罗丹枫
- 作品数：19 被引量：44H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新型肿瘤导向肽融合抗菌肽对肿瘤细胞的杀伤效应及机制被引量：1
- 2013年
- 目的 将新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽相融合,以增强对肿瘤细胞的杀伤效应.方法 验证新型多肽对肿瘤细胞的亲和能力,经融合多肽作用后,噻唑蓝（MTT）、流式细胞仪实验检测细胞的增殖与凋亡,Boyden小室分析对细胞侵袭转移能力的影响,Western blot检测细胞中活化的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3、-8、-9的表达水平.结果 薪型融合多肽具有对肿瘤细胞的亲和能力,20 μmol/L的融合多肽引起近100％ PE-3M-1 E8和95％ MKN-45细胞死亡,10 μmol/L的融合多肽诱导（82.15±1.20）％ PC-3M-1E8细胞及（84.27 ±3.20）％的MKN-45细胞发生凋亡,而其侵袭转移能力下降为（52.38±3.30）％、（46.16±2.70）％,其机制和细胞中的Caspase-3、-8、-9活化有关.结论 新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽融合后显示强烈的肿瘤细胞杀伤效应.
- 马湘一杨书红刘荣华罗丹枫马丁奚玲
- 关键词：肿瘤靶向治疗抗菌肽
- 端粒酶逆转录酶在脐静脉内皮细胞耐受曲古抑菌素A诱导凋亡中的作用
- 2007年
- 目的观察曲古抑菌素A（TSA）对脐静脉内皮细胞及官颈癌细胞凋亡、端粒酶逆转录酶（hTERT）表达的影响,并探讨hTERT在脐静脉内皮细胞耐受TSA中的作用。方法磺酰罗丹明B （RSB）法检测药物动力学特征;流式细胞仪检测周期改变和凋亡;RT-PCR检测hTERT和p21^Waf1基因表达变化;免疫荧光结合流式细胞术检测hTERT蛋白表达变化;转染hTERT质粒后,PCR-TRAP- ELISA法检测转染细胞端粒酶活性;AnnexinV／PI检测转染细胞在TSA作用下的早期凋亡。结果在大剂量TSA作用脐静脉内皮细胞后,增殖抑制、周期阻滞,但凋亡并不显著;HeLa细胞在相同剂量的TSA作用下凋亡明显。脐静脉内皮细胞经TSA诱导后,hTERT表达上调,p21^Waf1则无明显变化;而HeLa细胞p21^Waf1表达上升,hTERT表达下降。转染显性负突变hTERT的脐静脉内皮细胞,其端粒酶活性显著低于对照组。TSA作用转染不同质粒的脐静脉内皮细胞的凋亡率与对照组差异有统计学意义。结论脐静脉内皮细胞可以耐受大剂量TSA诱导的凋亡,hTERT表达上调可能是脐静脉内皮细胞耐受TSA诱导凋亡的重要机制之一。
- 吴鹏奚玲陈刚王蓓蓓罗丹枫卢运萍周剑锋马丁
- 关键词：曲古抑菌素A凋亡端粒酶逆转录酶P21^WAF1
- HSP27在卵巢癌顺铂耐药细胞系中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨HSP27在卵巢癌耐药细胞系及敏感细胞系中的表达及其在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法通过RT-PCR及Western blot检测卵巢癌细胞株OV2008和CI3K中HSP27 mRNA和蛋白的表达水平;将合成的针对HSP27基因的特异性siRNA及正义真核表达质粒pEGFP-C1-HSP27(命为p-HSP27),分别转染CI3K和OV2008细胞。通过RT-PCR及Western blot检测转染前后CI3K及OV2008细胞中HSP27 mRNA和蛋白表达的变化;MTT及流式细胞仪分别测定转染前后CI3K及OV2008细胞对顺铂敏感度的变化。结果 (1)HSP27在CI3K细胞中的mRNA和蛋白表达水平显著高于OV2008细胞,差异有统计学意义(P<0.05);(2)转染siRNA48 h,CI3K细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50)明显低于转染空载体和未转染的CI3K细胞(P<0.05);转染正义质粒p-HSP27 48 h,OV2008细胞对顺铂的IC50明显高于转染空载体和未转染的OV2008细胞(P<0.05);(3)转染siRNA及正义质粒48 h,再用顺铂作用CI3K细胞24 h。转染siRNA的CI3K细胞的凋亡率比转染空载体和未转染的CI3K细胞的凋亡率明显增加,前者明显高于后两者(P<0.05);转染正义质粒的OV2008细胞的凋亡率比转染空载体和未转染的细胞的凋亡率明显下降,前者明显低于后两者(P<0.05)。结论 CI3K及OV2008细胞内HSP27基因表达的强弱可影响其对顺铂的敏感度,提示HSP27可能在卵巢癌顺铂耐药中起重要作用。
- 李海燕王常玉石英翁艳洁王鸿艳罗丹枫
- 关键词：HSP27卵巢癌SIRNA顺铂药物抵抗
- 基因芯片技术检测TSA诱导MOLT-4细胞凋亡的基因表达的改变TSA增强人卵巢癌顺铂耐药株C13*对顺铂敏感性的体外研究
- 目的:利用基因芯片技术检测T r i c h o s t a t i n A /( TSA/)诱导MOLT-4细胞凋亡的基因表达的改变,分析、鉴定、验证与凋亡相关差异表达基因。
方法:确定不同浓度、时间...
