胞来源囊胚的胚胎正常率分别为34.38%和52.63%,两者比较差异有统计学意义(c2=4.100,P=0.042 9)。7-细胞来源与9-细胞来源囊胚的临床妊娠率分别为55.56%和57.14%,两者比较差异无统计学意义(c2=0.004,P>0.05)。结论在PGD/PGS中,9-细胞来源囊胚的胚胎正常率比7-细胞来源囊胚高,移植的两类胚胎能够获得类似的临床妊娠率。在体外培养第3日选择胚胎移植时,如果胚胎的分级相同,那么9-细胞胚胎优于7-细胞胚胎。
- 李昀仲万霞姚宁胡双纲刘洪卯
- 关键词:临床妊娠率
- 冷冻复苏睾丸精子和新鲜睾丸精子行卵胞浆内单精子注射的临床效果分析
- 胡双纲刘建伟
- 人HoxA10基因真核表达载体构建和表达产物的鉴定被引量:2
- 2013年
- 目的:克隆人子宫内膜容受性标志分子HoxA10基因的cDNA,转入真核细胞载体,并在293T细胞中进行表达和鉴定。方法:应用RT-PCR法从人子宫内膜组织中扩增HoxA10基因的cDNA编码区序列,将PCR产物克隆至pCMV-HA真核表达载体中,测序鉴定该载体。以LipofectamineTM2000将该载体转染入293T细胞中,Western blotting检测HoxA10蛋白的表达。结果:PCR扩增出的人HoxA10基因cDNA正确克隆到了pCMV-HA载体,成功构建了pCMV-HA-HoxA10重组载体;将其转染入293T细胞,用HoxA10和HA抗体进行Western blotting,均检测到了融合蛋白的表达。结论:携带有HA蛋白标签的人HoxA10基因的真核表达载体pCMV-HA-HoxA10克隆及表达成功,为进一步研究HoxA10与其它蛋白质的相互作用以及建立HoxA10的荧光素酶报告基因分析系统奠定了基础。
- 胡双纲姚广新赵晓明孙赟高玉平
- 关键词:HOXA10基因真核表达载体293T细胞基因表达
- 精子表面的GPI锚定蛋白被引量:2
- 2008年
- 糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白(GPI-APs)是一类通过其羧基末端的糖基化磷脂酰肌醇结构锚定于真核细胞膜表面而不跨越其磷脂膜双层的蛋白。精子上的GPI-APs是一类重要的精子表面蛋白,已报道的有十几种,功能多样,在精子的发生、成熟、获能、受精以及免疫保护等方面起着重要作用。这类蛋白有些可能是某些男性不育症潜在的诊断和治疗靶点,有些则是有前景的免疫避孕候选靶标。
- 邹美胡双纲胡建民
- 关键词:精子免疫避孕
- MicroRNA在抑郁症中作用的研究进展被引量:2
- 2013年
- 微小RNA(miRNA)是一类近年发现的在生物体内广泛分布的长约22个核苷酸的非编码新型微小RNA。它通常是通过与靶mRNA的3'UTR结合,抑制mRNA翻译或介导mRNA降解来调控生物体内一系列的生理、病理过程。近年来研究显示miRNA在抑郁症的发生、发展中扮演着重要的角色。文章就miRNA与抑郁症的相关性及在抑郁症发病机制和治疗等方面的研究进展进行综述,以期对深入认知和最终治愈抑郁症带来新的启示。
- 李进张朝宝邹美胡双纲
- 关键词:抑郁症