秦锐
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：黑龙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- pdc和adhⅡ基因表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达
- 随着当今世界经济的飞速发展和人口数量的快速增长，使得对各种自然资源的需求量日益增加，特别是以石油为代表的不可再生资源。燃料乙醇有望成为未来替代石油的能源。利用微生物将木质纤维素转化成乙醇已成为当前研究的热点。丙酮酸脱羧酶...
- 秦锐
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- 重组大肠杆菌内PDC和ADH表达条件优化
- 2015年
- 丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶II可将丙酮酸定向转化成乙醇。将已构建的含有丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶II基因的表达载体p ET-28a(+)-pdc-RBS-adh B转入大肠杆菌BL21中,实现在大肠杆菌体内高产乙醇的目的。对该工程菌株进行定性检测,优化诱导表达条件,定量检测,SDS-PAGE分析和做发酵试验,结果表明丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶II的最佳表达条件为IPTG浓度1.0 mmol/L,诱导时间7 h,诱导温度37℃。其最大酶活分别为1.34 U/mg和3.88 U/mg。重组子利用葡萄糖、木糖和混合糖发酵。在葡萄糖中发酵72 h,获得最大乙醇产量6.86 g/L,最高乙醇得率0.40 g/g。
- 叶广彬葛菁萍秦锐宋刚平文祥
- 关键词：丙酮酸脱羧酶
- 丙酮酸脱羧酶基因和乙醇脱氢酶基因表达载体的构建被引量：2
- 2012年
- 以运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)的总DNA为模板,PCR扩增运动发酵单胞菌中的丙酮酸脱羧酶(Pyruvate decarboxylase,PDC)基因和乙醇脱氢酶Ⅱ(Alcohol dehydrogenaseⅡ,ADHⅡ)基因。将丙酮酸脱羧酶基因和含核糖体结合位点(RBS)的乙醇脱氢酶基因串联起来置于T7启动子控制下,构成多顺反子表达质粒pQR-PRA。经酶切和PCR验证,表达载体构建成功。将pQR-PRA转入大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21中,转化子的定性检测表明有酶表达,并且初步测定了2种酶的表达量。
- 辛亮秦锐宋刚由田平文祥葛菁萍
- 关键词：运动发酵单胞菌大肠埃希菌丙酮酸脱羧酶乙醇脱氢酶