- 罗丹枫
- 关键词：TSA细胞凋亡TSA顺铂
- 文献传递
- XPNPEP2介导肿瘤导向多肽TMTP1入胞并选择性诱导肿瘤细胞凋亡的分子机理研究
- 目的：寻找、验证肿瘤靶向多肽TMTP1的受体，并对TMTP1靶向肿瘤作用的分子机理做初步探讨，寻找肿瘤治疗可能的新靶点。
方法：利用Pulldown技术寻找TMTP1可能的受体，通过逆向亲和实验、生物信息学分析...
- 罗丹枫
- 关键词：受体HSP27细胞凋亡
- 文献传递
- 环孢素A延长腺病毒基因治疗载体体内存在时间的研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究重组腺病毒载体在免疫抑制疗法应用中的安全性并探讨环孢素A对该载体在体内清除的影响。方法采取腹膜后注射纯化重组腺病毒建立动物模型,连续给予环孢素A 14 d,取不同时间点大鼠样本,HE染色观察各主要脏器病理反应,免疫组化方法检测肝、脾、肺、肾、肌肉及淋巴结腺病毒的表达情况。结果①HE染色切片,各脏器呈现一过性可逆性轻微炎性反应。②免疫组化检测,对照组中重组腺病毒逐渐减弱至阴性,实验组中重组腺病毒存在时相性明显延长(P<0.05)。③腺病毒分布呈现肝脾肺高表达而其它组织表达相对较低。结论重组腺病毒作为基因治疗载体在免疫抑制疗法应用中具有一定的安全性,环孢素A能够部分抑制实验动物体内的免疫反应从而延长重组腺病毒在体内存在的时间。
- 夏曦王蓓蓓陈刚吴鹏罗丹枫李辅军郉辉王金韬卢运萍周剑锋马丁
- 关键词：环孢素A腺病毒基因治疗载体免疫抑制疗法
- 新型肿瘤导向肽TMTP1融合抗菌肽抑制裸鼠胃癌和前列腺癌移植瘤的生长与转移被引量：3
- 2013年
- 目的 探讨新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽D（KLAKLAK）2偶联后对胃癌、前列腺癌生长与转移的抑制效应.方法 建立人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤模型和胃癌裸鼠原位移植瘤模型,分别腹腔注射50 μmol/L磷酸盐缓冲液（对照组）、50 μmol/L TMTP1（TMTP1组）和50 μmoL/LTMTP1-GG-D（KLAKLAK）2[TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组],验证新型融合多肽TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2对肿瘤组织的亲和能力,测量瘤体大小,行形态学观察,采用原位细胞凋亡法检测肿瘤组织的凋亡并绘制生存曲线.结果 在前列腺癌皮下移植瘤中,对照组、TMTP1组和TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组裸鼠的中位生存时间分别为50、55和70 d（P ＜0.05）,肿瘤体积分别为（2.5±0.3）cm3、（1.8±0.2）cm3和（0.3 ±0.1）cm3（P ＜0.01）.在胃癌皮下移植瘤中,对照组、TMTP1组和TMTP1-GG-D （KLAKLAK）2组裸鼠的中位生存时间分别为25、30和45 d（P ＜0.05）,肿瘤体积分别为（3.8±0.4）cm3、（3.2 ±0.2）cm3和（0.4±0.1）cm3（p＜0.01）.在胃癌原位肿瘤中,对照组和TMTP1组裸鼠的胃组织可见巨大的原位肿瘤,而TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组原位肿瘤体积明显缩小.对照组和TMTP1组裸鼠的肝脏、脾脏和腹壁均可见白色转移灶,TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组裸鼠无肉眼可见转移灶.对照组、TMTP1组和TMTP1-GG-D（KLAKLAK）2组细胞的凋亡率分别为（31.9±1.5）％、（37.2±2.3）％和（69.7±2.1）％（P＜0.01）.结论 新型肿瘤导向肽TMTP1与抗菌肽融合后可有效抑制肿瘤的生长与转移,有望成为一种新型的抗肿瘤药物.
- 马湘一李姝罗丹枫刘荣华卢运萍王世宣马丁奚玲
- 关键词：前列腺肿瘤靶向治疗抗菌肽裸鼠
- 重组蛋白sCAR-TMTP1增强腺病毒对骨肉瘤细胞基因转染效率的研究
- 2016年
- 目的提高腺病毒(adenovirus,ADV)在缺乏柯萨奇腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)的骨肉瘤细胞中的转染效率。方法通过昆虫(Bac-to-Bac)杆状病毒表达系统表达含有CAR胞外段(s CAR)及TMTP1肽的重组蛋白(s CAR-TMTP1),并对其纯化、鉴定。流式细胞仪分别检测骨肉瘤细胞及人胚肾细胞293(HEK293)的CAR表达水平,ADV对其的感染效率及FITC-TMTP1的结合能力。重组蛋白s CAR-TMTP1与ADV共同孵育形成复合物,流式细胞仪研究其在缺乏CAR的骨肉瘤细胞(MG-63)中的转染效率。结果表达及纯化的s CAR-TMTP1蛋白在相对分子质量约31 000处可见特异蛋白条带,感染的sf9细胞裂解上清可与兔抗小鼠s CAR单克隆抗体发生特异性反应。MG-63可与FITCTMTP1特异结合,其CAR表达水平低,ADV转染效率低。经s CAR-TMTP1修饰后的ADV/GFP对MG-63细胞的感染效率显著高于未经修饰的含报告基因GFP的ADV(ADV/GFP)。结论重组蛋白s CAR-TMTP1可显著提升ADV对缺乏CAR的骨肉瘤细胞的转染效率。
- 罗丹枫龚静吉程腾魏睿魏军成祝文涛
- 关键词：骨肉瘤腺病毒重组蛋白
- 葡萄糖调节蛋白78在乳腺癌细胞侵袭及转移中的作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在乳腺癌细胞(231)侵袭、转移过程所起的作用。方法构建GRP78真核反义表达载体,转染入231细胞,利用PCR和蛋白印迹方法检测转染有反义GRP78的231细胞和MCF-7细胞的GRP78表达情况;并用伤口愈合实验和体外侵袭实验证验转染细胞转移和侵袭的变化。结果转染反义GRP78的231细胞内GRP78RNA和蛋白表达明显低于未转染细胞;反义GRP78基因对乳腺癌细胞231细胞的侵袭和转移有抑制作用。结论GRP78是乳腺癌的一个促癌基因,下调GRP78基因表达能明显抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移能力。GRP78为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。
- 刘荣华王世宣马湘一罗丹枫王梅卢运萍马丁
- 关键词：乳腺肿瘤葡萄糖调节蛋白78
- GRP78在三种不同乳腺癌细胞的表达及其意义被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在高低转移对的乳腺癌细胞的表达及其意义。方法:分别采用半定量RT-PCR,蛋白免疫印迹法和细胞免疫荧光方法检测GRP78在三种不同乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、435S和MCF-7)的mRNA蛋白表达及其亚细胞定位情况。结果:GRP78 mRNA和蛋白在(MDA-MB-231细胞的表达最高,其次为(MDA-MB-435S,在MCF-7的表达最低;共聚焦显微镜下观察到GRP78蛋白主要定位在细胞浆,在细胞膜以及细胞核内也有少量的表达。结论:GRP78是乳腺癌的一个促癌基因,在乳腺癌的发生、发展过程中发挥着重要作用,其可作为抗乳腺腺癌治疗的一个新的分子靶点。
- 刘荣华王世宣马湘一罗丹枫卢运萍马丁
- 关键词：乳腺癌癌基因葡萄糖调节蛋白78
